三种不同龈下冲洗液对慢性牙周炎龈沟液中II型胶原酶水平的影响_牙龈炎能自愈吗

　　[摘要]目的:比较在龈下刮治的同时使用不同的药物冲洗对慢性牙周炎患者龈沟液中II型胶原酶水平的影响。方法:选取90例慢性牙周炎患者,随机分为3组,在超声龈下刮治同时分别使用0.2%氯已定溶液、0.2%替硝唑溶液和生理盐水进行冲洗。收集治疗前及治疗2周后患牙的龈沟液并记录相关的临床指标。采用双抗体夹心ELISA法对龈沟液中II型胶原酶水平进行检测。结果:经过超声龈下刮治,患牙牙周临床指标均有明显的改善,龈沟液中II型胶原酶的水平明显降低,0.2%氯已定组和0.2%替硝唑组降低较生理盐水组更显著(P0.05)。结论:超声龈下刮治的同时使用抗菌药物冲洗会对龈沟液中II型胶原酶水平产生显著影响。
　　[关键词]龈沟液;龈下冲洗;II型胶原酶;氯已定;替硝唑
　　[中图分类号]R783 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455(2010)04-0563-03
　　
　　Effects of subgingival irrigation with three different drugs on COL-II level in the Gingival Cervicular F1uid with chronic periodontitis
　　WANG Li-ming,ZHANG Jie
　　(Shanghai Stomatological Disease Center, Shanghai 200001,China)
　　
　　Abstract:ObjectiveTo compare if simultaneous subgingival irrigation with different drugs during ultrasonic scaling could affect the II type Collagenase(COL-II)level in the Gingival Crevicular F1uid(GCF)of teeth with chronic periodontitis. Methods90 patients with chronic periodontitis were selected and randomly divided into three groups.All patients were treated by ultrasonic scaling and irrigated respectively with 0.2% Chlorhexidine,0.2% Tinidazole and 0.9% Sodium Chloride at the same time.GCF was sampled and the periodontal indexes were recorded before treatment and two weeks after scaling.The COL-II level in GCF was detected using ELISA method.ResultsTwo weeks after ultrasonic scaling,both periodontal indexes and the COL-II level in GCF reduced,and that in 0.2% Chlorhexidine,0.2% Tinidazole were significant lower than that in 0.9% Sodium Chloride(P0.05).ConclusionSubgingival irrigation with 0.2% Chlorhexidine and 0.2% Tinidazole combining with ultrasonic scaling were more effective in reducing the COL-II level in GCF.
　　Key words:Gingival Crevicular Fl uid(GCF);subgingival irrigation,Ⅱtype collagenase;Chlorhexidine;Tinidazole
　　
　　胶原酶(collagenase,COL)是一种金属基质蛋白酶,通过降解胶原导致牙周组织破坏,牙周炎症各临床指标与酶的活性高度相关[1]。替硝唑对龈下菌斑中的厌氧菌有明显的抑制作用,而氯已定抗菌谱广,对革兰阳性和阴性菌均能发挥抗菌作用,将抗菌药物作为龈下冲洗液与龈下刮治结合使用,送达牙周袋深部,以期达到良好的治疗效果。现代的超声波洁牙机带有自身给水装置,可在龈下刮治的同时进行药物冲洗。本文比较超声龈下刮治同时使用不同的药物冲洗对龈沟液中II型胶原酶(II type collagenase,COL-II)水平的影响。
　　
　　1材料和方法
　　1.1 病例选择:从牙周病门诊的患者中选取满足以下条件的90例慢性中、重度牙周炎患者:①1个月内未服用抗生素,3个月内未进行过牙周治疗;②无全身系统性疾病,女性未妊娠或哺乳;③所选同颌第一磨牙无龋坏,至少有一个位点的牙周袋探诊深度≥5mm,临床有保留价值。随机分为超声龈下刮治同步0.2%氯已定冲洗组、 超声龈下刮治同步0.2%替硝唑冲洗组和超声龈下刮治同步生理盐水冲洗组。
　　1.2 GCF样本的收集和保存:将2张裁成2mm×8mm的Whatman 3#滤纸条置于微离心管中,用电子分析天平FA1004(上海衡平仪器仪表厂)称重备用。轻轻去除观察牙的龈上菌斑,隔湿、干燥牙面,将滤纸条小心地插入该牙近中颊侧龈沟内不超过lmm处,留置30s后取出(若滤纸条上有血则弃用),10s后在同一位点再次取样。将同一患牙的2张滤纸条放入微离心管,再次称重,计算龈沟液的重量。-70℃贮存备用。
　　1.3 临床观察指标的检查和记录:龈沟出血指数(Sulcus Bleeding Index,SBI):按 1981年Mazza的标准[2]分为0～5度,以出血情况最严重的值为记录值。牙周探诊深度(Probing Depth,PD) :按《临床牙周病学》标准检查[2],记录探诊最深点的读数。
　　附着水平(Attachment Level,AL):按《临床牙周病学》标准检查[2],记录最大值。
　　1.4 实验方法:收集患牙GCF样本,记录相关临床指标,作为基线。三组均使用Suprasson PMax超声治疗仪(赛特力公司,法国),选择相同功率,同等喷水量,在超声龈下刮治的同步分别用0.2%氯已定、0.2%替硝唑和生理盐水进行冲洗,直至尖探针检查根面光滑为止。患者在观察期内不使用任何药物。2周后再次收集同一观察牙的GCF样本,检查和记录牙周临床指标。以上工作均由同一位医师完成。
　　1.5 GCF中COL-II的检测:采用双抗体夹心法对GCF中COL-II进行测定。ELISA试剂盒由上海锐聪实验室设备有限公司提供。纯化的人COL-II抗体包被微孔板,制成固相抗体,向微孔中依此加入样本,与辣根过氧化物酶标记的COL-II抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经彻底洗涤后加底物显色液显色。显色液在辣根过氧化物酶催化下呈蓝色,在终止液的作用下最终呈黄色。颜色深浅和样品中的COL-II呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样本中人COL-II的浓度。
　　1.6 统计学分析:采用SPSS18.0统计软件(方差分析,Spearman相关分析)进行数据处理。
　　
　　2结果
　　三组治疗前后GCF中COL-II水平存在显著性差异(P0.05,见表1);治疗前后PD、AL有显著性差异(P0.05,见表2～3);SBI统计结果显示两组疗效相同(见表4);COL-II水平与PD、AL均呈正相关关系(见表5)。
　　
　　3讨论
　　牙周病是一种由口腔内细菌特别是厌氧菌感染为主的多因素疾病。菌斑作为牙周病的起始因子,不但直接破坏牙周组织,还激发宿主炎症反应和免疫反应,提高胶原酶活性从而造成牙周组织破坏。大量研究表明[3-7]:胶原酶通过降解牙周组织中的胶原从而造成牙周组织破坏,附着丧失,牙周袋形成,牙槽骨吸收。其中II型胶原酶在牙周破坏中起主要作用。牙周炎患者的炎症程度及各项临床指标均与COL-II水平高度相关。
　　去除龈下菌斑和牙石是治疗牙周病的基础,但其有效性会因牙周袋深度和根分叉区域病变而受到影响。替硝唑是一种疗效高、疗程短、耐受性好的广谱抗厌氧菌的药物,具有抗厌氧菌活性高、人体内半衰期长、组织渗透性好等特点,能够有效控制口腔厌氧菌感染,而氯已定是高效、广谱杀菌剂,对革兰阳性和阴性菌均有杀菌作用,且不受脓血的影响,两者均是治疗成人牙周病常用的辅助手段。局部给药的方式可以提高局部药物浓度,提高疗效,降低副作用[8-9]。有研究认为,用于牙周袋内冲洗的抗菌药物的作用具有累积效应[10],含抗菌成分的冲洗剂缓解牙周炎临床症状的作用明显优于生理盐水[11]。
　　随着超声技术的发展,超声治疗仪已经被广泛应用在牙周病的治疗方面。Suprasson PMax超声治疗仪自带专用储液罐,可以在龈下刮治的同时进行药物冲洗。本实验表明在获得良好的菌斑控制后,牙周组织炎症得以缓解,牙周炎患牙的临床指标都有不同程度的改善,龈沟液中COL-II的水平也明显下降。超声龈下刮治同步使用药物冲洗龈沟液中COL-II的水平下降尤为显著,说明该方法对牙周炎的治疗效果较传统方法更优。提示目前牙周病治疗中常用的冲洗液及含漱药物,如氯己定、替硝唑等均能有效减轻牙周组织炎症,而且冲洗液进入牙周袋的深度和作用时间与其抗菌效果密切相关,但远期效果缺乏相关研究数据。另外在实际操作过程中,因冲洗药物口味较苦涩,个别患者难以耐受,提示我们可在冲洗药物的配方及最低抑菌浓度上有所改进。
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　　[收稿日期]2010-02-05[修回日期]2010-03-20
　　编辑/何志斌