[核黄素UVA联合使用对角膜作用的研究进展]核黄素 角膜交联

　　[摘要]CCL疗法对角膜透明度无影响，在未来可能成为一项应用广泛的增加角膜硬度及密度的方式。本文从动物实验、临床研究等方面研究核黄素UVA联合使用对角膜的作用，并做一综述。
　　[关键词] 核黄素； UVA； 角膜
　　[中图分类号] R772.2[文献标识码] A[文章编号] 1005-0515（2011）-01-160-01
　　
　　A段紫外线（UVA）是一种仅在其直接照射区域发挥作用的光波，在眼部可能造成直接光损伤，或者诱导自由基产生间接光化学损伤 [1]。核黄素是一种可微溶于水，无毒黄色固体状维生素B衍生物，在人眼角膜基质内穿透力极佳，对核黄素依赖性光感受器所负责的暗视觉有重要作用[1]。
　　1 实验研究
　　1.1 动物实验：Wollensak G[2]等通过提取CCL处理后的角膜中央的I型角膜胶原，利用凝胶电泳分析证实了CCL中胶原多聚体的生化学交联作用，其化学稳定性预示了其应用效果的稳定性。Eberhard S[3]等将30只新摘取的猪眼切为10mm×5mm大小，分三组进行试验，通过测量热液萎缩量分析胶原交联程度，可知前部角膜交联程度大于后部。这种前定位的交联有利于改变前部角膜曲率和保护内皮细胞。实验观察发现在CCL处理后角膜内细胞出现不同程度与辐射强度有关的凋亡损伤，较少发生内皮细胞损伤[4-5]。Wollensak G[5]将新西兰白化兔角膜在体实验中发现：CCL诱导的基质细胞凋亡则在24h后发生于角膜更深部，深度与UVA辐射剂量间显示正相关。
　　1.2 人眼实验：Timo R[6]使用Goldman压平眼压测量法（GAT）、动态眼压测量法（DCT）、Tonopen仪测量眼压数据，分析CCL前后的角膜胶原硬度对眼压测量的影响，发现CCL导致所有眼压计的测量数据降低，虽然变化量小，但是很可能导致不准确的变化的眼压测量数据。Cosimo M等[7]利用海德堡视网膜X线体层照相术II共聚焦显微镜观察在体角膜微观形态改变，衡量人圆锥角膜病眼在CCL后损伤修复情况。发现术后无角膜缘损伤，软性角膜接触镜绷带使用后第四天上皮组织完全恢复，上皮下神经丛的解剖结构和感觉功能在一年内完成恢复。3年随访显示交联作用稳定，这归因于交联形成增加、结构紧密胶原的分泌和新的层状互联形成。
　　2 临床研究
　　2.1 圆锥角膜：圆锥角膜是一种表现为角膜变软突出并随时间进展的非炎症性退行性疾病。近年由于激光角膜原位磨削术（LASIK）的广泛施行，致医源性圆锥角膜使其发病率有所增加。其治疗方法只能缓解症状，不能阻止病情发展，因此圆锥角膜一般进展到后期只能施行全层角膜移植术。核黄素UVA联合使用可以增加角膜硬度和对角膜突出的抵抗能力，临床试点实验发现，CCL对圆锥角膜有明显的疗效，可终止角膜突出的进程，明显减小的最大角膜曲率，并有轻微提高视敏度的效应[8-10]。
　　2.2 治疗LASIK后圆锥角膜：George DK[10]组织学观察发现CCL后的医源性圆锥角膜与进展性圆锥角膜形态学改变相似。上皮下神经丛在照射之后破坏消失，其重建在3个月之后才可分辨。前部基质中胶原纤维表现出网状结构。角膜上皮未出现任何明显改变，后期随访中未发现细胞密度和六棱形改变。
　　2.3 角膜炎及角膜溃疡：在核黄素UVA的交联应用当中，UVA不仅可以通过干扰微生物细胞膜完整性达到杀灭细菌，减少其分泌的蛋白酶，减弱其分解角膜胶原蛋白的作用；还可以增加胶原对蛋白酶和胶原酶的抵抗。上述两个作用可以协同作用于角膜达到保护角膜对微生物及其酶解作用抵抗能力。
　　3 总结
　　CCL疗法简单安全，但是在其应用中许多问题仍待解决，如术后板层角膜炎和基质浑浊的预防；针对不同程度圆锥角膜的治疗剂量的确定；如何将对角膜后方结构的副作用降到最低等，在这些方面仍需要进一步研究。
　　参考文献
　　[1] Eberhard S,Michael M,David S,et al.Safety of UVA-Riboflavin Cross-Linking of the Cornea.Cornea,2007,26(4):385-389.
　　[2] Wollensa G,Redl B.Gel Electrophoretic Analysis of Corneal Collagen After Photodynamic Cross-linking Treatment.Cornea,2008,27(3):353-356.
　　[3] Eberhard S,Gregor W,Dag-Daniel D,et al.Thermomechanical Behavior of Collagen-Cross-Linked Porcine Cornea. Ophthalmologica,2004,218(2):136-140.
　　[4] F Wang,Carl Gustav C.UVA/Riboflavin-Induced Apoptosis in Mouse Cornea.Ophthalmologica,2008,222(6):369-372.
　　[5] Wollensak G,Spoerl E,Wilsch M,et al.Keratocyte Apoptosis After Corneal Collagen Cross-linking Using Riboflavin/UVA Treatment. Cornea,2004,23(1):43-49.
　　[6] Timo R,Lucas M B,et al.Effect of Riboflavin-UVA-Induced Collagen Crosslinking on Intraocular Pressure Measurement.Invest Ophthalmol Vis Sci,2007,48:5494-5498.
　　[7] Cosimo M.Corneal Healing After Riboflavin Ultraviolet-A Collagen Cross-Linking Determined by Confocal Laser Scanning Microscopy In Vivo:Early and Late Modification.Am J Ophthalmol,2008,146(4):527-533.
　　[8] Christine WS.A Randomized Controlled Trial of Corneal Collagen Cross-linking in Progressive Keratoconus:Preliminary Results.J Refract Surg,2008,24(7):720-725.
　　[9] Gregor W,Eberhard S,Theo S.Riboflavin/ Ultraviolet-Ainduced Collagen Crosslinking for the Treatment of Keratoconus.Am J Ophthalmol,2003,135(5):620-627.
　　[10] George DK,Vasilios FD,et al.One-Year Follow-up of Corneal Confocal Microscopy After Corneal Cross-Linking in Patients With Post Laser In Situ Keratosmileusis Ectasia and Keratoconus.Am J Ophthalmol,2009,11:17.