健康体检女性HPV感染和细胞学结果分析

朱杰 董世雷 张科技

宫颈癌（uterine cervical carcinoma，UCC）是严重威胁女性健康的生殖系统恶性肿瘤之一，研究发现，其发病与人类乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染密切相关［1］。其中，持续感染高危型HPV在宫颈上皮内瘤样病变和侵袭性UCC的发展过程中起到了关键作用［2-4］。细胞学检查是UCC筛查的主要手段，液基薄层细胞检测（thin prepcytological test，TCT）是临床常用方法之一。目前，HPV检测与TCT细胞学检查相结合是UCC的最佳筛查方案。HPV的感染率和基因型在不同地区分布差异变化巨大，调查特定区域健康体检女性宫颈脱落细胞的HPV分型结合TCT细胞学检查结果，可以更好地为该地区HPV疫苗的接种和UCC防治提供科学依据。

1.1 研究对象 选取2013年8月至2019年4月在浙江医院体检中心进行妇科检查（包括HPV基因分型检测和TCT检测）的女性。所有入选病例均为女性健康体检者，并剔除了二次复查者。所有受试者无心、肝、肾等重要脏器严重疾病。本研究经医院医学伦理委员会批准，所有患者签署知情同意书。

1.2 主要试剂与仪器 HPV基因分型试剂盒（上海透景生物技术有限公司）使用仪器为基因扩增仪（杭州博日生物技术有限公司，型号：Lifelong）、流式荧光点阵分析仪（美国Luminex公司，型号：LumineX200）。TCT液基薄层细胞处理试剂盒TCT10A（南宁松景天伦生物科技有限公司）。

1.3 研究方法 标本采集由浙江医院妇科医师采集宫颈脱落细胞，将标本置于保存液中送检验科和病理科进行相关检测。

1.4 HPV基因检测 所有操作均由专业技术人员严格按照说明书进行。分为核酸提取、核酸扩增、HPV DNA变性及杂交及流式荧光点阵分析。本研究检测HPV基因型21种，高危型（16种）：HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、CP3804。低 危 型（5种）：HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV44。

1.5 统计学方法 采用Prisim5.0统计软件。计数资料以［n（%）］表示。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2.1 研究对象的HPV感染情况 共纳入10,248例健康体检女性进行研究，年龄分布为21～81岁。在所有HPV感染者中，单一感染占比最高，其次为双重感染、三重感染及四重感染及以上。按年龄分组的结果显示：21～30岁占比最高，其次为51～60岁、＞60岁、31～40岁及41～50岁。见表1。

表1 健康体检女性HPV感染情况［n（%）］

2.2 研究对象的病理TCT检测情况 按年龄分组的ASCUS结果显示：41～50岁占比最高（0.55%），其次为51～60岁、21～30岁、＞60岁及31～40岁。见表2。

表2 健康体检女性病理TCT检测情况（n）

2.3 研究对象的HPV感染基因型分布与病理TCT结果的关系 95.9%的研究对象TCT检查结果为未见上皮内病变与肿瘤细胞。在TCT结果为不典型鳞状细胞（ASCUS）的研究对象中，HPV感染率为100%。其中，高危型占比95.23%，最常见的6个亚型为HR16、HR52、HR58、HR53、HR39和HR18。见表3。

表3 研究对象的HPV感染基因型分布与病理TCT结果的情况

2.4 单一或多重HPV感染在各个年龄段的情况 在942人单一感染者中根据年龄段分布各个HPV基因型情况，见表4。根据感染人数从高到低分布依次为：HR52 148例（41～50岁感染率最高），HR16 142例（41～50岁感染率最高），HR58 117例（51～60岁感染率最高），HR53 99例（41～50岁感染率最高），HR39 70例（31～40岁感染率最高），HR18 58例（41～50岁感染率最高）。根据感染在153人多重感染者中根据年龄段分布各个HPV基因型情况，见表5。根据感染人数从高到低分布依次为：HR16 43例（51～60岁感染率最高），HR58 43例（51～60岁感染率最高），HR53 35例（51～60岁感染率最高），HR39 26例（41～50岁感染率最高），HR18 19例（51～60岁感染率最高），HR51 18例（31～40岁感染率最高）。

表4 研究对象各年龄段单一感染HPV基因分布情况

表5 研究对象各年龄段多重感染HPV基因分布情况

本文以本院2013年8月至2019年4月健康体检妇女为研究对象，分析了HPV感染亚型和TCT细胞学检测的情况。结果表明HPV的整体感染率为10.68%，高危HPV的感染率为7.88%，显著低于杨炼［5］报道华西地区数据，这可能与研究人群生活水平、卫生条件等有关。其中，最常见的6个亚型是HR16、HR52、HR58、HR53、HR39、HR18。WHO公布的正常女性中最常见的亚型是HR16、HR18、HR31、HR58。在我国，正常女性中最常见的亚型是HR16、HR52、HR18、HR51［6］。本研究结果与WHO和我国范围内的数据相比有出入，HR31和HR51并非最常见的类型，而HR53和HR39在本研究中较为常见，这与赵丽等［7］研究结果较为一致，而与冯余宽［8］研究结果较大，这可能与研究人群差异有关。TCT结果为ASCUS的研究对象中，HPV感染率为100%，其中高危型占比为95.23%，最常见的6个亚型中，除HR16、HR58和HR52占比最高外，其余亚型的TCT差异不大。

不同年龄组患者的HPV感染不同［9-11］。笔者团队研究显示21～30岁HPV感染率最高为14.20%，这可能与该年龄段妇女性活动度比较高有关。同时，按年龄分组的TCT中ASCUS结果表明41～50岁占比最高，然后依次为51～60岁、，21～30岁、＞60岁和31～40岁。因此，有必要在中老年妇女中宣讲有关宫颈疾病的相关知识，并且对该年龄段人群进行UCC筛查尤为重要。

本研究表明，21～30岁、51～60岁和＞60岁年龄段研究对象中，单一和多重HPV感染率均较高，这与WANG等［12］研究结果相符。年轻女性生殖道抗感染能力弱，宫颈上皮细胞较敏感，容易受HPV感染。同时，51～60岁这一年龄段围绝经期激素波动引起生理及免疫失调，从而导致HPV单一和多重HPV感染率增高。60岁以后，随着年龄的增长，机体免疫能力逐渐降低，HPV感染风险增加。因此，有性生活后的女性均有必要进行HPV分型检测并定期进行TCT筛查。