医院艾滋检测多少钱 [艾滋病在医院检测的重要意义]

来源:村官 发布时间:2019-03-29 点击:

  【中图分类号】R512.91 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783(2011)07-0376-02   【摘要】目的 探讨艾滋病在医院检测的重要意义。方法 将我院2003年6月至2010年6月收集的住院患者3770份血液标本,在单个血清检测结果未知的条件下进行混合血清ELISA法检测。结果 3770分血清中采用混合血清法检测出HIV阳性者32例,该32例患者采用Western Blot蛋白印迹法(WB)确诊31例,阳性率为0.82%,各科室间的HIV阳性无显著性差异,P>0.05。结论 加强对住院患者的HIV检测力度,对预防医源性感染,防止医务人员职业暴露具有重要的意义。
  【关键词】艾滋病;HIV;检测;意义
  
  艾滋病(AIDS),主要通过人免疫缺陷病毒HIV进行传播,被誉为“史后世纪的瘟疫”,严重威胁着人类的健康和社会的发展,现今已经发展成为全球性的流行病[1]。目前,我国艾滋病的传播速度正在加快,流行区域不断扩大,流行形势十分严峻,检测这一病源最常用的方法是HIV抗体的检测。医院是各种疾病患者聚集地,人口密度大,很容易造成医源性感染。有研究表明,住院患者的HIV阳性率要显著高于普通人群的筛查结果。为了解住院患者HIV的感染情况,有效的预防医源性传染。现对我院2003年6月至2010年6月收集的住院患者的3770份血液标本进行HIV阳性检测,报告如下。
  1材料与方法
  1.1血清标本:收集我院监测人群的3770份血液标本,抽取监测人群的清晨空腹留取外周静脉血3ml,于普通真空采血管中,静置10min,以6000r/min,离心10min。分离血清后吸取50μl放入无菌Eppendorf管内,放于后-70℃冰箱保存待检。另选400例健康体检者的血液标本进行HIV检测。
  1.2实验方法
  1.2.1试剂与仪器:HIV-1和HIV-2嵌合抗ENV18标记的过氧化物酶组成试剂盒由英科新创(厦门)科技有限公司提供,联免疫检测试剂盒购于上海科华生物技术有限公司,洗板机为郑州安图ANTHOS FLUIO自动洗板机;微量加样器,上海雷勃分析仪器有限公司生产,Western Blot蛋白印迹法检测试剂盒购自中山大学达安基因股份有限公司提供,DYCZ-24DN型电泳仪,ZS-3板式酶标仪,测定波长为450nm,参考波长为655nm。北京市六一仪器厂生产。
  1.2.2检测方法:⑴混合血清检测:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中免疫血清学标志物;以5个标本为一组,构成混合标本,混合后加一定量稀释液,保证每份待检血清在混合血清稀释后的浓度与单独检测时浓度一致,进行混合血清检测,操作步骤按照试剂盒说明进行,全部阴性血清样品混合,1份弱阳性血清(≥于临界对照A值平均值),其余均为阴性血清样品[2]。⑵Western Blot蛋白印迹法(WB):BCA法测定各样品蛋白浓度,按BCA蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定各样品浓度,确定上样量,沸水浴5min后进行上样,进行电泳蛋白分离。SDS-PAGE后的凝胶在转移缓冲液中漂洗后,用电转移仪转移到NC膜上(4℃,100V,1h)。将膜置于5%的脱脂奶粉封闭液中,37℃封闭2h。?封闭后的NC膜在TBST中摇床漂洗三次,每次10min。加入用抗体稀释液稀释的Actin抗体(1:1000稀释),4℃摇床上孵育过夜。TBST漂洗三次,每次10min。(TBST:含0.05% Tween-20 的TBS;抗体稀释液:5%脱脂奶粉)。加入5%脱脂奶粉稀释的辣根过氧化物酶标记的第二抗体(1:4000),室温摇床上温育1.5h。TBST漂洗三次,每次10min。将膜置于ECL 显色工作液中1~5min,吸去多余液体,将膜放入保鲜膜中包好于暗盒中压上胶片曝光数分钟。将胶片进行显影定影。
  1.3统计学处理:采用SPSS 16.0软件,率的比较采用卡方检验,以P<0.05为差异有统计学意义
  2结果
  3770分血清中采用混合血清法检测出HIV阳性者32例,采用Western Blot蛋白印迹法(WB)确诊31例,阳性率为0.82%。其中心外科6例(19.4%),其他外科6例(19.4%),肾内科5例(16.1%),血液内科3例(9.7%),其他内科4例(12.9%),妇产科3例(9.7%),其他5例(16.1%),各科室间无显著性差异,P>0.05。见表1。健康体检者为检测到HIV阳性病例,阳性率为0。
  3讨论
  近年来,HIV的筛查力度正在逐渐增大,且随着人们对艾滋病了解的深入,HIV感染已不再是一种致死性疾病,而是一种可以有效控制的慢性病。因此,加强对其的筛查有利于早期诊断、治疗,控制疫情[2]。本研究中采用的检测方法是混合血清ELISA法检测法。机体感染了HIV后,在其后的三个月会大量产生HIV抗体,其在外周血中的HIV较高,甚至稀释几十万倍后,用ELISA方法仍能检测出阳性结果,ELISA法是将抗原吸附在固相载体上,它只能与抗体结合,而结合后的复合物不能象沉淀反应那样再互相结合,应用混合血清法检测HIV的结果的另名都和特异度都比较可靠[3]。本研究中经检测,医院住院患者HIV的阳性率为0.82%,显著高于健康体检者的阳性率0。且31例HIV阳性患者在各科室之间的分布无显著性差异,P>0.05。切实加强医疗机构HIV筛查力度,是发现和控制艾滋病的有效途径之一,这有利于减少医护人员的职业暴露,降低医源性感染的发生率。综上所述,加强对住院患者的HIV检测力度是遏制医源性传播艾滋病的必要手段。
  参考文献
  [1] 王雅西,绳宇.对艾滋病专科护理人员进行专业化教育的效果评价与分析[J].中华护理杂志,2007,42(7):606-609.
  [2] 陈远林,秦立新,张仁生,等.住院患者血液传染性相关指标检测的意义[J].中华医院感染学杂志,2007,17(4):388-390.
  [3] 陈颖丹,王聚君,周长海,等.混合血清检测在寄生虫病血清流行病学调查中的应用[J]. 中华流行病学杂志,2006,27(11):947-949.
  作者单位:550004 贵州省贵阳医学院附属医院
  注:本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文

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