抗风湿类中成药中非法添加氨基比林的快速检测|抗风湿中成药

　　[摘要]目的建立抗风湿类中成药中非法添加化学成分氨基比林的快速检测方法。方法采用化学鉴别方法进行快速筛查，并用薄层色谱法进行进一步确认验证。结果化学鉴别与薄层色谱法能快速准确的检测出抗风湿类中成药中非法添加化学成分氨基比林。结论本方法简便、快速、准确、专属性强，可用于抗风湿类中成药中非法添加氨基比林的快速检测，并且还能够在基层及国家配备的快检车上应用。
　　[关键词]氨基比林； 化学鉴别； TLC
　　[中图分类号] R914. 1 [文献标识码]A [文章编号] 1005-0515（2010）-12-237-02
　　
　　Rapid Detection of Aminopyrine illegally mixed into Anti-rheumatic Traditional Chinese medicine
　　Peng Caiping 1,Wang Shiping1, Liu Qing2 ,Pan Yuhong1
　　（1. Yichun Institule for Drug Control, Yichun336000, China;2. People"s Hospital of Yichun,Yichun336000, China）
　　
　　[Abstract]Objective To establish rapid detection method of Aminopyrine illegally added into anti-rheumatic traditional Chinese medicine. MethodsIdentification by chemical methods to rapid screen,and to further verify by the thin-layer chromatography. ResultsThe chemical identification and thin-layer chromatography can rapid detection of the anti-rheumatic traditional Chinese medicine illegally added ingredients Aminopyrine. ConclutionsThe method was simple,rapid,accurate and specific,It can be used in the rapid detection of Aminopyrine illegally mixed into Anti-rheumatic traditional Chinese medicine，and it also can be equipped with at the national application of the faster cars seized.
　　[Keywords] Aminopyrine； Chemical methods； TLC
　　
　　氨基比林为非甾体抗炎药，具有消炎镇痛的作用[1,2]。本品能引起骨髓抑制以及能形成亚硝胺致癌物质，常见不良反应主要为胃肠道损害、肝肾损害及引起中枢神经疾病，对患者身体具有相当大的危害。然而，一些不法企业为谋求暴利，擅自在中成药及保健品中添加氨基比林，给患者带来极大的安全隐患。为打击此类不法分子，确保临床用药安全，笔者查阅了相关文献[3-10]，发现报道的非法添加检测方法多为HPLC法而无化学鉴别方法，不便于基层快速筛查。于是，笔者通过试验建立了抗风湿类中成药非法添加化学成分氨基比林的快速检测方法，现报道如下。
　　1 仪器、试药与样品
　　BP211D Sartorius 电子天平（十万分之一）；FA1004电子天平（万分之一）；SK250LHC型超声波清器；929型薄层铺板仪；CAMAG 紫外观测箱（254nm/365nm）；0.1mol/L盐酸甲醇溶液； 三氯化铁试液；氨基比林对照品（批号：100503-200301 中国药品生物制品检定所）；抗风湿类药品（市场抽验）：共计20批次；阴性对照品3批（天麻胶囊，吉林银河制药厂，060901；风湿定胶囊，深圳金活药业有限公司，20061101；风湿关节炎片，四川省三星堆制药有限公司060601），均按标准检验符合规定。
　　硅胶GF254（青岛海洋化工厂）；其他试剂均为分析纯。
　　2 化学鉴别
　　2.1 溶液的制备取供试品一次服用量（固体制剂研细，丸剂可加少量的硅藻土），置50ml的具塞锥形瓶中（液体制剂萃取取氯仿层），加氯仿10mL，振摇5分钟，滤过, 滤液作为供试品溶液。取氨基比林对照品适量，加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。取阴性对照品一次服用量，置具塞锥形瓶中，加氯仿10ml，振摇5分钟，滤过，滤液作为阴性对照溶液。取阴性对照品一次服用量，再称取氨基比林10mg，置具塞锥形瓶中，混匀，加氯仿10ml，振摇5分钟，滤过，滤液作为供试品阳性对照溶液。
　　2.2 实验结果取供试品溶液、阴性对照溶液、阳性对照液、及对照品溶液各2ml，分别置试管中，加0.1mol/L盐酸甲醇溶液1ml，振摇,滴加三氯化铁试液1～2滴，再加水1ml，振摇。对照品溶液、阳性对照溶液上层显蓝紫色，阴性对照液上层显淡黄色，见图1；供试品溶液上层均显淡黄色，图2。
　　图1氨基比林化学鉴别
　　1阴性 2阳性 3对照品
　　图2上层供试品1-10 阳性对照品
　　下层供试品11-20阳性对照品
　　2.3 专属性试验（其它非甾体类抗炎药的干扰试验）分别取相当于1/3次服用量的氨基比林、美洛昔康、吡罗昔康、保泰松、吲哚美辛、芬布芬、尼美舒利、布洛芬、双氯芬酸钠、及萘普生对照品，照2. 2项下方法试验，结果氨基比林反应上层呈蓝紫色，其他成分除吡罗昔康上层呈红棕色，其他成分上层均显淡黄色。表明本文选定的方法专属性强。见图3。
　　图3氨基比林专属试验
　　1氨基比林 2～10其它非甾体类抗炎药成分
　　3 TLC法
　　3.1 溶液的制备取供试品一次服用量（固体制剂研细，丸剂可加少量的硅藻土，液体制剂蒸干），置50ml的具塞锥形瓶中，加丙酮-乙醇（9：1）混合液10ml，振摇5分钟，滤过，取滤液，作为供试品溶液。精密称取氨基比林对照品适量，加丙酮-乙醇（9：1）混合液制成每1ml含氨基比林1mg的溶液，作为对照品溶液；另精密称取氨基比林对照品与上述其他非甾体类抗炎药成分对照品适量，加丙酮-乙醇（9：1）混合液制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为混合对照品溶液。
　　取阴性对照品一次服用量，再称取氨基比林10mg，置具塞锥形瓶中，混匀，加丙酮-乙醇（9：1）混合液10ml，振摇5分钟，滤过，滤液作为阳性对照溶液。
　　3.2 方法与结果取供试品溶液、对照品溶液、混合对照品溶液、阴性对照溶液及阳性对照液各2μL，分别点于同一以0.5%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶GF254薄层板上，以氯仿-乙醚-甲醇-氨水（10：3：1：0.05）为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光灯（254nm）检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。对照品溶液，阳性对照溶液检出氨基比林，阴性对照液，未检出氨基比林，见图4；其他非甾体成分对氨基比林无干扰见图5。
　　图4 TLC图（方法学）
　　 1 23 4 5 6 7
　　1阴性2，6氨基比林4，5阳性对照 7阴性
　　图5TLC图（其他非甾体成分干扰实验）
　　1 2 3 4 56 7
　　1双氯芬酸钠 2布洛芬 3混合对照品4氨基比林
　　5吲哚美辛 6，7供试品
　　3.3 灵敏度试验精密称取氨基比林对照品，配制成一系列不同浓度的对照品溶液，按3方法实验，氨基比林的检出灵敏度分别为0.2μg。
　　4 讨论
　　4.1 本实验检出一批药品中含有氨基比林，并且随机自制的5批阳性也全部检出，结果准确、快速。
　　4.2 为简化提取过程，便于基层、快件车等开展快检工作，本试验研究中对比了超声和振摇两种方法不同提取时间。超声3分钟及3分钟以上与振摇5分钟及5分钟以上，结果表明效果基本一致。故本试验将采用振摇5分钟，减少仪器的配备。
　　4.3 本文摸索了A、氯仿-无水乙醇-乙醚-丙酮（5：3：2：1）[9]、B、三氯甲烷-甲醇-丙酮-氨水（9：2：1：0.05）[10]、C、三氯甲烷-甲醇-丙酮-氨水（18：2：1：0.05）、D、三氯甲烷-甲醇-丙酮-氨水（15：1.5：1：0.1）、E、三氯甲烷-甲醇-丙酮-氨水（15：1.5：1：0.05）F、三氯甲烷-乙醚-丙酮-氨水（9：2：1：0.05）、G、三氯甲烷-乙醚-丙酮-氨水（10：3：1：0.05）、H、三氯甲烷-乙醚-甲醇-氨水（10：3：1：0.05）、I、正己烷-醋酸乙酯-冰醋酸（15：5：1）GF254与GF254(含4.68%的NaH2PO4)、J、二氯甲烷-石油醚（30-60℃）（4：1） GF254（含4.68%NaH2PO4） 展开剂A、C、E、G效果不理想，I、J无斑点。展开剂B、D、F、H 斑点较集中圆润；但展开剂B、D的Rf值太大，斑点靠近前沿。展开剂F的Rf约为0.4，H的Rf约为0.6， GF254（含4.68%NaH2PO4）无法展开，斑点停留在原点，故综合考虑初步确定采用H展开系统，以GF254薄层板展开。
　　参考文献
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