二氢青蒿素抑制兔耳瘢痕增生的实验研究:二氢青蒿素

　　[摘要]目的：观察二氢青蒿素对兔耳增生性瘢痕增生的影响。方法：选取成年新西兰大耳白兔16只，建立兔耳增生性瘢痕动物模型，待上皮化后，对实验组、对照组分别给予二氢青蒿素（180mg/kg）和生理盐水（乙醇终浓度为0.1%）各10ml灌胃，术后28 天 和56 天时观察药物对瘢痕增生指数(HI)的影响及光镜下瘢痕变化情况。结果：二氢青蒿素组与生理盐水组之间HI差异均有显著性意义(P 　　
　　2.3 组织切片观察
　　2.3.1 对照组：镜下显示瘢痕组织真皮层明显增厚，为周边正常真皮层厚度的4～5倍，主要是大量成行纤维细胞增殖，胶原纤维多而致密粗大，排列混乱，可见漩涡状结构和胶原结节（见图1），其间有少量炎性细胞，结构近似人的增生性瘢痕组织。
　　2.3.2 实验组：镜下显示真皮层厚度约为正常真皮层厚度的2.0倍，成纤维细胞数量明显减少，凋亡的成纤维细胞多。胶原纤维束间有较大的空隙，排列比较规则，呈水平方向（见图2）。
　　
　　3讨论
　　
　　严重创伤、烧伤及外科手术后常常遗留增生性瘢痕，瘢痕对人而言，轻则影响外观、影响机体的正常功能，重则躯体外形改变、容貌的毁坏，也会造成患者心理的异常。由于瘢痕的发生机制目前仍不十分清楚，至今还缺乏具有临床指导意义的应用基础理论和满意有效的防治方法。目前治疗方法主要有手术切除、类固醇激素、抗代谢药、免疫抑制剂、放射疗法和硅胶膜等[4]，但远没达到满意控制瘢痕生长防治复发的目的 ,均因术后易复发或严重的全身性副作用而限制了临床应用，因此从祖国中医中药中筛选出疗效确切、副作用小的抗瘢痕纤维化的有效药物，具有重要的临床意义。兔耳腹侧面皮肤全层缺损后产生瘢痕组织类似人皮肤增生性瘢痕[1],这为更深入研究瘢痕发生、发展及其转归提供了一种很好的实验工具。目前李荟元[2]等已经成功地建立兔耳瘢痕动物模型，使药物对于瘢痕防治的研究手段有了新的方法。
　　
　　青蒿（Artemisia annua L.）是一种有效的抗疟药，20世纪70年代，我国学者从中药黄花蒿中分离出有效单体成分青蒿素后，又陆续合成了蒿甲醚、青蒿琥酯、二氢青蒿素等有效衍生物，掀起了各国学者对青蒿素类药物疗效和作用机制研究的热潮。通过对该类药物作用的深入研究，发现青蒿素类药物除了有很好的抗疟作用外，还有免疫调节、抗炎、抗纤维化和抗肿瘤作用。1998年徐德忻[5]等研究发现青蒿素对实验性矽肺有明显的治疗作用，矽肺的发生是由于成纤维细胞增生，胶原合成增多导致肺内胶原沉积所致，提示青蒿素具有抗纤维化作用。1998年贺光照等[6]首次将青蒿素用于增殖性瘢痕的治疗，通过局部应用青蒿素霜剂对50例增殖性瘢痕进行疗效观察，发现其具有抗瘢痕作用，治疗1～3个月后瘢痕红、痒痛症状减轻或消失，瘢痕质地变软、变平，有效率88%。随后又进行人瘢痕成纤维细胞体外培养,观察并分析了其对增殖性瘢痕成纤维细胞的增殖活力及胶原合成功能的影响,结果表明,青蒿素可呈剂量和时间依赖性地抑制成纤维细胞的增殖,并明显降低细胞外胶原量[7]。孔恒等[8]认为青蒿素可能通过诱导成纤维细胞凋亡而抑制瘢痕成纤维细胞增殖。李伟等[9]用青蒿琥酯做局部瘢痕内注射，观察其对兔耳增生性瘢痕形成的影响，结果发现：青蒿琥酯组兔耳瘢痕组织中胶原含量较对照组明显减少。陈卫强等[10]研究发现，双氢青蒿素对人肺腺癌细胞A569有明显的促进凋亡作用。青蒿琥脂、蒿甲醚和蒿乙醚在体内外可转化为二氢青蒿素，二氢青蒿素为其有效代谢物，它的毒性更低，药理作用强，生物利用度高。
　　本实验通过建立兔耳创面瘢痕动物模型，在兔耳创面上皮化后给予二氢青蒿素（180mg/kg）灌胃治疗，观察其对兔耳瘢痕影响的实验研究，结果发现二氢青蒿素组真皮层厚度，成纤维细胞数目较对照组明显减少；胶原纤维致密度下降，排列较规则；而且治疗组瘢痕增生指数（HI）明显低于对照组。差异均有显著性(P