【便潜血(FOB)金标试纸条的检测分析】金标试纸检测

　　【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1672－3783(2011)09－0033－01 　　【摘要】目的 建立便潜血（FOB）金标试纸条检验方法。方法：便潜血（FOB）金标试纸条与联苯胺化学法检验作比较。结果 临床上粪便潜血试验常用的化学法，干扰因素较多，动物血、肉、肝脏及富含叶绿素食物、铁剂、维生素C、中药等均可引起假阳性，特异性和灵敏度较差。而便潜血（FOB）金标试纸条不受饮食限制，有较高特异性和灵敏度。结论 便潜血（FOB）金标试纸条测试简便，无需专门仪器设备和技术人员，使用简单，方便临床应用。�
　　【关键词】便潜血（FOB）金标试纸条 阳性质控品 联苯胺化学法
　　1 仪器与材料�
　　1.1 主要仪器:微量移液器（25u1, 75u1, 1000u1），BS2000S电子分析天平（塞多利斯），采便器，样品杯。�
　　1.2主要材料:便潜血（FOB）金标试纸条（中农威特生物科技股份有限公司提供）。238例临床粪便标本来自甘肃省康复中心医院病人，150例健康人粪便标本来自本中农威特生物科技股份有限公司健康工作人员。阳性质控品（血红蛋白标准品为Sigma公司产品，分别配置成高、中、低（5μg/ml、1μg/ml、0.1μg/ml）三种浓度的血红蛋白阳性质控品，分装、冻存。）。阴性质控品（含10μg/ml人白蛋白0.9%生理盐水作为血红蛋白阴性质控品，分装、冻存。）�
　　2 方法�
　　2.1 检验步骤及结果的判定： 检测时, 从铝箔袋中取出检测试纸条, 按MARK线下箭头所示的方向将试纸条浸入样本溶液中,液面不得超过MARK线,15～20秒后取出,平放在操作台上,3～5分钟内即可判断结果,30分钟后判断的结果无效。判断标准:检测区、质控区均出现红色条带者为阳性结果;检测区无条带、质控区出现红色条带者为阴性结果;检测区、质控区均未出现红色条带,则产品无效,如图1�
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　　如图1结果的判定�
　　 2.2 便潜血（FOB）金标试纸条特异性测定： 用便潜血（FOB）金标试纸条测人、牛、羊、猪、兔、鸡、鱼的血红蛋白（Hb）和同时用联苯胺化学法作比较。�
　　2.3 便潜血（FOB）金标试纸条灵敏度测定：用便潜血（FOB）金标试纸条测定不同浓度的人Hb同时用联苯胺化学法做对照。�
　　2.4 便潜血（FOB）金标试纸条重复性测定： 随机取同批次便潜血（FOB）金标试纸条20 条进行3 次重复试验,检测结果相一致,说明该方法具有可重复性。�
　　2.5 便潜血（FOB）金标试纸条稳定性测定： 便潜血（FOB）金标试纸条在室温下保存18个月或40C条件下加速破坏试验放置保存0天、3天、6天、9天以及12天后，室温保存的用便潜血（FOB）金标试纸条每三个月检测一次，每次至少10份，40C加速破坏的金标检测试条每三天检测一次，每次至少10份。�
　　2.6 便潜血（FOB）金标试纸条临床检测：用便潜血（FOB）金标试纸条对238份来自甘肃省康复中心临床便标本和150份来自中农威特生物科技股份有限公司健康员工粪便标本进行测定，同时用联苯胺化学法做对照。�
　　2.7 便潜血（FOB）金标试纸条准确性实验： 在便潜血（FOB）金标试纸条测试阴性标本中分别加入猪、牛、羊、鸡、兔、鱼血红蛋白和维生素C液、绿叶浓菜汁，铁剂后，再用便潜血（FOB）金标试纸条和联苯胺化学法检测。�
　　3 结果�
　　3.1 便潜血（FOB）金标试纸条特异性试验：用同一批次便潜血（FOB）金标试纸条分别检测人Hb、牛、羊、猪、兔、鸡的血红蛋白（Hb），只有人Hb显示阳性，其他均呈阴性反应；而用联苯胺化学法测定，其反应均呈阳性，表明特异性良好。其结果见表1�
　　表1 便潜血（FOB）金标试纸条特异性测定�
　　
　　 人Hb 猪Hb 牛Hb 羊Hb 鸡Hb 兔Hb 鱼Hb
　　 金标条 ＋ ― ― ― ― ― ―
　　 化学法 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋
　　3.2 便潜血（FOB）金标试纸条灵敏性试验：随机从同一批次待测产品便潜血（FOB）金标试纸条中抽取试剂条,用每个浓度的样品液分别进行测定，每个浓度重复测定10个试剂条。测定时将试剂条有箭头标志线一端插入样品中约15～20秒钟,插入深度不可超过标志线,取出后放，3～5分钟观察结果，但不可超过20分钟。测定浓度≥0.1μg/ml血红蛋白样品液的试剂条检测线和对照线均有显色，且在测定阈值以上的检测线色带随血红蛋白的浓度升高而色带加深，用便潜血（FOB）金标试纸条可以测定出0.1μg/ml的血红蛋白,凡血红蛋白等于和高于该浓度时检测线和对照线均显色，而低于该浓度时检测线不显色，但无论任何浓度对照线均显色。而联苯胺化学法的测定浓度为≥500μg/ml，低于该浓度时均为阴性。表明该便潜血（FOB）金标试纸条灵敏度高。结果如下表2。�
　　�
　　 浓度（μg/ml） 金标条（�） 化学法（�）
　　 0.1 100 0
　　 0.5 100 0
　　 1 100 0
　　 5 100 0
　　 10 100 0
　　 100 100 0
　　 300 100 0
　　 500 100 50
　　3.3 便潜血（FOB）金标试纸条重复性试验：
　　 随机从同一批次待测便潜血（FOB）金标试纸条中抽取测定血红蛋白阳性质控品和血红蛋白阴性质控品，测定时将试剂条有箭头标志线一端插入样品中约15～20秒钟,插入深度不可超过标志线,取出后平放，3-5分钟观察结果，但不可超过20分钟。同一份质控品的阴阳性判定结果基本一致，表明该便潜血（FOB）金标试纸条具有可重复性。�
　　3.4 便潜血（FOB）金标试纸条稳定性测定：
　　随机从同一批次待测便潜血（FOB）金标试纸条中抽取足量的样品在室温下放置18个月或40C条件下放0天、3天、6天、9天以及12天后，用便潜血（FOB）金标试纸条检测，检测线和质控线均清晰,金释放完全,层析速度快，性能没有太大的变化，表明该便潜血（FOB）金标试纸条具有良好的稳定。�
　　3.5 便潜血（FOB）金标试纸条临床检测：
　　用同一批次便潜血（FOB）金标试纸条检测238例临床常规潜血检验患者粪便标本（来自甘肃省康复中心医院）并以联苯胺化学法对照检测，用同一批次便潜血（FOB）金标试纸条检测150例健康人粪便标本（来自中农威特生物科技股份有限公司）并以联苯胺化学法进行对照检测。在临床患者粪便标本组：便潜血（FOB）金标试纸条阳性80例，联苯胺化学法阳性97例，经临床进一步证实80例患者均有消化道出血，胃溃疡，消化道肿瘤患者等。在健康人粪便标本组：便潜血（FOB）金标试纸条阳性5例，联苯胺化学法阳性32例，经临床进一步证实5例患者均有消化道出血，胃溃疡等，此结果表明便潜血（FOB）金标试纸条检测无假阳性，而联苯胺化学法假阳性率占18％。表明临床用便潜血（FOB）金标试纸条具有较好的准确性。�
　　3.6 便潜血（FOB）金标试纸条准确性实验:
　　在便潜血（FOB）金标试纸条和联苯胺化学法均为阴性的例标本中分别加入猪、牛、羊、鱼、鸡、兔血红蛋白。用同一批便潜血（FOB）金标试纸条检测，结果表明，便潜血（FOB）金标试纸条不受猪、牛、羊、鱼、鸡、兔血红蛋白的干扰见表3，在便潜血（FOB）金标试纸条和联苯胺化学法均为阴性标本中分别加入维生素C液，绿叶浓菜汁和铁剂后，再用同一批次便潜血（FOB）金标试纸条与联苯胺化学法测试，表明便潜血（FOB）金标试纸条不受维生素C液，绿叶浓菜汁和铁剂的干扰，见表4。表明该便潜血（FOB）金标试纸条准确性良好。�
　　表3 便潜血（FOB）金标试纸条准确性实验结果�
　　
　　组别 便潜血（FOB）金标试纸条 化学法
　　 猪Hb － ＋
　　 牛Hb － ＋
　　羊Hb － ＋
　　鱼Hb － ＋
　　鸡Hb － ＋
　　兔Hb － ＋
　　表4 维生素C液，绿叶浓菜汁和铁剂干扰试验结果�
　　
　　组别 便潜血（FOB）金标试纸条 化学法
　　 维生素（300μg/ml） － ＋
　　 铁剂组(300μg/ml) － ＋
　　 菠菜汁组 － ＋
　　 不加任何物质 － －
　　4 讨论�
　　 便潜血（FOB）金标试纸条以试验的靶向物质人血红蛋白（Hb）为检测对象，可特异性地检测标本中的人血红蛋白（Hb），不会受动物血、肉、肝脏及富含叶绿素食物、铁剂、维生素C、中药等因素影响出现假阳性，因而有较高特异性，同时，它以免疫层析技术为基础，具有很高的灵敏度。另外，潜血金标测试条测试简便，无需专门仪器设备，实验场地和专门技术人员，更适合基层进行消化道、肿瘤的初筛工作。此产品具有更高的检出率及准确性，使用简便，可适用于各级医院、门诊、诊所、疾病防疫部门和家庭自查。
　　参考文献�
　　［1］ 冼永明.三种粪便隐血试验的比较研究.中华内科杂志,1990,29(4): 232.�
　　［2］ 王淑娟.大肠癌的粪便诊断筛选试验及其进展［J］.中华医学检验杂志，1997，20(6):3391.�
　　［3］ 寇丽筠.临床基础检验学［M］.2版.北京:人民卫生出版社,2001:144.�
　　［4］ 曹兴建,顾爱霞,张金业,等.胶体金试纸条检测隐血方法的评价［J］临床检验杂志,1996,14(5):321.�
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　　作者单位：730000 中农威特生物科技股份有限公司