微生物发酵菌液对断奶仔猪生长性能和肠道健康的影响

杨尚霖， 罗巧慧， 史海涛， 朱 可， 郭春华*

（1.阿坝职业学院，四川阿坝 623200；
2.西南民族大学畜牧兽医学院，四川成都 610041）

饲料中长期使用抗生素，可造成病原菌产生抗药性，从而影响到食品安全甚至人类公共卫生与安全，已引起全社会的广泛关注。我国农业农村部2019年第194号公告宣布，自2020年7月1日起，饲料生产企业停止生产含有促生长类药物饲料添加剂（中药类除外）的商品饲料。而药物饲料添加剂的限制使用，直接促进了对替抗产品的研究和应用。

微生物发酵饲料是指饲料原料经微生物发酵处理，降解了其中的抗营养因子和分解饲料中大分子物质，产生富含微生物菌体和其代谢物有机酸、氨基酸、维生素和促生长因子等营养物质的混合物（康怀艳，2019；
马传兴等，2014）。目前，最常见的菌种为酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌和霉菌等（李军训等，2010）。研究表明动物采食微生物发酵饲料后，不仅能够提高动物对饲料的利用率，促进动物生长发育和提高动物生产效率，而且有益动物健康，减少动物疾病的发生（康怀艳，2019；
隋洁等，2019；
王鹏，2015）。余淼等（2013）在研究时发现，使用微生物发酵饲料饲喂肉牛后，肉牛血清总蛋白、白蛋白、免疫球蛋白A、G、M浓度显著增加，证实了微生物发酵饲料可以提高肉牛免疫力；
卢珍兰（2014）和王长彦等（2008）在生长育肥猪上的试验表明，添加微生物发酵饲料后，猪只的腹泻率以及死亡率显著降低。高燕（2016）使用混合有益菌发酵全穗玉米来饲喂母猪的试验表明，发酵饲料能改善母猪的肠道微生态和健康状况，提高母猪的繁殖性能和哺乳仔猪的生长性能。李敏等（2012）用微生物发酵饲料饲喂生长育肥猪，发现其具有提高生长性能的作用，而且微生物发酵饲料对猪肉品质（肉质、嫩度等）和风味等有较好的影响。但目前关于微生物发酵饲料在猪上的研究大多是在生长育肥猪和母猪上进行，对断奶仔猪的研究报道还相对较少，且微生物发酵饲料的生产标准及产品质量不够统一（隋洁等，2019）。因此，本试验通过研究日粮中添加微生物发酵菌液对断奶仔猪生长性能、腹泻率以及肠道微生物的影响，以期为微生物发酵菌液替代抗生素及其在饲料中的合理利用提供参考。

1.1 试验材料 试验用微生物发酵菌液为山东宝来利来生物工程股份有限公司提供，所含有的微生物种类主要为：植物乳杆菌LP、戊糖片球菌PP、枯草芽孢杆菌B7348、枯草芽孢杆菌N9、丁酸梭菌Cb、酵母菌及其培养物、丝状真菌（米曲霉、黑曲霉）及其培养物、抗菌肽CEC-38、有机酸等，活菌总数≥5.0×108CFU/g。

1.2 试验动物及试验设计 本试验以断奶仔猪为试验对象，选择28日龄健康“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪32头。随机分成4组，每组2个重复，每个重复4头猪。A组为对照组（基础日粮），B组为基础日粮+1%微生物发酵菌液，C组为基础日粮+1%微生物发酵菌液+100 mg土霉素钙，D组为基础日粮+100 mg土霉素钙。

1.3 饲养管理 试验期仔猪自由采食和饮水。为确保试验的严谨和科学性，试验期间生病仔猪不使用抗生素类药物进行治疗；
猪场安排养殖管理人员定时巡场，观察猪只的采食和生理状态，记录仔猪腹泻情况。做好消毒及卫生工作，保证试验场地的清洁卫生。

1.4 试验日粮及营养水平 基础日粮为猪场自配日粮，饲料配方参照NRC（2012）《猪营养需要》（第11版）进行配制，日粮组成及营养水平如表1所示。

表1 基础日粮的组成及营养水平（风干基础）

1.5 测定指标及方法

1.5.1 生产性能 试验期间准确记录每个重复仔猪每天的采食量，用于计算每头仔猪的平均日采食量；
分别于试验第1天和28天的早上进行空腹称重，用于计算猪只平均日增重，并根据平均采食量和日增重计算料重比。

1.5.2 腹泻率 每天按时对试验猪舍进行巡视，观察猪只的精神状态、健康情况及粪便排出情况，并做好记录。仔猪腹泻率的统计，以组为单位计算腹泻频率和腹泻指数，其中腹泻频率=（腹泻仔猪数×腹泻天数）/（试验猪只头数×试验天数）；
腹泻指数采用Kelly等（1990）的方法进行评分，腹泻指数=粪便评分之和/试验仔猪总头数。腹泻程度评分标准见表2。

表2 腹泻程度评分标准

1.5.3 仔猪肠道pH和菌群的测定 在试验第28天上午晨饲后，按照微生物试验采样要求，各组取体重相近的仔猪2头，观察到仔猪开始出现排便反应，戴好无菌手套接住粪便，采集粪便中段3～5 cm的样品5 g左右，放入无菌袋中待检。收集好全部粪便样品后，将收集到的粪便，装入灭菌的离心管，测定其pH及每克直肠内容物中乳酸杆菌、双歧杆菌和大肠杆菌的数量。

1.5.4 仔猪粪便含水量和大肠杆菌数量的测定在第28天上午晨饲后，按照微生物试验采样要求从每一处理组中随机收集4个粪便样品，测定粪便中的含水量及大肠杆菌数量指标。

1.6 统计分析 试验数据经Excel（2019）进行初步整理后，采用SAS 9.2统计软件中的MIXED程序进行单因素方差分析，每个重复为1个试验单元，并用PDIFF法进行组间差异比较。P＜0.05表示差异显著，数据以“平均数±标准差”表示。

2.1 微生物发酵菌液对断奶仔猪生长性能的影响 由表3可知，各处理间平均日采食量差异不显著（P＞0.05）；
与对照组（A组）和抗生素组（D组）相比，添加微生物发酵菌液（B组）或添加微生物发酵菌液+抗生素（C组）显著提高了断奶仔猪的ADG（P＜0.05），分别比对照组提高了16.43%和14.65%；
B组和C组料重比显著降低（P＜0.05），分别降低了16.58%和16.06%；
而A组和D组之间的日增重和料重比均差异不显著（P＞0.05）。

表3 微生物发酵菌液对断奶仔猪生长性能的影响

2.2 微生物发酵菌液对断奶仔猪腹泻情况的影响 从图1可以看出，在断奶仔猪日粮中添加微生物发酵菌液或土霉素钙后，断奶仔猪的腹泻频率和腹泻指数均显著低于对照组（P＜0.05），且单独添加1%微生物发酵产品的B组效果最好，优于单纯添加土霉素钙的D组和添加微生物发酵菌液+抗生素的C组。

图1 微生物发酵菌液对断奶仔猪腹泻情况的影响

2.3 微生物发酵菌液对肠道pH、直肠微生物菌群数量的影响 由表4可知，各试验组直肠内容物的pH均低于对照组（A组），其中B组与对照组（A组）相比，添加微生物发酵菌液可显著降低断奶仔猪直肠pH（P＜0.05），其余各组间pH差异不显著（P＞0.05）；
从直肠中微生物菌群数量变化可以看出，日粮添加微生物发酵菌液（B和C组）可显著增加断奶仔猪直肠有益菌（双歧杆菌和乳酸杆菌）的数量（P＜0.05），且B组双歧杆菌和乳酸杆菌数量分别提高了24.24%和30.61%，C组双歧杆菌和乳酸杆菌数量分别提高了19.39%和24.49%，抗生素组（D组）与对照组差异不显著（P＞0.05）；
添加微生物发酵菌液和抗生素（B、C、D组）均可显著降低了仔猪直肠大肠杆菌数量（P＜0.05），但对双歧杆菌和乳酸杆菌的生长繁殖未能起到明显的改善作用。

表4 微生物发酵菌液对直肠pH和微生物菌群数量的影响

2.4 微生物发酵菌液对断奶仔猪粪便含水量及微生物数量的影响 由图2可知，各试验组仔猪粪便的平均含水量均低于对照组（A组），其中单纯添加微生物发酵菌液B组的粪便平均含水量最低，其显著低于对照组（P＜0.05），比对照组减少了23.78%。

图2 微生物发酵菌液对断奶仔猪粪便含水量的影响

从图3可知，各试验组的大肠杆菌平均数量均显著低于对照组，分别比对照组减少了40.79%、51.32%和63.18%，但各试验组间差异不显著（P＞0.05）。

图3 动物粪便中大肠杆菌数量的分析

仔猪在断奶后，机体所需营养来源由母乳转变为饲料会产生断奶应激，进而导致仔猪出现腹泻、生长性能低、机体抗病力弱等问题（黄杏秀等，2020）。贺晨晨（2018）研究发现，益生菌发酵饲料可促进断奶仔猪的生长发育，提高仔猪对营养物质的消化率以及免疫能力。宣海鹏（2019）试验发现，饲喂发酵日粮后，断奶仔猪的ADFI和ADG均显著增加。刘世雄（2020）研究表明，复合菌培养物的添加使断奶公羔羊ADG提高了13.39%，料重比降低了10.33%。黄杏秀等（2020）研究报道，在断奶仔猪日粮中添加2%和5%的微生物发酵饲料可显著提高断奶仔猪的ADG，降低料重比。在本试验中，添加微生物发酵菌液或微生物发酵菌液+抗生素后，断奶仔猪的ADG分别比对照组提高了16.43%和14.65%，料重比分别降低了16.58%和16.06%，与上述研究结果一致，表明微生物发酵菌液可替代抗生素提高断奶仔猪的生长性能。而添加微生物发酵菌液提高断奶仔猪的生长性能可能是由于日粮中的营养物质被微生物发酵后更易消化吸收，进而促进动物生长（刘世雄，2020；
宣海鹏，2019）。

李旋亮等（2014）与陶蕾等（2015）研究报道，发酵饲料可以改善断奶仔猪肠黏膜的形态结构，有助于减少仔猪腹泻和增强对营养物质的消化吸收能力。Peter（2008）发现，饲料接种乳酸发酵后，改善了饲料中营养物质的可利用性，并降低了抗营养物质和霉菌毒素的水平。黄杏秀等（2020）在断奶仔猪上的研究显示，饲喂5%的发酵饲料可以显著降低断奶仔猪的腹泻率。卢珍兰等（2014）研究表明，在生长育肥猪日粮中添加20%~30%微生物发酵玉米秸秆饲料能够满足育猪只的生长需要，且能够降低猪只的腹泻率及死亡率。朱昌友等（2014）和Canibe等（2012）的研究指出，造成仔猪腹泻的主要原因是其肠道微生物菌群因多种原因处于不平衡状态，在使用微生物发酵制剂后，一方面微生物发酵制剂中的有益菌生长代谢，造成了动物体内的厌氧环境，有利于厌氧微生物的生长繁殖，增加了肠道内有益菌的比例，另一方面是由于其中的地衣芽孢杆菌对病原微生物的拮抗和抑制作用，使致病菌的生长受到抑制，从而降低了有害菌的比例，最终，在仔猪消化道内建立起有益的微生态平衡，降低粪便中的水分，从而降低仔猪腹泻率。本试验中，在断奶仔猪的日粮中添加微生物发酵菌液或土霉素钙后，断奶仔猪的腹泻频率和腹泻指数均显著低于对照组，且试验表明，单独添加1%微生物发酵产品的B组效果最好，其粪便含水量显著低于对照组，且腹泻情况也优于其他处理组，该试验结果与黄杏秀等（2020）、卢珍兰等（2014）等的研究结论一致。Demecková等（2002）研究表明，饲喂发酵液体饲料的母猪排泄的粪便中乳酸菌数量显著增高，大肠菌群数量显著低于饲喂干颗粒饲料猪只。Forestie等（2001）研究表明，乳酸杆菌可以抑制大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌附着到肠细胞上，与病原菌发生竞争性拮抗作用，从而限制致病菌在肠道中的生长。Canibe等（2003）试验报道，生长育肥猪饲喂发酵液体饲料后导致胃液pH从4.4降低到了4.0，并提高了胃液中乳酸浓度。Missotten等（2016）对微生物发酵菌液产品进行的研究显示，微生物发酵菌液中富含有乳酸、乙酸和乙醇等物质，降低了饲料的pH，而低pH可抑制病原微生物在饲料中的生长繁殖。在本试验中，微生物发酵菌液的添加降低了仔猪直肠内容物的pH和直肠大肠杆菌数量，增加了直肠有益菌（双歧杆菌和乳酸杆菌）的数量，且显著降低了粪便大肠杆菌数量，该结果与Demecková等（2002）和Canibe等（2003）的研究结果一致。表明微生物发酵菌液的添加对断奶仔猪的腹泻情况及肠道pH和微生物区系均有改善作用，其中添加1%微生物发酵菌液的B组效果最好。

使用添加1%微生物发酵菌液的日粮饲喂断奶仔猪，可以提高仔猪的生长性能、增加肠道有益微生物菌群数量、降低大肠杆菌数量及肠道pH，并降低腹泻率。因此，在本试验条件下，所添加的微生物发酵菌液能够起到替代抗生素的效果。