重视免疫组织化学染色应用中的环节问题_免疫组织化学染色诊断

　　[摘要]组织病理学普遍应用的免疫组织化学染色由于方法和过程繁琐复杂，尚无标准化方案，加强日常工作环节中的质量意识，有助于免疫组织化学染色应用质量的提高，本文分析了染色历程中的诸多环节问题，并提出相关提高方案，为更好地应用免疫组织化学染色技术诊断提供了有益的参考，提示专业人员注意加强相关专业知识学习和质量意识。
　　[关键词]免疫组织化学染色； 质量管理； 标准化； 文献综述
　　[中图分类号]R818.023[文献标识码]A [文章编号] 1005-0515（2010）-12-030-01
　　
　　免疫组织化学染色技术的出现和发展给传统病理学带来了一场革命，使纯形态学观察的病理学发展成为形态与免疫信号相结合的现代病理学，免疫组织化学染色在病理诊断中的作用已得到广泛的认同，具有特异性高、敏感性高、程序相对一致等特点，已成为病理诊断中不可缺少的重要辅助技术。免疫组织化学染色的方法与步骤复杂繁琐，在应用中还存在不少问题，直接或间接地影响了最终的病理诊断，而且目前还没有很好的标准化方案。纵观免疫组织化学染色的全过程，重视染色应用中的环节问题，充分发挥病理诊断医生和技术人员不同的质量保障作用，才能有效地利用好免疫组织化学染色这一有力工具。
　　1 诊断医生涉及的环节问题
　　1.1 抗体配备的选择：用于病理诊断的抗体种类很多，拥有抗体种类的多少与实验辅助诊断水平有一定相关性。诊断医生在决定科室内实验抗体的选择配备时，要不断学习相关知识并根据科室实际情况选择确定适用的有效抗体种类和数量。
　　1.2 抗体应用的选择：每一种抗体的特性、适用范围、可能产生的交叉反应等都不相同。决定抗体的实验应用，是诊断医生在形态学诊断的基础上，根据鉴别诊断的需要选择提出的，诊断医生应不断学习掌握相关知识，达到正确选择适用的实验抗体，而且应选择联合抗体配套使用，避免得到片面的结果，造成错误的解释和诊断。
　　1.3 检测片的选择：很多病例的组织切片不止一张，不同切片中的组织成分常常不完全一样。正确选择检测片是获得正确每一组织化学染色结果的前提，应由诊断医生正确选择用于免疫组织化学染色的检测片，避免由技术人员选择可能出现的差错。
　　1.4 阳性对照的选择：每一组织化学染色过程比较复杂、影响因素也多，只有把握住阳性对照和阴性对照，所有的染色结果才容易判断。阳性对照是由诊断医生根据组织的不同情况设定的，诊断医生应不断加强相关知识的学习，正确运用阳性对照的表达。
　　2 技术人员涉及的环节问题
　　2.1 检测片质量：因机械性损伤、电烙性损伤、固定工作人为差错等原因导致的组织细胞外部或内部结构损伤及组织块处理不良等都会引起组织化学染色效果不好。尤其组织固定，其目的在于良好地保持组织和细胞的生前结构及位置，以保证化学成分和各种酶类（抗原）在组织中的定位研究，但当前组织固定不良仍是技术中的主要问题，有关免疫组织化学技术、免疫组织化学质量控制、免疫组织化学标准化的文章和书籍，都对其有所阐述。诸如组织固定不及时、组织人为的变干导致的抗原损失，固定液种类和浓度不恰当使用造成的组织固定不良，固定时间、处理工艺掌握的差异影响的组织固定效果，等等，都会造成免疫组织化学染色效果不好。
　　2.2 抗原修复质量：抗原修复技术的应用提供了免疫组织化学标准化的基础，但目前国内技术的最突出和最顽固的问题还是抗原修复质量问题，主要有修复温度、时间掌握不利，修复液质量存在问题等。专业内普遍认为，甲醛等固定液造成组织抗原失活是影响免疫组织化学染色应用的重要原因，挽救因甲醛固定而失活的抗原是克服途径之一，抗原修复是解决问题的焦点，目前最需要改进的方面就是要进行充分的抗原修复。
　　3 总结
　　纵观免疫组织化学染色应用的全过程，为使免疫组织化学染色能真正地有效地为病理诊断服务，诊断医生和技术人员应建立互相尊重、团结互助、共同提高、密切配合的和谐关系，共同努力争取获得合格的准确的免疫组织化学染色结果。病理诊断在临床治疗工作和医院质量中举足轻重，加强病理诊断工作的质量管理相当重要，科学的管理和规范化操作，是解决质量问题的关键。
　　为了促进免疫组织化学实验的标准化，检测免疫组织化学染色结果的可靠性，每次染色都应该进行有效的质量控制，保证室内质控、保证免疫组织化学染色的质量是全科室人员的责任。病理科主任应基于相当过硬的免疫组织化学诊断知识和丰富的免疫组织化学技术经验，有责任指导监督科室内免疫组织化学质控工作，加强人员继续教育工作，开展免疫组织化学相关知识的培训提高工作。
　　参考文献
　　[1] 周小鸽.重视病理医生在免疫组织化学应用中的主导作用[J].中华病理学杂志,2004,33(6):569-571.
　　[2] 刘艳辉,等.强化病理服务质量,促进学科发展[J].中华病理学杂志,2007,36(5)358-359.
　　[3] O"Leary T J.Standardization in immunohistochemistry[J].Appl Immunohistochem Mol Morphol,20019:3-8.
　　[4] 郑杰.努力增加病理诊断的准确性和内涵[J].中华病理学杂志,2006,35(1):2-3.
　　[5] 龚志锦,等.病理组织制片和染色技术[M].上海:上海科学技术出版社,1994:3.
　　[6] 吴秉铨.免疫组织化学病理诊断[M].北京:北京科学技术出版社,2007:19-21.