[两种糖化血红蛋白A1c测定方法的对比实验]糖化血红蛋白6.5正常吗

　　[摘要] 目的 比较两种不同原理(离子交换高效液相色谱,亲和高效液相色谱)的糖化血红蛋白A1c(HbA1c)测定方法，以评价不同方法检测HbA1c结果间的偏倚。方法 依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A2，每天取8份临床病人新鲜血，分别使用两种方法，按1、2、3、4、5、6、7、8、8、7、6、5、4、3、2、1的顺序对样本进行测定，重复5天；计算每个样本测定的均值( 和 )，以对作散点图，以观察两种方法测定结果之间的相关性；以( - )对 做偏移图，以观察两种方法测定结果间的偏倚；利用去除离群点的数据，计算两个方法间的直线性回归方程，并对两种方法测定病人标本糖化血红蛋白结果进行预期偏倚估计。结果 同一份病人样本的测定结果，方法间以及方法内的差异均不大。两种方法间的线性回归方程为y=1.032x-0.212,r=0.9916(r2=0.9833)，在4.8%-16.0%范围内，两种方法测定糖化血红蛋白相对偏倚在-1.25%至1.86%间。结论 在常见的生理及病理范围内，两种方法测定的结果间表现出了有很好的可比性。
　　[关键词] 糖化血红蛋白A1c 偏倚 方法比对
　　[中图分类号] R446[文献标识码] B[文章编号] 1005-0515（2011）-08-001-02
　　Comparison of Two Methods for Measurement of Hemoglobin A1c in Human Blood
　　Yan YingZhang Chuanbao*He FalinZhao HaijianWang Jing Ma RongZhang JiangtaoHu CuihuaChen Wenxiang
　　（Beijing Hospital Ministry of health, National Center for clinical laboratory, Beijing, 100730）
　　[Abstract] Objective To compare two methods with different principles for measurement of hemoglobin A1c in human blood and Estimate the bias between the results of two methods. Mehtods Based on National Committee for Clinical Laboratory Standards EP9-A2, 8 fresh patients whole blood samples were collected everyday and measured by two methods in the sequence of 1、2、3、4、5、6、7、8、8、7、6、5、4、3、2、1 and the evaluation procedure was repeated for 5 days. Average of every sample results was calculated, and scatter plot ofversuswas made to check the linear relationship between X and Y throughout the measured range. Bias plot of( - )versus was made to check the difference between two methods. Data excluded outlier was used for linear regression. Results The linear equation is y=1.032x-0.212, r=0.9916(r2=0.9833).The relative bias between two methods is from-1.25% to 1.86% when HbA1c level falls in the range of 4.8% to 16.0%. Conclusion At usual physiological and pathological range, the bias between results measured by two methods shows a good comparability.
　　[Keywords] HbA1c； Bias； Methods comparison
　　目前国内临床实验室用于糖化血红蛋白(GHB)检测的方法有很多，根据分析原理，大致可以分为两类：一是基于糖化血红蛋白与非糖化的血红蛋白的电荷不同，如离子交换色谱、电泳和等电聚集方法；二是基于血红蛋白上糖化基团的结构特点，如亲和色谱和免疫方法。本文对两种不同原理的糖化血红蛋白测定方法进行了比对，以了解不同方法测定结果间的可比性，并对他们之间的偏倚进行科学的评估。
　　1 材料和方法
　　1.1 仪器 美国Primus CLC385糖化血红蛋白分析仪，测定原理为亲和高效液相色谱；日本TOSOH G7糖化血红蛋白分析仪，测定原理为离子交换高效液相色谱。实验中以PRIMUS CLC385作为比较方法(X)，将TOSOH G7作为实验方法(Y)。
　　1.2 试剂 PRIMUS CLC385校准品批号为669、1670，分析柱批号为AH0032，试剂批号分别为1638,1642,1655,1652；TOSOH G7校准品批号为ZS3001，试剂批号C7-107G、C7-206G、7-305G。
　　1.3 临床病人样本 北京医院内分泌科实验室临床病人样本。
　　1.4 评价主要依据 美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)颁布的《用患者样本进行方法学对比及偏移评估,EP9-A2》(Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline-Second Edition, Ep9-A2)[1]。
　　1.5 试验步骤 (1)熟悉仪器过程，编写仪器标准操作规程;(2)校准和室内质量控制:实验第一天，对两台仪器分别按NGSP值进行校准，并测定各自的质控样品，保证在控，此后的实验中不再进行校准;(3)每天选取8份临床样本，分别用两种方法按1、2、3、4、5、6、7、8、8、7、6、5、4、3、2、1的顺序对样本进行测定，重复5天。
　　1.6 数据处理 (1)记录每次测定结果,计算每个样本测定的均值(和)样本重复测定间差值的绝对值(DXi和Dyi)及两种方法测定结果间的差值（Xi-Yi ）。(2)以Yi对Xi作散点图，以观察两种方法测定结果之间的相关性。(3)以（Yi-Xi）对Xi做偏移图，以观察两种方法测定结果间的偏倚。(4)以(Yjj-Xij)对Xi做偏移图。(5)检查批内离群点，计算样本重复测定间差值(DXi和Dyi)的平均数，实验结果差值超出平均数4倍时，则判断为离群点。(6)检查批间离群点，计算两种方法测定结果间均值差值(Xi-Yi)的平均数，超出该平均数4倍时，则判断该测定值为离群点。(7)相关、回归计算及偏移评估:利用去除离群点的数据，计算两个方法间的直线线性回归。根据该直线回归方程，对两种方法测定病人标本糖化血红蛋白结果进行预期偏倚估计。
　　2 结果
　　2.1 病人样本测定结果(Xij,Yij)及均值(Xi,Yi)、偏移(Xi-Yi)数据表明，同一份病人样本的测定结果，方法间以及方法内的差异均不大，说明两种方法内的重复性以及方法间的可比性较好(表1)。
　　表1数据记录表
　　2.2 分别用两种方法测定结果均值间的回归方程Y=1.01161X-0.1164,决定系数为0.9874，根据EP9-A2文件，两种方法间的决定系数大于0.95即可以接受。如果r2