口蹄疫病毒非结构蛋白促进病毒复制的功能及机制

口蹄疫（FMD）是由小RNA 病毒科的口蹄疫病毒（FMDV）感染偶蹄动物的一种烈性传染病，严重影响畜牧业的发展。FMDV 基因组RNA 编码4 个结构蛋白和8 个非结构蛋白。FMDV 非结构蛋白3A 蛋白通过其疏水基序锚定在细胞内膜并介导病毒复制复合物定位于细胞内膜，进而影响病毒复制，但其潜在机制仍不清楚。

Annexin A1（ANXA1）是膜联蛋白超家族的成员，因其对免疫反应调节的作用而被认为是一种抗炎或免疫调节蛋白。先前的研究表明，ANXA1参与了针对病原体的免疫激活和细胞凋亡。然而，ANXA1 对RNA病毒诱导的RLR信号传导的影响仍不清楚。

近期发表于《Journal of Virology》的研究论文，揭示了3A 通过抑制ANXA1 介导的促进干扰素产生的功能，致使FMDV 的复制增加。该研究首先证实病毒能够诱导ANXA1 的表达。研究发现ANXA1 在FMDV 感染后16 h 显示两条蛋白带。为了确定ANXA1 裂解条带是否是FMDV 的蛋白酶参与产生，通过共转染ANXA1 与FMDV 的3C 或Lpro，结果显示3C 和Lpro不参与ANXA1 的裂解。有报道称，在细胞外液和炎症渗出液中观察到全长和截短形式的ANXA1；
前期研究也发现，纤溶酶和组织蛋白酶D等几种蛋白酶能够切割ANXA1，对FMDV 诱导ANXA1的裂解机制仍需进一步研究。

过表达ANXA1 的结果显示，ANXA1 促进RNA病毒诱导的干扰素β（IFN-β）的产生。利用RNA 病毒感染ANXA1 敲低或敲除细胞，结果显示，ANXA1敲低或缺陷，IFN-β 的产生受损。研究进一步证实RNA 病毒诱导的ANXA1 通过MAVS-IRF3 轴，而非MAVS-NF-κB 信号级联促进其功能。ANXA1 也增强了IFN-β 或IFN-γ 诱导的信号转导。

为了揭示ANXA1 促进RNA 病毒诱导IFN-β 产生的机制，利用IFN-β 和STAT1/2 报告基因筛选系统、免疫共沉淀以及confocal 等实验证实，ANXA1 与信号转导接头蛋白VISA（Virus-induced signaling adaptor，VISA）和TANK 结合激酶1（TANK-binding kinase 1，TBK1）互作促进IFN-I 的产生。ANXA1 还与Janus 激酶1（Janus kinase 1，JAK1）和信号转导和转录激活因子1（Signal transducer and activator of transcription 1，STAT1）互作以影响JAK-STAT 信号通路。IFN-β 刺 激 后，ANXA1 不 影 响ANXA1-STAT1 和ANXA1-JAK1 复合物的形成，具体机制需要进一步研究。上述结果表明，ANXA1 在IFN-I 产生上游和下游信号转导调控是相互独立的。

该研究进一步评估了ANXA1 对FMDV 复制的影响。通过病毒滴度测定、荧光定量PCR、western blot等试验表明，ANXA1 抑制FMDV 复制。然而，全长FMDV 3A与ANXA1互作并共定位以拮抗IFN-I的产生并为FMDV 复制创造有利的环境。3A 还促进ANXA1在细胞膜周围积聚。前期的研究表明，在中性粒细胞刺激和粘附到内皮时，ANXA1 外化到质膜。3A 调控ANXA1 的分布以及3A 膜结合特性表明其与ANXA1互作在FMDV 复制过程中发挥作用。为揭示3A 与ANXA1 互作促进病毒复制机制，免疫共沉淀和pulldown等实验证明，3A抑制ANXA1-TBK1复合物的形成，进而抑制IFN-I的产生，进一步促进病毒的复制。

总之，该研究表明ANXA1 通过VISA 和TBK1 促进IFN-I 的产生，进而抑制FMDV 复制。FMDV 3A与ANXA1 相互作用以破坏ANXA1-TBK1 复合物的形成，从而负调节IFN-I 的产生，并且促进FMDV 的复制。本研究提供了对ANXA1 在病毒诱导的先天免疫反应中的机制的新见解，并揭示了FMDV 3A 拮抗ANXA1 对病毒复制的影响，需要进一步的研究来更全面地了解3A在FMDV复制中的作用。