[进展期白癜风患者窄谱中波紫外线治疗前后血清抗黑素细胞抗体的变化] 窄谱中波紫外线

　　[摘要]目的:检测白癜风患者血清抗黑素细胞IgG抗体的水平,以及窄谱中波紫外线(narrow band ultraviolet B,NB-UVB)治疗前后血清中抗黑素细胞IgG抗体的变化,探讨NB-UVB对白癜风的治疗效应及抗黑素细胞抗体的意义。 方法:采用间接免疫荧光技术检测56例白癜风患者血清中抗黑素细胞IgG抗体。选择16例抗黑素细胞IgG抗体阳性的进展期患者给予窄谱中波紫外线治疗,然后再检测该抗体。结果:进展期白癜风患者血清抗黑素细胞IgG抗体阳性率显著高于稳定期患者及正常人,NB-UVB治疗后进展期白癜风患者抗黑素细胞抗体水平明显低于治疗前,差异有统计学意义。结论:白癜风患者血清中抗黑素细胞IgG抗体与疾病的活动性有一定的关系,支持白癜风与自身免疫有关。进展期白癜风患者血清中抗黑素细胞IgG抗体水平随着治疗后病情的好转而降低,表明 NB-UVB治疗白癜风有明显效果。
　　[关键词]白癜风;抗黑素细胞抗体;窄谱中波紫外线
　　[中图分类号]Q813.1 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455(2010)09-1319-03
　　
　　Variation of IgG antibodies to melanocyte in sera of patients with vitiligo in progressive stage before and after NB-UVB treatment
　　YU Zhi-ming,LIU Hui-yu,ZHENG Shu-yun,WANG Yan-hua,CAI Li-min
　　(Department of Dermatology,the First Affiliated Hospital of Harbin Medical University,Harbin 150001,Heilongjiang,China)
　　
　　Abstract:ObjectiveTo detect the level of IgG antibodies to melanocyte in sera of patients with vitiligo and the variation of its level before and after narrow band ultraviolet B (NB-UVB) treatment, and analyse clinical efficacy of NB-UVB treatment in vitoligo and the significance of IgG antibodies to melanocyte.MethodsIndirect immunofluorescent test was employed to measure IgG antibodies to melanocyte in sera of 56 patients with vitiligo. IgG antibodies to melanocyte were detected again in sera of 16 cases in progressive stage with positive antibodies after NB-UVB treatment.ResultsThe posotive rate of IgG antibodies to melanocyte in patients with vitiligo in progressive stage was significantly higher than patients with vitiligo in stabilization stage and the control group. The level of IgG antibodies to melanocyte was significantly lower after NB-UVB treatment than before NB-UVB treatment, with a statistical significance.ConclusionThe relationship of the antibodies and the activity of the disease supposes that vitiligo is correlated with autoimmune. IgG antibodies to melanocyte decreased accompanied by the improvement of the disease in sera of patients with vitiligo in progressive stage after NB-UVB treatment. It implied satisfied efficacy of NB-UVB treatment in vitiligo.
　　Key words:vitiligo; IgG antibodies to melanocyte; NB-UVB
　　
　　白癜风是一种局限性或泛发性色素脱失性皮肤病。该病病因尚不清楚,但许多研究[1-3]表明白癜风患者血清中存在抗黑素细胞自身抗体,且其滴度与疾病的活动性有关。窄谱中波紫外线(narrow band ultraviolet B, NB-UVB)是治疗白癜风的一种重要手段,效果较好,几乎无副作用。我们采用间接免疫荧光技术检测了56例白癜风患者血清中抗黑素细胞IgG抗体的水平,以及16例进展期白癜风患者NB-UVB治疗前后抗黑素细胞IgG抗体的变化,来探讨NB-UVB对白癜风发挥治疗效应的实验室依据及抗黑素细胞抗体在本病中的意义。
　　
　　1资料和方法
　　1.1 临床资料:搜集白癜风患者血清56例,男24例,女32例,12～49岁,平均年龄23岁,病程6个月～10年,平均14.2个月。有家族史3例。皮损部位:面颈部19例,躯干部21例,四肢16例,其中进展期40例,稳定期16例。疾病的活动性根据就诊前3个月内原发白斑有无扩大、有无新皮损出现为准。剔除有光敏史或近2个月系统应用过糖皮质激素及免疫抑制剂患者。20份无白癜风及其他皮肤病的健康人血清为健康对照,所有血清冻存-70℃备用。
　　1.2 试剂:霍乱毒素(CT)、碱性成纤维细胞因子(bFGF)及RPM1640培养液均为GIBCO公司产品。FITC标记的羊抗人IgG为上海生物制品研究所产品。
　　1.3 方法
　　1.3.1 黑素细胞培养:正常人黑素细胞的培养参照文献[4]改良而成。选用健康男性包皮环切术的皮肤,供皮者检查无获得性人免疫缺陷病毒(HIV)、乙肝病毒(HBV)、衣原体及支原体感染。黑素细胞培养于黑素细胞培养液-RPM1640(含10%小牛血清,6nmol/L CT及5nmol/L bFGF),传代于6孔培养板,取第3～4代细胞用-20℃的甲醇固定5min后用于实验。
　　1.3.2 间接免疫荧光法:以上述方法培养的正常黑素细胞为底物,56例白癜风患者和20例健康对照者的血清为第一抗体,在培养黑素细胞的6孔培养板上分别加入白癜风患者和健康对照者的血清(稀释度;1∶10),室温孵育48h后,PBS液冲洗3次,每次5min。用FITC标记的羊抗人IgG为第二抗体,37℃孵育30min后,PBS液冲洗3次,每次5min,吹干。荧光显微镜下观察黑素细胞荧光。
　　1.3.3 NB-UVB治疗前及治疗后抗黑素细胞IgG抗体检测:对16例抗黑素细胞抗体阳性的进展期白癜风患者采取NB-UVB治疗(波长310～315nm,波峰311nm),起始剂量0.2J/cm2,2次/周,每次递增10%～20%,最高剂量可达3.0J/cm2。若出现轻度红斑和瘙痒,维持原剂量直到症状消失,若出现疼痛性红斑或水疱,待皮损消退后再行照射,照射剂减少10%。照射仪器采用上海西格玛局部紫外线治疗仪SS-U3B和德国Wodman全仓紫外线治疗仪。治疗过程中,患者以UV防护镜保护眼睛,外生殖器以内裤防护。然后再用上述方法检测治疗后患者血清抗黑素细胞IgG抗体。
　　1.4统计学处理:所有数据使用SPSS10.0软件处理,采用χ2检验进行统计学分析,P0.05)。
　　2.2 治疗后抗体检测结果:16例抗黑素细胞抗体阳性的进展期白癜风患者NB-UVB治疗8～10周后,8例痊愈(白斑消退,恢复正常色素90%以上),5例显效(白斑缩小,色素再生面积50%以上),3例有效(色素再生面积20%以上,无新的白斑出现),无效0例(治疗前后无变化或皮损扩大),总有效率100%,治疗中未发现严重的并发症。对此16例患者复查血清抗黑素细胞抗体,3例有效者仍阳性,其他13例转为阴性,治疗前后抗体阳性率差异有统计学意义(P