2020-2021学年高二下学期,人教版(2020)生物选择性必修3第一章,第2节,,,第1课时　微生物基本培养技术,,,练习

　 第 1章 发酵工程

　第 2节 微生物的培养技术及应用

　第 1 课时 微生物的基本培养技术

　一、选择题 1.不同培养基的具体配方不同,但一般都含有 (

　) A.水、蛋白质和维生素 B.碳源和氮源 C.水、碳源、氮源和无机盐

　D.磷元素、硫元素、钾元素、镁元素 2.培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是 (

　) ①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线消毒 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法 A.⑤③②①④⑥

　 B.①②④③⑤⑥ C.⑥②⑤④①③

　 D.③④②①⑥⑤ 3.自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是 (

　) A.碳源

　 B.氮源

　C.无机盐

　D.特殊营养物质 4.灭菌的标准是 (

　) A.杀死所有的微生物

　B.杀死所有的微生物的细胞、芽孢和孢子 C.杀死所有的病原微生物

　D.使病原菌不生长

　5.消毒和灭菌是两个不同的概念,灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死部分微生物而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理 (

　) ①皮肤 ②饮用水 ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿 ⑥接种环 ⑦培养基 ⑧果汁 ⑨酱油 ⑩手术刀 A.①②③⑧⑨

　B.④⑤⑥⑦⑩ C.①②③④⑤⑥⑧

　D.以上全部 6.在恒温箱中培养微生物时,平板要倒置的主要原因是 (

　) A.利于通气 B.利于微生物的快速繁殖 C.防止菌落粘连影响观察 D.防止皿盖内的冷凝水滴入培养基 7.防止杂菌入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是 (

　) A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒 B.接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰上灼烧灭菌 C.在实验室中,切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,防止被实验室内的微生物感染 D.进行平板划线接种时,应先将皿盖打开并放置于桌面,以便于划线操作 8.不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以 CO 2 为唯一碳源的自养微生物所需营养的描述中,不正确的是 (

　) A.氮源物质为该微生物提供必要的氮元素

　B.碳源物质也是该微生物的能源物质 C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D.水是该微生物的营养要素之一

　9.下列关于微生物实验操作的叙述,错误的是 (

　) A.培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌 B.接种前后,接种环都要在酒精灯火焰上灼烧 C.接种后的培养皿要倒置,防止杂菌污染 D.菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基 10.用培养液培养三种细菌,让它们在三支不同的试管中生长,图显示了细菌的生长层,如果此时往三支试管中通入氧气,则细菌的繁殖速度将是表中的 (

　)

　 选项

　Ⅰ号试管

　Ⅱ号试管

　Ⅲ号试管

　A

　加快

　减慢

　不变

　B

　减慢

　加快

　加快

　C

　加快

　减慢

　减慢

　D

　减慢

　加快

　减慢

　二、不定项选择 11.(不定选)图是微生物平板划线的示意图。划线的顺序为 1→2→3→4→5。下列叙述错误的是 (

　)

　A.在五个区域中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌 B.进行划线操作时完全打开皿盖,划完立即盖上 C.接种时不能划破培养基,否则难以达到分离单菌落的目的 D.第 1 区和第 5 区的划线最终要连接起来,以便比较前后的菌落数 12.(不定选)如图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤,下列说法错误的是 (

　)

　 A.① 步骤使用的培养基可以采用高压蒸汽灭菌法灭菌 B.①②③④步骤操作时都需要在酒精灯火焰旁进行 C.操作③过程中,每次划线前后都需要对接种环进行灼烧处理 D.图中操作结束后需在培养皿皿盖上标注菌种及接种日期等信息 三、解答题 13.在生物技术上常利用大肠杆菌制成“工程菌”。某生物小组的同学,利用实验室提供的大肠杆菌品系及其他必要材料,对该品系大肠杆菌进行培养。请分析回答下列问题: (1)微生物在生长过程中对各种成分的需求量不同,故制备培养基时各成分要有合适的

　 。培养基中含有的蛋白胨和淀粉分别可以为微生物提供

　、

　。

　(2)配制培养基时,需将 pH 调至

　或弱碱性。

　(3)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是

　 。

　14.下表是某微生物培养基的配方。请分析回答下列问题: 编号

　①

　②

　③

　④

　⑤

　成分

　(NH 4 ) 2 SO 4

　KH 2 PO 4

　FeSO 4

　CaCl 2

　H 2 O

　含量

　0.4 g

　4.0 g

　0.5 g

　0.5 g

　100 mL

　(1)从培养基的营养成分看,此培养基可用来培养的微生物的同化作用类型是

　。利用该培养基培养微生物时,微生物所需的碳源来自

　。

　 (2)此表中含有的微生物的营养成分包括

　。

　 (3)若除去该培养基中的①后再加入不含氮元素的有机物,则此培养基可培养的微生物种类是

　 。

　 (4)培养基中若加入氨基酸,则它可充当的营养成分是

　。

　 (5)若要观察微生物的菌落的特点,培养基中还应添加的成分是

　。

　15.回答下列与酵母菌有关的问题: (1)分离培养酵母菌通常使用

　 (填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”)培养基,该培养基应采用

　灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后可观察到菌落,菌落的含义是

　。

　(2)酵母菌在液体培养基中培养时,若通入氧气,可促进

　(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”);若进行厌氧培养,可促进

　(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”)。

　(3)制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松软的原因是

　。

　16.酸奶是牛奶经过乳酸菌发酵制成的。乳酸菌可将牛奶中的乳糖转化为乳酸,从而减轻某些人群的乳糖不耐受的症状。请回答下列问题: (1)为鉴别市售酸奶中的菌种,应该采用

　法或稀释涂布平板法在固体培养基上进行接种,观察所获单菌落的特征。在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间,这样做的目的是

　 。

　(2)采用平板划线法分离水样中的乳酸菌。操作时,接种环要通过

　灭菌。在第二次及以后划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是

　 。

　(3)某同学在配制平板时加入 CaCO 3 ,从而成功筛选出能产生乳酸的菌株。其筛选依据的原理是

　。

　并且单菌落周围

　越大,说明该菌株产生乳酸的能力越强。

　(4)发酵到后期时,乳酸含量继续增加,当乳酸浓度达到 1.2%时,发酵速度逐渐变缓甚至停止,主要原因是

　。

　(5)含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶。其理由是

　。

　答案 1.C 2.A 【解析】

　培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌;培养皿耐高温,需用干热灭菌法灭菌;接种环可用灼烧灭菌的方法迅速彻底地灭菌;实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒,如用酒精棉球擦拭双手;空气可用紫外线消毒;对牛奶而言,为不破坏其营养成分可采用巴氏消毒法消毒,综上所述,A正确。

　3.A 【解析】

　自养型微生物与异养型微生物的主要差别在于自养型微生物可以利用无机碳合成自身的有机物,用于各项生命活动;而异养型微生物只能以有机碳作为碳源,所以两种培养基的主要差别在于碳源,A正确。

　4.B 【解析】

　微生物培养中,灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子,所以 B 正确,A、C、D错误。

　5.A 【解析】

　皮肤可用酒精消毒,饮用水可用氯气消毒,牛奶采用巴氏消毒法消毒,果汁和酱油宜采用消毒方法处理,避免营养成分被破坏,①②③⑧⑨符合题意;注射器需要进行灭菌处理,培养皿可进行干热灭菌,接种环可进行灼烧灭菌,培养基、手术刀可进行高压蒸汽灭菌,综上所述,A 符合题意。

　6.D 【解析】

　在恒温箱中培养微生物时,为了防止皿盖内的冷凝水滴入培养基造成杂菌污染,平板要倒置,D正确。

　7.D 【解析】

　实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒,A项正确;接种环、接种针等金属用具,可直接在酒精灯火焰上灼烧灭菌,B 项正确;在实验室中,切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,防止被实验室内的微生物感染,C 项正确;进行平板划线接种时,应在酒精灯火焰旁接种,接种过程中不能将皿盖完全打开,D项错误。

　8.B 【解析】

　CO 2 只能作为碳源,不能作为能源物质,B 错误。

　9.A 【解析】

　培养微生物的培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌,微生物的接种工具,如接种针、接种环或其他金属用具一般通过酒精灯火焰灼烧来灭菌,A错误;接种前,接种环要在酒精灯火焰上进行灼烧,防止接种环上附着的微生物对实验结果造成干扰,接种后灼烧接种环可以防止微生物扩散,

　污染接种室或者超净台,影响整体接种环境,B 正确;接种后的培养皿要倒置,防止冷凝水落入培养基造成污染,C 正确;在固体培养基表面可形成单菌落,故菌种的分离和菌落的计数都可以使用固体培养基,D正确。

　10.B 【解析】

　Ⅰ号试管内的细菌在试管底部,为厌氧菌,Ⅱ号试管内的细菌均匀分布在试管中,为兼性厌氧菌,Ⅲ号试管内的细菌在试管上部,为好氧菌。向试管内通入氧气,能够促进兼性厌氧菌和好氧菌的代谢,但会抑制厌氧菌的繁殖,综上所述,B 正确。

　11.ABD 【解析】

　在每次划线前后都要对接种环进行灭菌;进行划线操作时,左手将培养皿的皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖;注意接种时不能划破培养基,否则难以达到分离单菌落的目的;第 1 区和第 5 区的划线不能相连。

　12.BD 【解析】

　①步骤使用的培养基可以采用高压蒸汽灭菌法灭菌,A正确;①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行,防止被杂菌污染,④为大肠杆菌培养,不需要在酒精灯火焰旁进行,B 错误;划线接种时,每次划线前后都需要对接种环进行灼烧灭菌处理,C 正确;图中操作结束后需在培养皿皿底上标注菌种及接种日期等信息,D错误。

　13.(1)浓度和比例 氮源、碳源和维生素 碳源 (2)中性 (3)高压蒸汽灭菌法 【解析】

　(1)培养基中各成分要有合适的浓度和比例,保证微生物有充足的营养,又不会因外界浓度过大而失水。淀粉提供碳源,而蛋白胨含 C、N等元素,既能提供碳源,又能提供氮源和维生素。(2)培养细菌时需将培养基 pH调至中性或弱碱性。(3)培养基灭菌用高压蒸汽灭菌法。

　14.(1)自养型 空气中的 CO 2

　(2)水、无机盐、氮源 (3)自生固氮微生物 (4)碳源、氮源和特殊营养

　(5)凝固剂(琼脂) 【解析】

　(1)从培养基的成分看,该培养基中不含有机物,

　因此可以培养自养型微生物,微生物所需的碳源只能由空气中的 CO 2 提供。(2)表中培养基中的成分包括微生物需要的氮源、无机盐和水。(3)培养基中的①是该培养基中唯一的氮源,去掉后则成为无氮培养基,可用于培养自生固氮微生物,因为自生固氮微生物可以利用大气中的 N 2 作为氮源。(4)在培养基中加入氨基酸,可以为微生物提供碳源、氮源和特殊营养。(5)微生物的菌落形成于固体培养基的表面,因此培养基中需要添加凝固剂(琼脂),使液体培养基凝固成固体培养基。

　15.(1)麦芽汁琼脂 高压蒸汽 分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体 (2)菌体快速增殖 乙醇产生 (3)酵母菌细胞呼吸分解葡萄糖产生 CO 2 ,CO 2 遇热膨胀使面包松软 【解析】

　(1)牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用广泛的细菌培养基;MS 培养基是满足植物细胞的营养和生理需要的培养基;麦芽汁琼脂培养基通常用于酵母菌(真菌)的培养、鉴定及菌种保存。培养基的灭菌方法为高压蒸汽灭菌法。菌落是指分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。(2)酵母菌为兼性厌氧型微生物,在有氧条件下进行有氧呼吸,为酵母菌的快速繁殖提供能量;在无氧条件下,酵母菌进行无氧呼吸产生乙醇。(3)面包松软是因为制作过程中,加入的酵母菌通过细胞呼吸分解葡萄糖产生大量的 CO 2 ,CO 2 遇热膨胀,使得制作的面包松软多孔。

　16.(1)平板划线 检测培养基平板灭菌是否合格 (2)灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 (3)生成的乳酸与 CaCO 3 反应生成乳酸钙,菌落周围形成透明圈 透明圈 (4)pH 过低抑制了乳酸菌的生长 (5)抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长

　【解析】

　(1)微生物接种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间,用于检测培养基平板灭菌是否合格。(2)采用平板划线法分离水样中的乳酸菌,操作时,接种环先通过灼烧灭菌。在第二次及以后划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。(3)培养基中加入 CaCO 3 ,成功筛选出能产生乳酸的菌株,其筛选依据的原理是菌株生成的乳酸与 CaCO 3 反应生成乳酸钙,培养基中菌落周围会出现透明圈,且透明圈越大说明该菌株产生乳酸的能力越强。(4)发酵到后期时,乳酸含量继续增加,当达到 1.2%时,发酵速度逐渐变缓甚至停止,主要原因是 pH过低抑制了乳酸菌的生长。(5)含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶,其理由是抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长。