三溴乙醇麻醉大鼠 不同浓度乙醇对大鼠肌肉组织影响的探讨

　　[摘要]目的：探讨不同浓度乙醇对大鼠腓肠肌功能及组织学的影响。方法：选取等重的雄性SD大鼠75只，随机分入A、B、C、D、E五组，在各组大鼠左侧腓肠肌注射0.2ml浓度分别为50%、60%、70%、80%、90%的乙醇，右侧均注射相同量的生理盐水。分别于注射后第3、7、14、21和28天分离大鼠左右侧腓肠肌，检测每只大鼠左右侧腓肠肌的收缩力差（ΔF）及肌体积差（ΔV），并取标本做HE染色，光镜下观察肌肉组织学变化。 结果：注射相同天数，实验组A、B、C、D组ΔF与ΔV随乙醇浓度增加而明显升高（P0.05）；同一乙醇浓度下，三周内，ΔF与ΔV均随时间延长而明显增加（P0.05）。光镜下，随着时间延长及浓度增大腓肠肌纤维化程度明显加重。结论：随着浓度（50%～80%）增加，乙醇对大鼠腓肠肌损伤程度加重；当乙醇浓度超过80%时，腓肠肌收缩功能基本丧失及组织学上基本纤维化。注射21天后，肌肉组织纤维化程度基本稳定。
　　[关键词]肌肉组织；乙醇；血管瘤
　　[中图分类号]R732.2[文献标识码]A[文章编号]1008-6455（2011）02-0251-04
　　
　　To approach the different concentrations of alcohol on the myoideum of rats
　　LI Yue-ling,CHEN Shi-hai,LIU Liu,DUAN Hong-yu
　　(Department of Plastic and Aesthetic Surgery,The First Affiliated Hospital,Guangxi Medical University,Nanning 530021,Guangxi,China)
　　
　　Abstract:ObjectiveTo explore the efficacy of the different concentration of alcohol in treatment of the functions and histology of gastrocnemius muscle of rats. Methods75equiponderous male of SD rats which divided into A,B,C,D,E five groups randomly received the injection on the left of gastrocnemius muscle of rats in the 0.2ml of concentration of alcohol that is 50%、60%、70%、80%、90%,and on the right in the commensurate of physiological saline. Gastrocnemius muscle of rats was dissected 3,7,14,21 and 28 days later, and detected the difference of contractility (ΔF) and organism(ΔV). Extracted the specimens in HE and observed the change of muscle tissue in light microscope. Results The groups of D and E had no significant deviation（P>0.05）after the same of injection of days .In the homo- concentration of ethanol, ΔF and ΔV increased obviously over time（P0.05）. With time and concentration obviously increased,the gastrocnemius increased the degree of myofibrosis aggregately.ConclusionWhen the concentration of alcohol over 80%, the contractile function of gastrocnemius muscle loss and organization of basic fibrosis. The degree of myofibrosis stabled basically 21 days later.
　　Key words：muscle tissue；alcohol；hemangioma
　　
　　无水乙醇肿瘤�灌注技术是近年来临床上用于治疗海绵状血管瘤尤其是肌肉血管瘤（intramuscular hemangioma，IMH）有效方法之一[1]，但由无水乙醇对病变周围肌肉、神经等正常组织的损伤在一定程度上影响了疾病的治疗和病变部位功能的康复，在某些情况下其危害性甚至超过了原发病。因此，在无水乙醇治疗肿瘤的过程中，了解无水乙醇对正常组织的影响，从而降低无水乙醇对病变周围正常组织的损伤，保证病变部位的功能是目前临床亟待解决的问题。本研究旨在观察大鼠腓肠肌对注射不同浓度乙醇的作用效果，探讨不同浓度乙醇与骨骼肌之间的关系，为临床应用提供选择依据。
　　
　　1材料和方法
　　1.1 实验动物及分组：选取等重雄性SD大鼠75只,体重(180±10)g（广西医科大学动物实验中心提供），随机分入A、B、C、D、E五组，每组15只。在各组大鼠左侧腓肠肌注射0.2ml浓度分别为50%、60%、70%、80%、90%的乙醇，右侧均注射相同量的生理盐水。
　　1.2 动物模型的制备：实验中首先腹腔内注射1%戊巴比妥(40mg/kg)；麻醉后，大鼠仰卧四肢外展位固定于解剖台上，常规消毒铺无菌巾单。于后肢小腿后侧做纵形切口，分离、显露并游离腓肠肌。根据分组不同，各组分别于第3、7、14、21和28天随机取1只大鼠做腓肠肌各种检测。
　　1.3 腓肠肌收缩力变化ΔF的测定：预先运行PCLab生物信号采集处理系统，将大鼠固定于实验台上。取后肢下段背侧切口，切开皮肤分离出腓肠肌，于近端分离解剖出坐骨神经，远端从肌腱止点处剪断用丝线将其与肌张力换能器连接，给予50 g张力，使肌肉处于最适初长度。分别给予单收缩刺激、强直刺激，记录收缩曲线和测量数值，即得出腓肠肌收缩力。通过测量每组大鼠两侧腓肠肌收缩力，求出每组平均差值，即ΔF,。观察在第1天、7天、14 天、21天和28天各组腓肠肌平均收缩力ΔF变化情况。
　　1.4 肌肉体积变化ΔV的测定：显露、游离大鼠腓肠肌，在肌肉起止点处切断肌肉附着部，除去肌肉上附着的组织后，将腓肠肌放入已装有6ml甲醛的10ml量筒内，观察量筒刻度变化，即一侧腓肠肌的体积。同样测出另一侧的体积，求出每组平均的差值，即ΔV。观察在第3天、7天、14 天、21天和28天各组腓肠肌平均体积ΔV变化情况。
　　1.5 HE 染色切片分析：测量体积后切取注射部位腓肠肌组织，10%甲醛固定，常规石蜡包埋切片，HE染色，光镜下观察肌细胞结构、肌膜、肌纤维及细胞核的变化。
　　1.6 统计方法：采用SPSS13.O统计分析系统，所有数据结果均用均数士标准差(x±s)表示，用方差分析做组间比较及各时间点间比较，P0.05），光镜下见肌肉组织基本纤维化（见图Ⅴ、Ⅵ）。说明乙醇浓度80%时，肌肉组织基本完全被纤维化。毛雅君 许光旭等[11]研究报告也与实验的结果类同。
　　通过本实验得知，当注射乙醇浓度达到80%时，大鼠腓肠肌组织纤维化已达到最大值，再增加乙醇的浓度，只会增加对周围正常组织的损伤，而腓肠肌纤维化程度不在改变。通过乙醇与肌肉关系的这一联系，为临床利用无水乙醇治疗IMH提供一个参考。
　　注射低浓度乙醇可使肌肉保有一定的功能，在一定的程度上还使肌肉体积变小，后期肌肉体积不易恢复等特点，可为临床上治疗良性咬肌肥厚常存在作用不持久等缺点[12]提供一定参考。
　　本实验初步观察了不同浓度乙醇对大鼠骨骼肌功能一定的影响。如果要进行更为全面的观察，尚须进一步研究骨骼肌的形态、超微结构，生化指标的变化，同时还需更加深入的进行研究。
　　
　　[参考文献]
　　[1]樊雪强,刘 鹏.肌肉内血管瘤的诊断与治疗[J].中日友好医院学报,2005,19 (4):242-244.
　　[2]Veriasova NN,Polysalov VN,Tarazov PG.Long-term results of local ethanol injection therapy in the treatment of hemangiomatosis of the liver[J].Veatn Khir Im II Grek,2003,162(3):22-26．
　　[3]宓兵.CT引导下穿刺注射酒精治疗肝肾囊肿疗效分析[J].中国医学创新,2010,18(7),133-134.
　　[4]王瑾瑜，张毅,修有成.B超引导下肾囊肿穿刺注射无水乙醇治疗12例报告[J].中华临床医学研究杂志,2008,14(6):871.
　　[5]贺军,何龙泉,陈晓理,等.无水乙醇介入治疗消化道出血一例[J].中华普通外科杂志,2006,21(1):34.
　　[6]杨琴,李大铁.皮肤血管瘤治疗方法的现状及研究进展[J].遵义医学院学报,2006,29(1):85-88.
　　[7]Wild AT,Raab P,Krauspe R.Hemangioma of skeletal muscle[J].Arch Orthop Trauma Surg,2000,120(3-4):l39-143．
　　[8]Giudice M,Piazza C,Bolzoni A,et a1.Head and neck intra-muscular haemangioma:report of two cases with unusual 1ocalization[J].Eur Arch Otorhinolaryngol,2003,260(9):495-498．
　　[9]高凤山,董继英,杜军.无水乙醇栓塞及平阳霉素注射治疗复发性海绵状血管瘤[J].中华医学美学美容杂志,2004,10(6):330-332.
　　[10]陈向齐,傅琴香.体表血管瘤治疗进展[J].福州总医院学报,2004, 11(1):60-61.
　　[11]毛雅君,许光旭,杨晓颜,等.神经干乙醇阻滞治疗骨骼肌痉挛的报告[J].中国康复医学杂志,2006,21(8):716-717.
　　[12]Dressler D,Bigalke H. Antibody-induced failure of botulinum toxin type B therapy in de novo patients [J].Eur Neurol,2004,52(3):132-135.
　　
　　[收稿日期]2010-10-09 [修回日期]2010-12-23
　　编辑/张惠娟