油菜种子纯度的田间小区种植鉴定方法

洪 勇, 唐 谷

（1. 贵州省安顺市种子管理站, 贵州 安顺 561000；
2. 贵州省安顺市农业科学院, 贵州 安顺 562100）

贵州是我国长江流域油菜优势主产区，也是全国油菜主产省之一。贵州省常年油菜种植面积约43 万hm2，种植面积居全国第5 位。种子质量是农业生产中至关重要的因素，油菜种子质量是提高油菜产量、增加油菜种植收入的基本保证。随着大量品种的审定、引进和品种加速更替，杂交油菜品种呈现井喷之势。品种纯度是评价种子质量的重要指标，对产量及品质均有直接而明显的影响[1]，开展品种纯度鉴定是保证良种遗传特性充分发挥、防止良种混杂退化、提高种子质量和品质的必要手段[2]。目前，我国鉴定种子纯度常用的方法有小区种植鉴定法和盐溶蛋白电泳法。盐溶蛋白电泳法虽然检测成本低廉，但区分能力较弱，难以区分异型株，对部分品种也无法鉴定自交苗。小区种植鉴定法可在花期同时观测多个性状，有较多的性能用于纯度鉴定[3]，是经典的表型鉴定方法。尽管田间小区种植鉴定法费工费时，但在一定时期内仍然是商品种子纯度鉴定唯一认可的方法[4]。田间小区种植鉴定应用广泛，国内已有多篇报道总结田间小区种植法开展玉米[5]、水稻[6]、小麦[7]、大豆[8]、辣椒[9]等作物品种纯度鉴定程序和关键技术，但油菜品种田间小区种植鉴定方法鲜见报道。安顺市种子管理站多年来承担贵州省油菜种子纯度田间小区种植鉴定任务，通过试验实践探索积累，已掌握关键技术环节。为油菜品种纯度田间小区种植鉴定规程的制定与应用提供参考，总结油菜品种纯度田间小区种植鉴定的鉴定程序及田间操作技术要点。

鉴定地块应选择具备油菜品种广泛种植的生产条件和自然环境条件，不易发生自然灾害。选择地势平坦、土壤疏松、均匀、肥力中等偏下、交通便利、水源有保障、排灌方便良好的田块。鉴定地块前作最好是玉米或水稻，不能选择前作为十字花科同科（种）作物的地块。地块形状规则，未发生过严重病虫害。

为加强种子质量源头监管，全面掌控油菜种子质量，使品种特征特性得到客观、真实的反映，贵州省种子管理部门定期对市场销售量大、推广种植面积较大及群众反馈疑似有问题的品种进行扦样，严格按照规定的程序、数量进行，做好鉴定油菜品种信息收集、登记工作，妥善保存样品。所有样品统一编号，并将样品保存在阴凉、通风的室内，避免因环境变化影响种子质量。在播种前，再次对参加种植鉴定的油菜种子样品数量、品种名称、样品编号、种子质量标签标注值等进行核查，确保油菜样品准确性。根据播种粒数随机选取种子粒数，试验种子样品不得进行包衣、浸种、选种等处理[7]。

为确保田间小区种植试验的有效性，同时考虑节约占地成本，应合理确定播种数量。测定品种纯度百分率，田间设计应满足GB/T 3543.2—1995 鉴定品种纯度的基本株数，计算公式为鉴定株数=4×100/（100-纯度标注值）；
田间种植粒数≥鉴定株数/发芽率。GB 4407.2—2008中规定了油菜种子的质量要求、检验方法和检验规则，大田用种中油菜杂交种的品种纯度不低于85%，常规种的品种纯度不低于95%，即种植株数达80 株即可。在实际工作中，为提高准确度，保证种植总数量在300株以上。

为保证油菜品种的特征特性得到充分表现，需有足够的行株距保证植株正常生长，密度过小，不利于植株性状的表现和专家开展现场鉴定；
密度过大，则造成土地浪费，增加成本。经过多年试验实践得出，每个样品为1 个小区，每个小区种植4～6 行，种植密度90 000 株/hm2左右。小区之间走道80 cm，便于观察鉴定和田间管理。鉴定地块四周设置80 cm 的保护行，避免鉴定地块受人畜危害。田间小区采用随机区组排列设计，并绘制田间小区示意图。设2次重复，有条件的可设置3 次重复，同一样品的2 次重复不能在同一垂直线上。

4.1 播种

按贵州省当地生态及栽培条件，当地同季种植鉴定一般安排在9月下旬至10月上旬播种。可采用直播或育苗移栽方式，直播方式需单粒播种；
育苗移栽方式播种时，可采用穴盘育苗或漂浮盘育苗，育苗盘须消毒处理后再使用。为培育壮苗，应做好育苗大棚温度管理，温度高时注意大棚防风，防止烧苗，苗旺盛生长期应适当降温，防止徒长，保持白天温度20～30℃，夜间13～18℃，视墒情适当补水，需在每个小区或每个营养钵（穴盘）上标注种植编号，经核查无误后将小区标识牌插在行（区）头，再次核查无误后开始单株移栽。移栽时随机取单株种植，不得选苗。根据种植总数量要求，综合考虑油菜发芽率、成苗率等因素，建议育苗总数量在种植总数量的基础上增加40%～50%，若个别品种发芽率低，播种量应当适当增加，避免移栽定植时缺苗。

4.2 田间管理

种植前精细整地，旋耕2 遍以上，深度达15 cm 以上，耕后平整土地。浇足底墒水，保持土壤相对含水量为70%～80%。合理施肥，小区种植鉴定只要求观察品种的特征特性，不要求高产，土壤肥力不宜过高。整个生育期间尽量少施化肥，特别是氮肥，若需施用化肥，要求施肥均匀一致。

整个生长周期不补种、不匀苗、不间苗、不去杂，不得使用除草剂和植物生长调节剂。

种植后加强田间管理，及时中耕除草、培土、保持土壤疏松。及时浇水，保持土表湿润，同时注意排涝，下雨及时清沟，确保田间无明显积水。可在蕾薹期和初花期喷施0.2%速乐硼50～60 kg/667m2，栽培管理要求一致，同一管理措施应在同一天内完成。

4.3 病虫害防治

加强田间调查，及时及早开展病虫害防治，特别注意防治苗期菌核病、病毒病，生长期霜霉病、白粉病等病害，蚜虫、菜青虫、菜粉蝶等虫害，以保护油菜正常生长，充分表现其品种的特征特性[10]。在生长中后期阶段，清理病叶、老叶并带出田块集中处理，防止病菌的扩散和蔓延。

5.1 鉴定时期

花期和成熟期是品种特征特性表现最明显的时期，也是鉴定的最佳时期，在花期或成熟期集中组织专家鉴定。

5.2 鉴定程序

5.2.1 初步筛查 鉴定专家根据《农作物种子质量监督抽查管理办法》《农作物种子检验规程 真实性和品种纯度鉴定》（GB/T 3543.5—1996）等规定，按照科学、公正、公平的原则，对田间生长情况进行整体巡检，确保符合鉴定要求后，分组开展初步筛查。对所有样品的种植小区，仔细观察本品种植株和非本品种植株（包括自交株、非典型株）的主要特征，并对其进行筛查鉴定，对初步确认为非本品种的植株进行标记并计数。初步筛查鉴定结果填写在《品种纯度田间种植鉴定原始记载表》中，对实测值＋容许误差＜标准值的，列为初步筛查疑似不合格样品。

5.2.2 复查不合格样品 对照品种纯度判断规则，对初步筛查结果进行判定，将预期可能不合格的种子样品列为复查对象。所有鉴定专家组成复核组，对疑似不合格样品进行复查并计数。若复查结果与初筛结果无显著差异，以复查结果作为最终鉴定结果，复查专家组负责对最终确定的非本品种植株予以明显标记。若复查结果与初筛结果差异显著，报鉴定组织者进行会商后确定检查方案再进行鉴定，最终结果以末次鉴定为准。

5.2.3 鉴定结果的计算与判定 根据《农作物种 子标 签通 则》（GB 20464—2006）和《农作物种子质量标准》（GB 4404.1—2008）的规定，按照种子标签标注值和国家种子质量标准规定值就高不就低的原则，对田间小区种植鉴定计算出的品种纯度值逐一进行判定，判定采用规定的容许误差。鉴定严格按照GB/T 3543.5—1995 执行，逐行逐株进行鉴别，记录调查品种总株数、变异株数。品种纯度结果以百分率表示。计算公式：

品种纯度=［（本品种总株数-变异株数）/本品种总株数］×100%

式中，T为容许误差，p为表格中纯度标准值，q=100-p，N为鉴定株数。

5.2.4 结果填报与汇总 将计算数值和判定结果填入品种纯度田间小区种植鉴定记载表，并根据各检验机构分工对鉴定结果进行分类汇总。根据原始记载表填写纯度鉴定结果汇总表和鉴定意见，结果汇总表及鉴定意见由所有鉴定专家签字。对不合格样品每个样品单独填写《品种纯度田间种植鉴定原始记载表》，并由初次鉴定专家及记录人在初次鉴定结果栏鉴定人处签字。根据初步筛查和复核结果，填写《品种纯度田间种植鉴定结果汇总表》，鉴定地点填写详细至村，所有复核专家在复核结果栏鉴定人处签字。参与鉴定的所有专家及工作人员在《品种纯度田间种植鉴定签到表》上签到。

5.2.5 档案资料管理 田间种植鉴定结果是农业行政管理部门行使行政管理职责，进行种子执法的重要依据，需强化保密原则和可追溯原则。在田间鉴定期间和鉴定结果未正式公布前，不得事先转换种植编号，不得查询样品所属企业等相关信息，应对相关事宜予以保密，所有人员禁止以任何形式向外透露鉴定结果的相关信息。建立生产档案及田间现场鉴定档案，生产档案应实事求是记录品种的田间管理事项、农事、气象、病虫害发生等情况，田间现场鉴定档案应记录好品种总株数、变异株数。做好数据整理汇总，形成鉴定意见，鉴定结束后，将品种纯度田间种植鉴定签到表、品种纯度田间种植鉴定意见、品种纯度田间种植鉴定结果汇总表、品种纯度田间种植鉴定原始记载表等田间小区种植鉴定原始记录和生产记录保存好，保证田间鉴定结果、相关记载信息均能溯源到原始样品，保证可追溯。

6.1 结果通知

根据种植编号信息转换成样品登记号，确认纯度不合格的种子样品和企业信息，在现场将鉴定结果电话通知被抽查对象，被抽查对象不是该品种的种子生产经营者的，同时通知种子生产经营者。在鉴定结束后，将结果通知单书面材料按程序快递给企业，并做好相应的收发记录。

6.2 异议处理

不合格样品所属企业提出异议，要求到现场查看结果的，检验机构应告知其要在3日内到达鉴定现场，跟踪处理并根据不合格样品的鉴定意见做好释疑工作。田间小区种植鉴定承担单位负责有异议企业查看现场的接洽工作，并确保鉴定小区在鉴定异议期结束前保持完好，不被破坏。

科学规范的种植方法与合理的管理技术是保障种子纯度种植鉴定结果准确性的关键。油菜小区种植鉴定法在花期同时观测多个性状，可直观地判定品种真伪。实施油菜种子纯度田间小区种植鉴定试验必须把握好每个关键环节，确保准确到位，保障鉴定结果真实可靠。对鉴定不合格的样品批次进行封存，有效防止假冒伪劣油菜种子在市场上流通，防止低纯度的油菜种子对油菜生产造成不良影响，保障秋冬季油菜用种安全，切实保障农民切身利益，为油菜产业持续稳定健康发展提供保障。