黄芪注射液对IgA肾病大鼠模型血清中IL一2\IL-6含量的影响 大鼠血清

　　[摘要]目的 探讨黄芪注射液对IgA肾病大鼠模型血清中IL一2、IL-6含量的影响。方法采用LPS+BSA+CCL方法建立IgA肾病大鼠模型,观察大鼠尿蛋白,血清中肌酐和尿素氮的含量以及IL一2、IL-6的含量。结果 黄芪注射液降低了尿蛋白,血清中肌酐和尿素氮的含量,抑制了血清中IL-2 和IL-6升高。结论 黄芪注射液具有多种免疫调节功能,对IgA肾病大鼠模型血清IL一2、IL-6有抑制作用。
　　[关键词]黄芪注射液; IgA肾病; 大鼠模型; IL一2; IL-6
　　[中图分类号]R256.5[文献标识码]A [文章编号] 1005-0515(2010)-8-139-01
　　
　　IgA肾病(Immunoglobin A Nephropathy,IgAN)是肾小球系膜区以IgA沉积为主的原发性肾小球疾病,是一种自身免疫性疾病,也是导致肾功能衰竭的重要原因之一。大量的临床研究表明,IgA肾病的发生与患者的免疫功能有关,其中IL一2、IL-6在免疫应答和免疫调节过程中发挥着重要的作用。本实验的目的旨在探讨黄芪注射液对IgA肾病大鼠模型血清IL一2、IL-6的影响,并初步探讨黄芪注射液注射液治疗IgA肾病的机理。
　　1材料与方法
　　1.1主要试剂和仪器黄芪注射液(购自浙江九旭药业有限公司)、牛血清白蛋白(BSA)和脂多糖(LPS)(均购自美国Sigma公司), Olympus BX51光学显微镜,Multiskan Ascent酶标仪。
　　1.2动物及分组 健康雄性SD大鼠36只,清洁级,体重(170±10)g。随机分为3组,正常对照组,模型组,黄芪注射液组。
　　1.3模型的建立
　　除正常对照组外,其余各组运用脂多糖(1ipopolysaccharide,LPS)十四氯化碳(carbon tetrachloride,CCL4)+ 牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)联合造模:BSA (400mg/kg,隔日灌胃)×6周+LPS(0.05 rag/次/只,第6,8周尾静脉注射各1次)+蓖麻油(O.5 ml/次/只+CCL4 0.10 ml/次/只,皮下注射/周)×9周。黄芪注射液从第8周开始用药,每日给予腹腔注射黄芪注射液1 次, 剂量为8ml /( kg・ d) ,共用4周。正常对照组及模型对照组予等体积生理盐水灌胃。
　　1.4检测指标 尿蛋白,血清中肌酐和尿素氮的含量;血清中IL-2 和IL-6的含量
　　1.5组织处理试验结束后大鼠取血处死,4℃离心,取血清-20℃保存待用。取部分肾组织保存于多聚甲醛液中,用于HE染色和病理观察。
　　1.6检测方法采用放射免疫分析法检测血清中促炎细胞因子IL-2 和IL-6的含量,具体操作按试剂盒的说明书进行。
　　1.7统计方法软件用SPSS15.0,用方差分析,实验结果以均数±标准差(x±s)表示。
　　2结果
　　2.1 黄芪注射液对大鼠IgA肾病蛋白含量,血清肌酐和尿素氮的影响,结果如下(表1)
　　
　　(以下同)。
　　2.2黄芪注射液对大鼠IgA肾病中IL-2和IL-6含量的影响。
　　3讨论
　　IgA 肾病(IgAN)是世界上发病最为广泛的原发性肾小球肾炎[1],占我国原发性肾小球疾病的26%～34%,肾小球系膜细胞(MC)增殖及系膜区基质增加是其主要病理特点,本实验应用LPS+BSA+CCL方法进行造模.在本次的实验造模过程中,模型对照组及各治疗组均出现了不同程度的蛋白尿、血尿和肾功损害;大鼠肾脏HE染色镜下观察,病理结果也较为理想。与文献报道基本一致[2]。
　　黄芪为传统的中药才, 是临床上治疗肾病的常用药,具有补气升阳、益气固表、利尿消肿、扶正固本之效。黄芪注射液是从中药黄芪中提取而成富含氨基酸, 微量元素硒、铁、锌及黄酮、黄酮类似物、黄芪皂苷类和黄芪多糖等多种成分。现代药理研究表明,黄芪具有提高细胞免疫和体液免疫功能,动物实验表明,黄芪扩张血管,降低血压,抗血小板凝集,增加肾血流量,改善肾脏微循环和消除过氧化脂质作用[3]。黄芪还能抗氧化自由基,降低自由基生长,促进自由基消除,从而保护肾组织细胞[4]。
　　IL一2主要由活化的T淋巴细胞产生,近年研究表明,IL-2在免疫调节网络中处于中心地位,若其活性不足,免疫应答则下降或停止[5]。IL一6主要是由巨噬细胞、T细胞、B细,IL-6与其受体系统结合有促使分化成熟的B细胞分泌抗体,促进TC、TD细胞增殖分化等生物学效应,与自身免疫疾病发生和转归密切相关[6]。
　　黄芪注射液具有多种免疫调节功能,本实验结果表明其可通过调节IgA 肾病模型中血清IL一2、IL一6含量,从而减少免疫复合物在肾小球中的沉积,蛋白含量,血清肌酐和尿素氮得到有效的控制,减少局部的炎症反应,延缓IgA 肾病纤维化的进展,对IgA肾病的治疗有一定的参考价值。
　　参考文献
　　[1] 黄胜,孙林,叶任高.两种系膜增殖性肾炎大鼠模型的建立比较[J].中国实验动物学报,2002,10(4):184-187.
　　[2] 汤颖,娄探奇,成彩联,等.实验性IgA 肾病模型的改进[J].中山大学学报。2006,1027(2):236-238.
　　[3] 刘爱珍,陈荣鸾.黄芪注射液治疗慢性肾衰竭的临床观察[J].中国中西医结合肾病杂志,2002,3(3):172.
　　[4] 杨宗善.肾脏病用药指南[M].西安:陕西科学技术出版社,1994.103.
　　[5] Ruef G,BuddeK,Lacy J,eta1.IL-6 is an autorcine growth factor for mesangial cells[-J-].Kidney Intt 1990,38:249.
　　[6] Fukatsu A.Distribution of IL-6 in normal and diseased humankidney[J].Lab Invest,1991,65:61.