饲料脂肪水平对草鱼幼鱼生长和肝胰脏组织形态的影响

张 玲， 张卫东， 赵德福， 张远方， 陈小有

（河南省水产科学研究院，河南郑州 450044）

水产品是人们获得优质蛋白和脂肪的重要食物来源，人工配合饲料的出现，使得集约化养殖成为可能，水产品产量得以快速提升。草鱼（Ctenopharyngodon idella）因其具有生长速度快、肉厚刺少、味道鲜美等特性，成为我国主要的水产养殖品种，其产量长期处于淡水鱼之首。又因草鱼为典型的草食性鱼类，其配方对蛋白、脂肪的要求较低，因此饲料成本也相应较低。

目前，关于草鱼营养需求方面的研究，大多集中在蛋白质（李彬，2014；
罗莉等，2003）及氨基酸（黄爱霞等，2018；
孙丽慧等，2016；
罗莉等，2010）需求、不同脂肪源使用效果（邢君霞等，2021；
刘玮等，1995）、糖利用能力（陈团等，2019；
张建等，2010；
尹晓静等，2010；
田丽霞等，2002）等方面。在脂肪需求量方面也有一些报道，但其最适需求量跨度较大，在1%～9%，并且很多是在纯化饲料基础上得出的结果，与养殖用配方差距悬殊。本文以实用配方为背景，研究草鱼幼鱼对脂肪的最适需求量，以期为草鱼实用配方的制定提供数据支持。

1.1 试验饲料 根据草鱼实用配方配制基础饲料，基础饲料中以鱼粉、豆粕、菜饼和玉米干酒糟及其可溶物（DDGS）为主要蛋白源。在基础饲料中添加豆油，设计6个添加剂量，即0%、1%、2%、3%、4%和5%，制成6种试验饲料，各试验组饲料的组成及营养水平见表1。

表1 试验饲料组成及营养水平（风干基础）%

试验饲料的制作是先将饲料原料经粉碎机粉碎，微量元素采用逐级放大的方法混匀，之后所有原料经40目筛网过滤，筛上物团经手工搓碾后全部过筛、混合。采用上海申德SDPM型颗粒机制粒，通蒸汽添加水分并熟化物料，制成硬颗粒饲料直径为2 mm，放阴凉处自然风干后装袋，于-20℃冰箱保存备用。

1.2 试验鱼及养殖管理 试验用鱼为草鱼，由河南省水产科学研究院试验中心提供。鱼种统一用聚维酮碘消毒。用基础饲料驯化约15 d，待鱼主动摄食后，采取随机的方法，挑选体格健壮、大小均匀的鱼种进行分组，初始体重（104.0±7.7）g。试验共分6个处理组，每个处理组设6个重复，每个重复20尾鱼，共720尾。

养殖试验于河南省水产科学研究院试验中心黄河基地进行。采用池塘网箱（150 cm×150 cm×150 cm）养殖。日投喂3次（8：00、12：00、16：00），日投饵量为鱼体重的1.0%～2.0%，根据摄食情况每周调整投饵量，每天记录各个网箱试验鱼吃食重量及死鱼重量，饲养周期为60 d。试验期间水温（24.0±3.0）℃，养殖期间持续充氧。

1.3 样品采集 养殖试验结束后，禁食24 h，称量每个网箱试验鱼的总重量并记录条数，用于计算生长性能指标。每个网箱随机取3尾鱼，用丁香酚（1：10000）麻醉后，解剖取其内脏，于相同部位剪取肝胰脏组织块，用波恩氏液固定，用于制作组织切片。

1.4 计算公式

成活率/%=nt/n0×100；

增重率/%=（mt－m0）/m0×100；

特定生长率/（%/d）=（lnmt－lnm0）/t×100；
饲料系数=mf/（mt－m0）；

蛋白质效率=（mt－m0）/（mf×P）；

单 位 体 重 所 耗 蛋 白 质/‰=mf×P/（mt－m0）×1000‰；

单 位 体 重 所 耗 脂 肪/‰=mf×L/（mt－m0）×1000‰；

式中：nt为终末尾数；
n0为初始尾数；
mt为终末均重；
m0为初始均重；
mf为饲料摄入重量；
P为饲料蛋白质含量；
L为饲料脂肪含量。

1.5 数据处理 应用SPSS 11.0 for Windows进行One-Way ANOVA分析，Duncan氏多重比较，结果用“平均值±标准差”表示，P<0.05为差异显著。

2.1 饲料脂肪水平对草鱼生长性能的影响 养殖试验为期60 d，在整个养殖过程中草鱼没有出现病害，成活率均为100%；
从表2中数据可以看出，随着饲料中脂肪含量的增加，饲料系数呈先下降后上升趋势，最低值出现在D3组，即饲料脂肪含量为6.48%的组，该组较脂肪含量最低的D1组饲料系数降低了12.6%，较脂肪含量最高的D6组饲料系数降低了10.0%，并且D3组与其余5组均具有显著性差异（P<0.05）；
增重率随饲料脂肪含量的增加呈先上升后下降的趋势，最大值为D3组，并与D1、D5、D6组均具有显著性差异（P<0.05），分别较D1、D5和D6组提高了18.4%、11.2%和18.8%；
特定生长率的最高值出现在D3组，并与D1、D5、D6组具有显著性差异（P<0.05），分别较D1、D5和D6组提高了10.9%、6.8%和10.9%；
蛋白质效率随饲料脂肪水平的变化趋势与增重率及特定生长率相同，最高值出现在D3组，并且与其余5组均具有显著性差异（P<0.05）。

表2 饲料脂肪水平对草鱼生长性能的影响

2.2 饲料脂肪水平对草鱼增加单位体重所消耗营养素的影响 从表3的数据可以看出，随着饲料脂肪水平的提高，草鱼每增加1 kg体重所消耗的蛋白质质量（g）快速减少，在D3组时达到了蛋白质消耗量的最低点，并与其他各组都形成显著性差异（P<0.05），随着饲料脂肪水平的进一步提高，草鱼增加单位体重所消耗的蛋白质又逐渐提高，到D5组时蛋白质消耗质量趋于稳定，D3组草鱼增加单位体重所消耗的蛋白质质量较D1和D5组分别降低了14.1%和10.0%；
在脂肪消耗方面，随着饲料脂肪水平提高，草鱼增加单位体重所消耗脂肪的质量持续增加，D1～D3组增加较缓慢，组间没有显著性差异（P>0.05），当饲料脂肪水平进一步提高时，脂肪消耗量增速加快，并且D4～D6组与前3组都形成显著性差异（P<0.05），其中脂肪含量最高的D6组较脂肪含量较最低的D1组草鱼增加单位体重所消耗脂肪提高了91.9%。

表3 饲料脂肪水平对草鱼增加单位体重所消耗营养素的影响g/kg

2.3 饲料脂肪水平与草鱼生长性能的回归关系从表2的数据可以看出，草鱼的生长性能指标与饲料中脂肪水平存在相关性，因此分别以草鱼饲料系数、增重率、特定生长率和蛋白质效率为因变量（y），以饲料脂肪水平为自变量（x）进行回归分析，得到如下回归方程：

饲料系数（y）与饲料脂肪水平（x）进行相关回归分析，得到图1的结果，拟合后的方程为：

图1 草鱼饲料系数与饲料脂肪水平的关系

求出当x=6.414时，饲料系数的值最低。

增重率（y）与饲料脂肪水平（x）进行相关回归分析，得到图2的结果，拟合后的方程为：

图2 草鱼增重率与饲料脂肪水平的关系

求出当x=6.471时，增重率的值最高。

特定生长率（y）与饲料脂肪水平（x）进行相关回归分析，得到图3的结果，拟合后的方程为：

图3 草鱼特定生长率与饲料脂肪水平的关系

求出当x=6.392时，特定生长率的值最高。

蛋白质效率（y）与饲料脂肪水平（x）进行相关回归分析，得到图4的结果，拟合后的方程为：

图4 草鱼蛋白质效率与饲料脂肪水平的关系

求出当x=6.368时，蛋白质效率的值最高。

2.4 饲料脂肪水平对草鱼肝胰脏组织形态的影响 从图5中不同脂肪水平草鱼肝胰脏组织切片的显微观察可以看出，D1～D6组草鱼肝胰脏细胞排列整齐、大小均一、细胞膜分界明显，总体来说肝胰脏细胞都比较健康。D1、D2和D3组的草鱼肝胰脏细胞细胞质颜色较深，随着脂肪添加水平的进一步提高，D4、D5和D6组肝胰脏细胞体积有增大趋势，并且细胞中脂肪滴面积逐渐扩大，细胞质中白色部分增多，使得切片整体颜色变浅。

图5 不同脂肪水平下草鱼肝胰脏组织结构

3.1 饲料脂肪水平对草鱼生长性能的影响 鱼类利用糖的能力低，是因为鱼倾向于使用氨基酸，而不是葡萄糖作为碳源来合成新的脂肪酸。一些肉食性鱼类因其天然饵料中富含脂肪，所以鱼体内新的脂肪酸合成很少发生，基本由摄入的脂肪分解产生，因此养殖用饲料中添加脂肪可以起到节约蛋白的作用。这也从另一个角度说明，鱼体直接蓄积食源中的脂肪，将会降低代谢能中将蛋白质转化成脂肪的能量需求，在生产性能方面就会表现出蛋白质效率及增重率提高、饲料系数下降。

从本试验中饲料脂肪水平对草鱼生长性能的影响可以看出，在饲料脂肪水平为5.72%～7.65%时，草鱼的增重率、特定生长率及蛋白质效率均显著高于未添加脂肪组，饲料系数呈现与之相反的趋势，说明饲料脂肪对草鱼有显著的促生长效果。之所以会出现这种现象，是因为在饲料脂肪水平过低时，鱼类需动用除脂肪之外的其他营养素供能，其中蛋白质起主要作用。随着饲料脂肪水平的增加，蛋白质作为能量消耗也随之减少，转而更多用于体蛋白的增加，从而表现出生长性能的快速提升。但随着饲料脂肪水平的进一步提高，生长性能指标逐渐降低并趋于平稳。这一现象也同样出现在团头鲂（蒋阳阳等，2012）、拉氏鱥（蒋湘辉等，2016）、大西洋白姑鱼（Chatzifotis等，2010）、吉富罗非鱼（王爱民等，2011）、齐口裂腹鱼（段彪等，2007）、鳜鱼（王贵英等，2003）等。

本研究采用曲线回归分析得出，当饲料脂肪水平分别为6.471%、6.392%、6.368%和6.414%时，草鱼幼鱼可以获得最大增重率、特定生长率和蛋白质效率以及最低饲料系数，因此综合考虑生长速度和饲料利用情况，草鱼幼鱼饲料适宜脂肪水平为6.3%～6.5%。本结果与田娟（2009）在草鱼脂肪需求上的结果接近，但与雍文岳等（1985）、高文（2009）和轩子群等（2012）确定的草鱼饲料脂肪含量1%～4%的水平有较大差距。究其原因，饲料配方不同可能是导致结果不同的关键因素，本试验与田娟（2009）试验的饲料配方均为实用配方，而雍文岳等（1985）、高文（2009）和轩子群等（2012）的试验饲料均为纯化饲料，实用饲料与纯化饲料在蛋白源、糖源、脂肪源上均存在较大差异，而营养素来源的不同会对鱼类在脂肪利用方面产生极大影响。除此之外养殖条件、水温、生长阶段等都会引起鱼类对脂肪需求量的差异（Bogevik等，2010）。

3.2 饲料脂肪水平对草鱼增加单位体重所消耗营养素的影响 本试验结果表明，在饲料蛋白质含量基本相同前提下，草鱼增加单位体重所消耗的饲料蛋白质质量，随饲料脂肪含量的增加，呈先下降后上升的趋势。在饲料脂肪含量为6.48%时（D3组），增加单位体重所需的蛋白质为267.99 g、所需的脂肪为58.26 g。在饲料脂肪含量为4.79%时（D1组），增加单位体重所需的蛋白质为311.91 g、所需的脂肪为49.10 g，D3组较D1组蛋白质消耗量下降了12.13%、脂肪消耗量上升了18.59%，即每消耗1 g脂肪可以节约蛋白4.79 g。而当饲料脂肪含量达到9.45%时（D6组），相较于D1组，每消耗1 g脂肪可以节约蛋白质质量为0.42 g。因此，从以上数据可以直观的看出，饲料中适宜的脂肪含量可以起到显著节约蛋白的作用。同样，在一些鱼类的研究中发现，鱼体营养组成似乎对饲料中脂肪水平更加敏感，而饲料中蛋白质却不如脂肪那么显著。正如桑永明（2018）在方正银鲫上的研究发现，不管是饲料脂肪梯度试验还是蛋白质梯度试验，都不会对方正银鲫幼鱼肌肉蛋白质含量产生显著影响，而肌肉脂肪含量却随饲料脂肪水平的提高而显著增加。而在军曹鱼（Chou等，2001）、红鳍东方鲀（Kim等，2009）、细鳞鲑（Lee等，2001）、圆 斑 星 鲽 （Lv等，2015）、波 斯 鲟（Mohseni等，2013）、乌苏里拟鲿 （马国军等，2012）上的研究发现，随着饲料蛋白含量的增加，鱼体脂肪含量呈下降趋势。以上结果均说明通过提高饲料脂肪含量较提高蛋白含量在鱼体增重方面的作用更大。

3.3 饲料脂肪水平对草鱼肝胰脏组织的影响草鱼具有蓄积脂肪的能力，其蓄积部位主要位于肌肉、肝胰脏、腹腔和肠系膜，各部位蓄积脂肪的多少也因种类不同而存在较大差异（陈拥军等，2016）。郭小泽（2013）研究发现，草鱼蓄积脂肪的主要部位是肠系膜，占鱼体脂肪含量的22.93%～28.61%，其次是肌肉组织占11.46%～14.54%，最后是肝胰脏组织占2.35%～4.85%，虽然肝胰脏组织储存脂肪占比较小，但因其质量小，致使其脂肪的绝对含量很高。这从本试验草鱼肝胰脏组织切片就能看出，随着饲料中脂肪含量的增加，肝胰脏细胞中白色部分逐渐增大，说明本试验中草鱼肝胰脏脂肪蓄积量与食物中脂肪含量呈正相关，虽然草鱼肝胰脏细胞脂肪量逐渐增多，但即使是饲料脂肪含量最高的D6组，草鱼肝胰脏细胞仍旧排列紧密，细胞膜界限清晰、完整，未有细胞破损、溶胀等的器质性改变。这从本试验养殖过程中草鱼健康状况也可以看出，6个试验组草鱼在整个养殖阶段都体色正常、抢食活跃，未有死鱼现象出现，饲料即使在脂肪含量达9.45%的情况下也未严重影响草鱼健康，说明草鱼肝胰脏有比较强的脂肪蓄积能力。

本试验中，草鱼对脂肪有一定的耐受能力，即使饲料脂肪含量达9.45%，也未对草鱼健康产生显著影响；
当饲料脂肪在5.72%～7.65%时均对草鱼有显著的促生长效果，综合比较生长和饲料利用率，草鱼幼鱼饲料脂肪最适含量为6.3%～6.5%。