连翘提取物对小鼠酒精肝的保护作用

李振坤，刘诗语，李朝一，白艳雄，李丽娟

（晋中信息学院，山西 太谷 030800）

酒精肝为长时间过量饮酒或短时间内大量饮酒，导致肝脏细胞坏死，肝组织及功能受损的肝脏损伤性疾病，大多数可以治愈。在中医中认为是大量饮酒导致的气滞肝郁，治疗时可采用清湿热、健脾疏肝的药物和方法。现如今治疗酒精肝的常用药物为美他多辛片、糖皮质激素等。这些药物均具有一定的副作用，如出现神经损害、头晕、恶心等病理症状。连翘有疏散风热、清热解毒、消肿散结的功效。其中含有的苯乙醇苷类物质和齐墩果酸，这些物质具有肝保护作用。

1.1 连翘提取 使用水萃法提取连翘的有效物质，将20g连翘放入200g蒸馏水中加热煮沸1h，将连翘取出再次加200g蒸馏水煮沸1h。将两次连翘溶液混合过滤，将滤液分为4份装入烧杯中。滤液放入烘干机中设定温度100℃，直到滤液浓缩为膏状时停止烘干，取出膏状提取物，配成50mg/mL的溶液备用。

1.2 药物处理 取15只体重为18～22g的ICR小鼠随机平均分为3组，分别为对照组（A组）、生理盐水+酒精组（B组）、酒精+连翘组（C组）。A组处理：7d定时灌胃生理盐水0.2mL；
B组处理：前6d灌胃0.2mL生理盐水，第7d灌胃60%酒精溶液0.2mL；
C组处理：前6d灌胃连翘提取物溶液0.2mL第7d灌胃60%酒精溶液0.2mL。（见表1）。

1.3 标本采集 第7天灌胃结束后16h，称量小鼠体重并将全部小鼠颈椎脱臼处死，并将小鼠肝脏取出经不同浓度酒精脱水、石蜡包埋、切片、HE染色后封片。

表1 小鼠水平处理

2.1 切片观察 小鼠肝脏切片经HE染色后，在显微镜下观察肝细胞。A组小鼠肝脏切片可见肝细胞呈放射性围绕在肝门静脉并紧密排列，肝细胞正常无变性。B组小鼠肝脏切片肝细胞排列松散无序、变性肿大或紧缩，形成结构杂乱的肝细胞团块，出现炎症浸润现象。C组小鼠肝脏切片与B组相比无杂乱细胞团块和明显变性，但细胞排列与A组相比较为松散无序。C组肝细胞损伤与B组损伤相比较小，说明连翘提取物对小鼠酒精肝损伤具有明显保护作用。（见图1）。

图1 显微镜观察

2.2 连翘提取物对体重及肝指数影响 在饲养期间小鼠饮食、饮水均正常，B、C组注射60%酒精后出现呆滞、步态不稳等现象。B组和C组肝指数与A组相比有所增加，B组增大较C组明显，说明连翘提取物对肝脏炎症保护有一定效果，（见表3）。使用软件IBM SPSS Statistics对小鼠体重进行单因素方差分析得出p=0.194＞0.05，无组间差异性，体重（见表2）。

表2 处理前后体重变化

小鼠体重无差异性的原因可能是急性酒精肝造模时间较短，对体重和肝脏的影响不明显。酒精主要在肝脏中代谢，酒精及其代谢产物阻碍肝脏的解毒能力导致肝细胞造成损伤，还能激活库弗氏细胞产生自由基和TNF、IL-6等细胞炎性分子，都能对细胞和组织造成损害。通过多种途径对肝脏造成损伤。连翘的功效有清热解毒、消肿散结。其中主要含有苯乙醇苷类物质和齐墩果酸，能够抗炎、抗菌，具有降低谷丙转氨酶的作用。C组和B组的切片观察对比与肝指数说明，连翘提取物对肝脏炎症浸润和肿大都具有治疗保护作用。连翘提取物对酒精肝损伤具有保护作用。

表3 处理后肝指数

本次实验采用水萃法提取连翘中的有效物质，对小鼠进行不同药物的灌胃处理。结束后称量比较3组小鼠的体重及肝指数的变化，显微镜观察肝脏切片。C组小鼠的肝细胞状况明显好于B组小鼠肝脏细胞，分析实验结果得出结论连翘提取物对酒精肝具有保护作用。希望本次研究能对酒精肝的临床治疗提供参考，但不同程度的酒精肝损伤所需的计量任然需要进一步的研究。