[惠州市2010年流感病原学监测结果分析] 流感病原学相关检查有哪些

　　[摘要] 目的 分析惠州市2010年流感监测的结果，及时掌握流感流行趋势，为制定流感防控策略提供科学依据。方法 通过中国流感监测网络系统，对流感做流行病学和病原学监测，对本市流感流行情况进行分析，并严密监控本地区的流感疫情暴发情况。结果 2010年累计共报告流感样病例20 734例，占监测诊例数的7.51%(20 734/276 018)；共采集流感样病例咽拭子标本642份，检测到不同型别的流感病毒105例，阳性率为16.36%，其中新甲型H1N1亚型20例，占19.05%，季节性H3N2型32例，占30.48%，A型未分型7例，站6.67%，乙型46例，占43.81%。结论 2010年本区未发生较大规模的暴发流行，但仍应加强对各型流感病毒的监测，以预防和控制流感的流行。目前流感监测工作仍存在一些不足，敏感的新型综合性监测方法与手段有待进一步提高。
　　[关键词] 流行性感冒病毒； 亚型； 监测； 病原学
　　[中图分类号] R373.1+3 [文献标识码] A [文章编号] 1005-0515（2011）-05-015-02
　　
　　Analysis on the results of pathogenic surveillance of influenza in Huizhou in 2010
　　Xu Zhihua, Liang Lihuan, Liu Xuemei, Fang Qiaoyun, Ju Xiongfei
　　(Huizhou Center for Disease Control and Prevention，Guangdong, 516008，China)
　　[Abstract] Objective To analyze the results of etiological surveillance of influenza in 2010 in Huizhou, so as to capture the epidemic information of influenza in time and to provide scientific evidence for influenza control and prevention effectively. Method Epidemiology，etiology and laboratory surveillance of influenza had been conducted to analyze the epidemic status of influenza in Huizhou. Result A total of 20734 influenza-1ike illness cases were reported in 2010, accounting for 7.51% of the total outpatient cases. 642 specimens were collected from influenza-like patients, from which 105 cases of influenza viruses were detected with the isolation rate of 16.36%. Conclusion There are no large scale outbreaks in 2010 in Huizhou. It is necessary to enhance the influenza surveillance to prevent and control influenza. Given that sentinel hospital-based surveillance system has its weakness and it is necessary to explore more sensitive and synthetical surveillance measures in practice.
　　[Keywords] Influenza virus; Subtype; Surveillance; Etiology
　　
　　流行性感冒(influenza)简称流感，是一种严重危害人体健康的急性呼吸道传染病[1]。流感病毒的抗原易变异，人群对变异株普通易感，控制难度大，使得迄今为止人类还不能有效控制它[2]。2009年在墨西哥暴发的甲型H1N1流感是由一种新型流感病毒引起的，这种病毒能在短时间内迅速传播至全球，人群普遍易感[3]。我国又被国际上认为是流感的多发地，1957年、1968年和1977年3次世界性流感大流行毒株均首发于我国，且1997、1998年分别在香港和广东地区首次分离禽H5N1和H9N2亚型毒株能直接感染人[2]。惠州毗邻港澳，人群流动频繁，常年有流感病毒活动，因此加强惠州市的流感监测尤为重要：一方面可以了解人群的发病与疾病的流行情况，是流感疫情预测和预警的基础；另一方面对分析每年的流感流行趋势、病毒的变异和流感疫苗株都具有重要参考价值。本文拟通过对2010年惠州市流感流行情况进行流行病学监测和实验室结果分析，了解本地区流感病毒的活动规律，为控制流感的发生和流行提供科学依据。
　　1 材料与方法
　　1.1 材料
　　1.1.1 监测对象 选择国家级监测哨点医院呼吸内科、儿科、急诊科就诊的发病3 d或3 d之内未服用抗病毒药物的流感样病例(发热，腋下体温≥38℃，伴有咳嗽或咽喉疼痛之一，缺乏其他实验室确诊依据)作为监测对象。
　　1.1.2 标本采集 用无菌棉拭子采集患者咽喉漱液加咽拭子用Hank’s液保存，至4℃条件下尽快(24 h内)送到流感监测网络实验室，网络实验室每周二、周四和周五检测流感样病例咽拭子标本。
　　1.2 方法
　　1.2.1 资料统计 按《全国流感监测实施方案》、《2009年扩大流感监测网络项目管理方案》、《甲型H1N1流感监测方案（第二版）》要求，监测点每天由专人负责对呼吸内科、儿科、急诊科的就诊病人和流感样症状的病人按时间(日、周)和年龄组(0～ 岁、5～ 岁、l5～ 岁、25～ 岁、≥60岁)进行登记，统计就诊的流感样病例数和该监测门诊就诊病例总数。并计算ILI就诊百分比(ILI％)，作为反映流感流行强度的指标。
　　1.2.2 实验室监测
　　1.2.2.1 病毒RNA的提取 采用QIAGEN公司的Rneasy mini Kit，严格按照试剂盒操作说明书进行，提取的RNA立即进行实验或-70℃保存。
　　1.2.2.2 荧光定量PCR 采用广州华银医药科技有限公司生产的试剂盒，反应体系参照试剂盒说明书配制，试剂混匀后移入毛细玻璃反应管中，盖紧管盖，1000r/min离心30s，转移入荧光定量PCR仪器。反应条件：第一阶段37℃，25 min；第二阶段94℃，2 min；第三阶段94℃，15 s，55℃，15 s，72℃，20s，5个循环；第四阶段94℃，5 s，55℃，35 s，32个循环。在第四阶段每个循环的退火延伸时收集荧光。
　　1.2.2.3 结果判断 阴性对照应无Ct值且无扩增曲线。阳性对照的Ct值应30的样本重做，重做结果无Ct值者为阴性，否则为阳性。
　　1.3 统计分析 数据整理使用Microsoft Office Excel 2007，统计分析使用SPSS 17.0软件。
　　2 结果
　　2.1 流感样病例监测 2010年惠州市哨点医院累计监测门、急诊就诊人数276 018人次，其中流感样病例（influenza-like illness, ILI）20 734人，流感样病例占门诊病例总数的百分比（以下简称ILI%）平均值为7.51％，2010年按周计算，ILI％在3.72％～9.12％之间，期间各月流感样病例和ILI%，见图1。曲线显示流感发病情况基本平稳。
　　2.2 流感样病例人群分布 根据2010年流感监测数据统计，流感样病例主要集中于14岁以下年龄组，16 128例，占77.79%，15～24岁青少年2 571例，占12.40%，25～59岁成年人2 023例，占9.76%，60岁以上老年人12例，占0.06%，见表1，全市以散发病例为主。
　　图1 惠州市2009-2010年流感国家级监测哨点医院流感样病例数据
　　表1 2010年惠州市哨点医院流感样病例监测情况
　　2.3 病原学监测结果
　　2.3.1 流感病毒的检测结果 2010年共采集流感样病例咽拭子标本642件，检测到流感病毒105件，阳性率为16.36%，其中甲型流感病毒59例，占全部阳性标本的56.19%；乙型流感病毒46例，占全部阳性标本的43.81%。
　　2.3.2 流感病毒亚型分布 本监测季共检测到新甲型H1N1有20例，占全部阳性标本的19.05%，季节性H3N2型32例（占30.48%），甲型未分型7例，占全部阳性的6.67%，乙型流感病毒46例（占43.81%），见表2。
　　表2 2010年流感监测各年龄组病毒检出分布
　　2.3.3 流感样病例监测结果的时间分布 全年各月均能检测到流感阳性病例，其中以4月和8～9月为阳性检测高峰。11～12月流感检测率较低，结果见表3。
　　表32010年惠州市流感病毒检出按月统计表
　　2.3.4 检测年龄组的人群分布 2010年流感实验室确诊病例105例中，男性57例，阳性率为15.53%，女性48例，阳性率为17.45%，流感病毒核酸阳性检出率男女间比较差异无统计学意义(X2=0.425，P>0.01)。
　　不同年龄组流感病毒检出率表明，流感病原学检测病例以0～岁组最多，其次是21～岁组，即检测病例以儿童、青少年为主。而流感病毒分离阳性率以21～岁组最高，为27.05%；其次是41～岁组和51～岁年龄组(见表2)。
　　3 讨论
　　流感虽属法定丙类传染病，但起病急、传播迅速、波及面广、容易引起暴发流行，且具有一定的季节性，常会对人体健康及整个社会产生较大影响。至今，人类尚未完全掌握流感病毒的变异规律，因此人类尚不能有效控制流感[4]。流感监测是预防控制流感的关键策略和措施之一，也是每年确定流感流行株、推荐疫苗组分，及早发现变异株、对流感疫情预测和预警的基础[5]。
　　在流感流行高峰期， 流感病毒活动明显，检测到的流感病毒株也增多，在流感监测中常常用流感样病例总数和流感样病例数占门诊病例数的比例变化情况反映流感活动的强弱[6]。通过监测发现，2010年惠州市流感样病例占门急诊就诊病例的比例相对平稳，平均为7.51%，未发生较大规模流行，与国内流感活动情况基本一致。其中14岁以下儿童占绝大部分，因而该年龄段儿童是流感疫苗接种的重点。
　　流感病毒病原学监测结果表明：本监测季以乙型流感病毒为主，占43.81%，季节性H3N2型和新甲型H1N1次之，未检测到2009年流行的H1N1亚型，这是否预示着优势株又将发生变化，是值得研究和考察的。
　　根据本研究中流感监测系统监测到的流感毒株、流感的流行趋势和本区域的人群特点，有必要进一步加强本地区流感监测网络的建设，提高流感病毒病原学检测水平，及时掌握流感流行和病毒毒株变异情况，科学地预测流感流行，为流感防控策略的制定和流感疫苗的研制提供有力的科学依据。
　　参考文献
　　[1] 方巧云，琚雄飞，杨剑英，等.新型甲型H1N1流感病毒的实验室检测[J].中华疾病控制杂志，2010,14(12):1213-1215.
　　[2] 张静，杨维中，郭元吉，等.中国2001-2003年流行性感冒流行特征分析[J].中华流行病学杂志，2004，25(6):461-465．
　　[3] Novel swine-origin influenza A(H1N1)virus investigation team．Emergence of a novel swine-origin influenza A (HlN1)virus in humans[J].N Engl J Med,2009，360(25):2605-26l5．
　　[4] 琚雄飞，梁立环，方巧云，等.惠州市2009～2010年流感病原学监测结果分析[J].预防医学论坛，2011，17(2):99-101．
　　[5] Muscatello DJ，Churches T，Kaldor J，et a1．An automated，broad-based,near real-time public health surveillance system using presentations to hospital Emergency Departments in New South Wales，Australia[J].BMC Public Health，2005,5(1) :141.
　　[6] 康宁，谭毅，莫兆军，等．广西2005-2006年流感监测结果分析[J].公共卫生与预防医学，2007，18(5)：23-25．
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