[ＩＦＮ－γ对大鼠创面愈合中Ｓｍａｄ７表达的影响]创面愈合

　　[摘要]目的：将干扰素γ（IFN-γ）应用于大鼠创面，观察创面肉芽组织的生长、成纤维细胞数目，分析IFN-γ对Smad7的影响。方法：选取成年SD大鼠127只，建立大鼠创伤模型。实验分成A、B、C、D、E共5组，每组25只。A组为生理盐水溶剂对照组，B组为IFN-γ 500U /ml溶剂剂量组，C组为IFN-γ 1000U/ml溶剂剂量组，D组为2000U /ml溶剂剂量组，E组为空白组，正常对照组2只，为未损伤的正常大鼠。分别于创伤第3、7、10、14、21日随机选取各组5只大鼠采用过量麻醉处死，剪取创面肉芽组织，分别行HE常规染色，在光学显微镜下观察新生肉芽组织厚度、计数成纤维细胞数。行免疫组化染色，在光学显微镜下观察肉芽组织中Smad7的表达情况。结果：各时间点A、B组肉芽组织厚度较C、D组致密且厚（P＜0.001），E组肉芽组织厚度介于A、B组和C、D组之间，（P＜0.05）；200倍光镜下，目测计数成纤维细胞，伤后第3、21天，各组别成纤维细胞数量无差异（P＞0.05），伤后第7、10、14天，A、B组成纤维细胞数量比C、D、E组明显增多（P＜0.001）；通过图像分析检测Smad7平均灰度和平均光密度。Smad7在伤后第3天、第14天表达较强，在C、D组中各时相的表达强于A、B、E组（P＜0.001），但C组和D组、A组和B组组间比较无差异（P＞0.05）。结论：干扰素γ（IFN-γ）可使新生肉芽组织生长缓慢、成纤维细胞数量减少，延长创面愈合时间，并可使大鼠皮肤创面中Smad7表达增强。
　　[关键词]大鼠；Smad7；干扰素γ（IFN-γ）；创面愈合
　　[中图分类号]Q813.1 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455（2009）02-0201-04
　　
　　Effects of interferon-γ on and Smad7 in wound healing of rats" skin
　　LI Lu1，WANG Ji-hua2，ZHAO Ya-nan2，LI Yun-yi3
　　（1. Department of Breast,the First People"s Hospital of Kunming,Kunming 650011,Yunnan,Chnia; 2. Department o Plastic Surgery, the Second Affiliated Hospital of Kunming Medical College,Kunming 650101,Yunnan,Chnia; 3.The Wu"Plastic Hospital of Kunming,Kunming 650000,Yunnan,Chnia）
　　
　　Abstract:Objective To observe the effect of Smad7 in wound healing of rats" skin, and to investigate the growth of granulation tissue and fibroblast count. To analyze the mechanism of IFN-γ on signal transduction of Smad7.Methods Full thickness excisional wound on the back of rats were used as wound models. The rats were divided randomly into 5 groups as follows;①solvent control [saline solution (0.9% NaCl), group A]; ②IFN-γ500U/ml [group B]; ③IFN-γ1000U/ml[group C]; ④IFN-γ2000U/ml[group D]; ⑤blank control [group E]. And 2 rats were compared as normal control. Wound tissues were collected on the 3rd,7th,10th,14th and 21st postwounding days. All specimens were dealed with by the pathology tectology (HE) and immunohistochemistry staining technique (SP) to observe the growth of granulation tissue, fibroblast count, the expression level of Smad7.ResultsThe growth of granulation tissue and fibroblast count of groups C and D were less than groups A and B at the same day (P0.05). Image analysis showed that there were markable difference of Smad7 among the groups A,B and groups C,D (P 　　1.2 实验动物及分组：选取成年SD大鼠127只，雌雄不限，体重0.18～0.2kg。随机分成A、B、C、D、E共5组，每组25只，正常对照组2只，单笼饲养。所有手术操作均在无菌条件下进行，以30g/L戊巴比妥钠（35mg/kg）腹腔注射麻醉，将大鼠背部两侧剪毛，常规术前准备消毒。在大鼠背部剪去四块大小为1cmx1cm的全层皮肤，形成缺损，创面间隔2cm，125只大鼠无死亡。每日分别外用IFN-γ溶液 和0.9%生理盐水换药：A组用0.9％生理盐水；B组用IFN-γ500U/ml溶液；C组用IFN-γ 1000U/ml溶液；D组用2000U/ml溶液；E组为空白组，即伤后不作任何处理。
　　1.3 取材和染色：分别于术后第3、7、10、14、21日随机选取各组5只大鼠采用过量麻醉处死，剪取创面肉芽组织，范围包括周围正常组织，深达肌层。分别行苏木素－伊红常规染色（HE染色）和免疫组化染色。观察HE染色切片，40倍光镜下选取不重叠的三个视野，以计算机显微测微尺测量新生肉芽组织厚度，同法在200倍光镜下，目测计数成纤维细胞。免疫组化染色（SP染色）后，在高倍镜（×400）下，用图像分析仪对Smad7阳性细胞进行平均光密度、平均灰度的测量。
　　1.4 统计学处理：数据用均数±标准差（x±s）表示，采用SPSS13.0 for windows 统计软件包进行方差分析和两两比较q检验，处理检验水准α为0.05，P