组织学特征是什么_黄褐斑病损的组织学特征及角蛋白10的表达

　　[摘要]目的:研究黄褐斑皮肤的组织学改变及角蛋白10(CK10) 的表达情况。方法:取黄褐斑患者睑袋术后外眦多余皮肤,行石蜡切片的HE染色、Fontana-Masson染色和CK10的免疫组化染色,观察此处皮肤的病理学改变和CK10的分布情况。结果:黄褐斑皮损处表皮变薄,基底层细胞周围可见明显色素颗粒,基底上层、毛囊上段、真皮层也有色素颗粒分布,真皮胶原紊乱、断裂,皮肤附属器数量较少。CK10主要分布在表皮的基底上层和皮脂腺细胞的胞浆和腺泡的外层。结论:黄褐斑病损皮肤各层黑色素含量增多,皮肤组织结构多有老化表现。CK10在基底上层表达增强,其表达增强可能与表皮细胞过度分化、皮肤老化有关。
　　[关键词]黄褐斑;色素性疾病;组织结构;角蛋白10;皮肤老化
　　[中图分类号]R758.4+2[文献标识码]A[文章编号]1008-6455(2010)09-1340-03
　　
　　Histological features of melasma lesions and the expression of keratin 10
　　TANG Jian-bing1,CHENG Biao1,Zhang Wei2, LI Qin1,LIU Da-Lie1, YU Wen-Lin1,ZENG Dong1,LIAO Yuan-xing1
　　(1.Plastic and Aesthetic Center;2.Department of Pathology, Guang zhou Military Command General Hospital, Guangzhou 510010 Guang dong,China)
　　
　　Abstract: Objective To investigate the histological changes of the skin with melasma and keratin 10 (CK10) expression. Methods The excess skin in the lateral canthus was acquired after eyelid plasty operation for melasma patients,the paraffin sections was stained with HE,Fontana-Masson and CK10 immunohistochemical staining to observe the pathological changes of the melasma skin and the distribution of CK10.ResultsThe epidermis was thin in the melasma skin. And the melanin can be seen clearly around the basal layer cells.It could be seen in the upper basal layer, the upper hair follicle and dermis. Dermal collagen was disorder, fracture, the number of skin appendages was less than the normal skin. CK10 mainly distributed in the upper stratum of basal epidermis and the most outer layer of sebaceous glands. ConclusionThe content of melanin increases in melasma skin, and skin aging features appear in the histological structure. CK10 expresses strongly in the upper stratum of basal epidermis which maybe relate with the excessive differentiation of epidermal cells and the skin aging.
　　Key words: melasma; pigment disorders; histological structure; keratin 10; skin aging
　　
　　黄褐斑是临床常见的一种获得性色素增加性皮肤病,亚洲人种以面部的颧颊、下睑、鼻根等部位好发,关于黄褐斑组织病理改变方面的研究还比较少。角蛋白属于细胞骨架中中间丝蛋白家族,它是在细胞的增殖、分化和成熟过程中形成的,细胞角蛋白的表达情况也间接反映了细胞的增殖和分化情况[1]。我们利用常规HE染色、Fontana-Masson染色和免疫组化染色观察了黄褐斑皮损的组织结构变化和角蛋白10的分布情况。
　　
　　1 材料和方法
　　1.1 标本:取16例黄褐斑患者的睑袋整形术后外眦处多余皮肤组织做病理检测,取5例无明显色斑的睑袋患者术后皮肤作对照检测。所有黄褐斑患者均符合中国中西医结合学会皮肤性病专业委员会色素病学组《关于黄褐斑的临床诊断和疗效标准》(2003年修订稿)[2]。
　　1.2 试剂: 抗体:CK10McAb(克隆号:DE-K10)为福建迈新公司产品,SP试剂盒为武汉博士德公司产品。
　　1.3方法
　　1.3.1 皮肤组织用福尔马林固定,作石蜡切片,按照常规方法行HE染色和Fontana-Masson染色(胶原纤维采用Van Gieson氏液作对比染色)[3]。
　　1.3.2 免疫组织化学染色(SP法):①石蜡切片用二甲苯脱蜡水化;②阻断内源性过氧化物酶、3%H2O2甲醇水溶液室温下10min;③抗原修复:采用热修复法;④正常羊血清封闭,室温10min;⑤滴加角蛋白10抗体在湿盒中,室温或37℃,1～2h,PBS洗片;⑥滴加生物素化二抗,室温10min,PBS洗片;⑦滴加适量链霉菌抗生物素-过氧化物酶,室温10min,PBS洗片;⑧DAB显色约3～5min,显微镜下观察至特异性染色清晰,终止显色自来水冲洗;⑨苏木素复染;⑩梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树脂封片观察。棕黄色为阳性反应。
　　1.3.3 免疫组化结果判断:选取5例黄褐斑患者和5例无色斑皮肤的CK10免疫组化染色切片,每张切片在40×10光镜下随机观察3个表皮层的视野,共观察30个视野。表皮层细胞胞浆上呈现棕色或者棕黄色颗粒为阳性,并对阳性细胞进行计数。半定量判定:①染色强度:无染色为0分,淡染色为1分,黄色为2分,棕黄色为3分;②阳性细胞计数:细胞阳性数≤5%为0分(阴性),5%～25%为1分,25%～50%为2分,细胞阳性数≥50%为3分。取两项总分,0分为阴性-,1～2分为+,3～4分为++,5～6分为+++。
　　1.3.4 统计学分析:应用SPSS统计软件,采用Wilcoxon秩和检验,分析病损皮肤和正常皮肤CK10表达的差异。
　　
　　2结果
　　2.1 组织学特征:黄褐斑皮损处表皮变薄,角质层增厚。基底层和棘层细胞周围可见明显色素颗粒, HE染色中黑素颗粒呈红褐色,Fontana-Masson染色中黑素颗粒呈黑色,胶原纤维呈红色。色素大多数位于表皮基底层和钉状突,少数位于毛囊上段、基底上层及真皮层,并呈伞状或者帽样包绕在细胞核周围。真皮胶原紊乱、断裂,皮肤附属器数量较少。非病损皮肤真皮层胶原密度高,排列有序,汗腺、毛囊数量较多,基底上层和真皮层少见色素颗粒(见图1～4)。
　　2.2 CK10染色结果:CK10在正常皮肤和病损皮肤的基底上层、外根鞘内层和皮脂腺腺泡的外层均有一定程度表达,但在黄褐斑病损基底上层中表达更为明显(见图5～6)。
　　2.3 统计学分析:病损皮肤和正常皮肤CK10表达具有一定差异(P