已收录论文清咽利肺散医院制剂关键工艺研究

　附件 2.(已收录）论文 清咽利肺 散医 院制剂 的 关键工艺研究 张丽1* ，符洪 2 ，王开裕 1 ，雷玲芳 1 ，王春桃 2

　 （1. 海南省中医院药学部，海南 海口 570203；2.海南省药物研究所，海南 海口 570216）

　［摘要］ 目的: 摸索中药医院制剂“清咽利肺散”处方水提液的纳滤浓缩工艺及干燥方法。

　方法:采用 HPLC 法测定黄芩苷经过纳滤浓缩后的保留率，以黄芩苷的保留率和膜通量为指标,通过单因素试验分析纳滤操作压力、吸附特征等因素对水提液浓缩工艺的影响。比较了纳滤浓缩前后提取液 HPLC 图谱的一致性，并进一步比较了两者的喷雾干燥效果。

　结果:黄芩苷的保留率未受压力、浓缩倍数的影响，纳滤浓缩前后药液的 HPLC 图谱基本一致；提取液经过纳滤浓缩再喷雾干燥所得粉末更稳定。结论: 纳滤适用于浓缩清咽利肺处方的水煎提取液，纳滤浓缩液经过喷雾干燥后制成的散剂更稳定。

　关键词：黄芩苷；纳滤浓缩；膜通量；保留率 Studies on Key Technology of Qingyanlifei powder for hospital preparation Zhangli1 ,Fuhong 2 , Wangkaiyu 1 ,Leilingfang 1 ,WangChuntao 2

　1.Pharmacial Department of Hainan Provincial Hospital of Chinese Medicine， 2．Pharmaceutical Research Institude of Hainan Province)

　 [Abstract]

　Objective：To find out nanofiltration enrichment process and Drying Method of extract solution for hospital preparation of Qingyanlifei prescription．

　 Method：Taking Baicalin as detection object，HPLC was employed to determine nanofiltration retention rate of Baicalin of the extract solution，with retention

　rate and membrane flux of Baicalin as indexes，effects of operating pressure and adsorption characteristics on concentration process were investigated by single factor tests. Comparing the consistency of the HPLC

　chromatographies of the extract solution Before and after concentration, and further comparing the spray drying

　result of the both.

　Result：Retention rate of Baicalin unchanged with change of pressure and cycles of concentratin. the HPLC chromatography of the solution after concentration is consistent with that before，and the powder of spray drying is more stable by nanofiltration process.

　Conclusion：

　Nanofiltration concentration is useful for concentrating the extract solution of Qingyanlifei

　 prescription，and the powder of spray drying is more stable by nanofiltration process.

　[Key words]

　Baicalin； nanofiltration process；membrane flux；retention rate 清咽利肺处方是海南省中医院经过长期实践摸索形成的特色中药治疗方，针对海南地区大多数咳喘痰多为风热中毒所引起的特点，具有清咽止咳、利肺祛痰等功效。处方中使用了黄芩、牛蒡子、苦杏仁......等 18 种中药，因药味较多，原有水煎内服的形式无论煎煮水量或服用量均较大，研发清咽利肺散剂可以较好地解决这一问题。纳滤是一种介于超滤和反渗透之间的膜分离过程，可截留相对分子质量为 200～1000Da 的有机物，而中药材中有效成分的相对分子质量大都介于 100～1000Da[1] ，因此纳滤适于中药水提液有效成分的精制和浓缩 [2] 。与传

　统热浓缩相比，纳滤浓缩具有节能、可连续操作、生物活性保存完好、便于自动化等优点，非常适用于中药水煎液的浓缩[3-4] ,特别是在中药热敏性成分的分离精制方面，已有成功的探索和应用[5-10] 。本实验采用孔径 150Da 纳滤膜处理清咽利肺处方提取液，通过 HPLC 测定有效成分黄芩苷的保留率，以保留率和膜通量为评价指标，确定最佳纳滤浓缩工艺，并进一步考察了纳滤浓缩液的干燥效果，为中药医院医院制剂尤其是大复方固体制剂的制备提供了新方法。

　1. 材料 高效液相色谱仪( 日本岛津 LC-2010AHT) ，冷冻干燥机(自动/手动,海翡诺医药设备有限公司 Lyo-SCADA

　ver 1.1 型),实验室喷雾干燥机(济南至开能源技术有限公司 WPG-120 型),旋转蒸发仪(上海谷宁仪器有限公司 ) 。纳滤膜( 聚酰胺复合膜，截留相对分子质量 150，GE NF4040F) ，卷式微滤膜( 聚偏氟乙烯，孔径 0.2um，南京拓鉒医药科技有限公司) 。药材采购自来源于江西樟村葛玄中药饮片有限公司并经海南省药物研究所检验，符合中国药典 2015 年版一部相关项下要求; 黄芩苷对照品( 中国食品药品检定研究院，供含量测定用，批号:11)，甲醇为色谱纯，水为纯水，其他试剂均为分析纯。

　2. 方法 2.1 清咽利肺水提液的制备

　按处方量称取各味药材共 5kg，加 12 倍量水煎煮 2 次，煎煮时间均为 1 小时，用三层纱布过滤，合并提取液约 100L，分为两份，一份进行纳滤浓缩试验，另一份采用加热浓缩结合减压浓缩的方法浓缩至 1/10 倍为对照浓缩液。

　2.2 膜浓缩 2.2.1 膜过滤条件 首先，在压力 200Kpa 条件下，用 0.2µm 孔径微滤膜进行过滤，以去除提取液中固体散物质，再将微滤膜滤液在 200～600kPa 的压力条件下，用 150 Da 孔径纳滤膜进行过滤。

　2.2.2 黄芩苷的含量测定 HPLC 色谱条件：

　welch Ultimate@XB-C18 色谱柱( 4.6mm×250mm，5µm) ，柱温 30℃，检测波长 280nm，流速 1ml/min，进样量 10µl，以甲醇-水-磷酸（47：53：0.2）为流动相。

　对照品溶液的制备：取 60℃减压干燥 4 小时的黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml 含 60µg 的对照品溶液； 2.2.3 膜参数的测定 微滤对黄芩苷的透过率按 T1=C1/C2×100%计算，式中 T1 表示黄芩苷 的透过率，C1 表示微滤前药液中黄芩苷的质量浓度，C2 表示滤液中黄芩苷的质量浓度。纳滤膜对黄芩苷的保留

　率按 T2= ( 1-C3/C4)×100%计算，式中 T2 表示黄芩苷的保留率，C3 表示纳滤滤液中黄芩苷的质量浓度，C4 表示纳滤前药液中黄芩苷的质量浓度。膜通量为单位时间单位面积内通过纳滤膜的液体体积，按 J=Q/TS 计算，式中 J 表示纳滤膜通量，Q 表示透析液体积，T 表示浓缩时间，S 表示纳滤膜面积。

　2.3 喷雾干燥 2.3.1 干燥条件：在环境温度 T=30℃，湿度RH=60%的条件下，将纳滤浓缩液和加热（减压）浓缩液分别进行喷雾干燥，进风温度为 190℃、出风温度为 80℃。

　2.3.2 质量指标测定：干燥操作结束后，测定干燥后样品的性状、水分含量、溶解时间等指标。

　性状：在实际批量生产环境条件下，观察干燥后样品在 2 小时内收集并分装塑封后的性状。

　水分含量：采用电子水分测定仪测定。

　溶解时间：取样品适量，加 5 倍量水搅拌使溶解，记录溶解时间。

　3.结果 3.1 微滤对提取液影响 提取液经 0.2µm 微滤膜过滤的膜通量为 60L·m-2 ·h -1 ，计算黄芩苷的透过率为 99.9%，结果表明提取液的透过性良好，0.2µm 微滤膜对提取液中的黄芩苷成分几乎没有保留。

　3.2 不同压力对纳滤的影响 比较不同压力下将清咽利肺处方提取液浓缩 10 倍的膜通量和黄芩苷的保留率，结果见表1，随着操作压力的增大，提取液的膜通量也逐渐增大，但黄芩苷的保留率无明显影响，膜通量从 500kPa 开始变化趋于平缓，故选择纳滤浓缩工艺的操作压力为 500kPa。

　 表 1

　150Da 孔径纳滤膜在不同压力下的黄芩苷膜通量

　 压力（kPa）：

　 200

　300

　400

　500

　600

　 膜通量（L·m-2 ·h -1 ）：

　 6.2

　10.5

　13.7

　 15.8

　15.4

　 黄芩苷保留率(T2,%):

　99.9

　 99.8

　99.8

　 99.9

　99.7 3.3 纳滤浓缩前后药液的色谱图比较

　在 500kPa，25℃ 条件下进行操作，选择150Da 纳滤膜将清咽利肺处方提取液浓缩至原药液的 1/10 倍，取纳滤浓缩操作前后药液的 HPLC 图谱进行比较（图 1）,结果表明纳滤浓缩不仅使得黄芩苷有效成分保留率高，清咽利肺处方提取液中其他成分的保留率也高，而且成分间比例未发生明显变化。

　3.4 喷雾干燥结果 喷雾干燥产物测定结果见表 2,结果表明纳滤浓缩后喷雾干燥所得的散剂含水量较低，分散性和溶解性均较好，而未经过纳滤的水煎（减压）浓缩液干燥效果较差，含水量较高，易吸潮结块，溶解时间较长。

　 表 2

　干燥试验样品性状、水分、溶解时间测定结果 测定项目 工艺方式 外 观 水分含量 （%）

　溶解时间 （min）

　纳滤浓缩+喷雾干燥 黄褐色粉，易分散。

　5.6 2 减压浓缩+喷雾干燥 黏粘性粉或团块，易吸潮 12.6 5 4. 讨论 4.1 本文选用孔径 0.2µm 微滤膜进行前处理，在去除提取液中的固体颗粒物的同时对黄芩苷几乎无保留, 选用 150Da 纳滤膜对清咽利肺处方提取液进行浓缩，黄芩苷具有很高的保留率，根据纳滤浓缩前后的 HPLC 对比图谱，各成分间比例未发生明显变化，提示清咽利肺原药液中其他成分的保留率也很高。

　4.2 清咽利肺处方提取液经纳滤浓缩后喷雾干燥可以直接得到成形的粉末，避免了因加入辅料而改变处方的完整性 ， 所得散剂的各项质量指标均较好，而未经纳滤浓缩的提取液直接进行喷雾干燥无法得到成形和稳定的粉末，造成这一差别的原因可能与纳滤排除了提取液中部分单糖、单价盐类等吸湿性较强的成分有关[11-13] 。

　3.3 清咽利肺处方因药味较多，水煎液量和服用量均较大，传统的加热浓缩方法费时费力，能源消耗较大，原有汤剂形式也难以较长时间保存，而通过纳滤浓缩并直接喷雾干燥制成散剂，

　可以较好地解决这些问题，且制备过程不需要添加任何辅粒，对处方内容并无实质性改变。本文研究成果为中药医院制剂的研发提供了新的思路。

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