CCK、Cx43、GLP-1对2型糖尿病胃轻瘫患者胃排空的预测价值及其相关性分析

张雪莲，王 博，张玄娥，张晓燕，顾 蕾，周尊海

(同济大学附属杨浦医院内分泌科,上海 200090)

2型糖尿病是一种慢性代谢疾病，胃轻瘫是该病的常见并发症，是糖尿病患者胃动力障碍、胃排空延迟引起的，主要致病因素有胃肠道植物神经病变、胃肠激素分泌紊乱、高血糖等，主要表现为恶心、嗳气、上腹痛、体重下降等[1-2]。该疾病病程较长，若长期控制不佳，易引起心脏和大血管的微血管病变，威胁患者健康[3]。2型糖尿病功能性消化不良是由于糖尿病神经损伤影响了胃肠道系统，以腹胀、腹泻、便秘为主要临床表现，可持续反复发作[4]。胆囊收缩素(cholecystokinin，CCK)是由小肠黏膜细胞释放，可刺激胰腺酶的合成与释放；
间隙连接蛋白43(connexin 43，Cx43)是肠道功能重要的连接蛋白，具有促进平滑肌细胞兴奋性的功效；
胰高血糖素样肽1(glucagon-like peptide-1，GLP-1)可抑制胃酸分泌，减缓胃内容物的排空[5-6]。有研究显示，CCK、Cx43、GLP-1在2型糖尿病胃轻瘫疾病中表达异常，但有关三者相关性的研究相对较少[7]。本研究通过检测CCK、Cx43、GLP-1表达情况，探究CCK、Cx43、GLP-1在2型糖尿病胃轻瘫中的表达及与胃排空的相关性。报告如下。

1.1一般资料 选择2019年12月—2021年3月我院收治的2型糖尿病胃功能异常患者127例，其中功能性消化不良49例设为消化不良组，糖尿病胃轻瘫患者78例设为胃轻瘫组，另选择同期体检的胃功能正常的健康者50例设为对照组，所有受试对象均进行胃半排空时间测定。经检查所有受试对象胃肠道均未出现器质性的病变，且结合辅助检查，化验室检查排除肝胆胰疾病，结缔组织，肾病。胃轻瘫患者伴有周围神经系统病变，而且没有反酸或者是特殊的疼痛感。3组性别、年龄、体重指数比较差异无统计学意义(P>0.05)；
消化不良组与胃轻瘫组并发高血压、高血脂比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 3组一般资料比较Table 1 Comparison of general data among three groups

本研究经医院医学伦理委员会审批通过。

纳入标准：①所有患者均符合《中国2型糖尿病防治指南》2020版中相关诊断标准[8]，确诊为2型糖尿病胃功能异常；
②意识清楚;③自愿参与本研究。排除标准：①患有消化道疾病；
②患有精神类疾病；
③患有恶性肿瘤；
④2年内接受过腹部手术。

1.2方法

1.2.1CCK、Cx43、GLP-1水平检测 所有受试对象入院次日7∶00采集空腹静脉血5 mL，恒温静置1 h，离心处理(转速3 000 r/min、离心半径10 cm)，-60 ℃备用。所有操作流程均按照酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒说明书操作，试剂盒购自瑞普利金(上海)生物科技有限公司。待测血清稀释，酶标板每孔添加150 μL稀释后的待测血清，胶纸封孔，恒温静置40 min，弃反应液，洗涤液注满，浸泡1 min,洗涤5次，甩干，添加生物素化抗体，胶纸封孔，恒温静置30 min，弃反应液，重复洗涤步骤，添加酶标抗体，胶纸封孔，恒温静置30 min，弃反应液，添加显色剂，避光显色，添加终止液，震荡均匀，在全自动酶标仪(上海添时科学仪器有限公司，型号：HBS-1096B)450 nm波长处，检测CCK、Cx43、GLP-1水平。

1.2.2放射性核素法检测固体胃排空功能 所有受试对象在参与研究期间,服用二甲双胍片、格列美脲片控制血糖，二甲双胍片(浙江国光生物制药有限公司，国药准字H33020526)0.5 g/次，1次/d，随餐服用；
格列美脲片(北京北陆药业股份有限公司，国药准字H20010567)2 mg/次，1次/d，餐前半小时服用。检测前1 d晚餐后禁食10 h,检测当日所有受试对象均于7∶30食用早餐，将由核素99Tc-DTPA标记的鸡蛋煎至固体状,每例受试对象均食用2个,使用核素扫描仪(安徽中科中佳科学仪器有限公司)对受试对象胃部进行显像处理，在进食结束后10、20、30 min分别采集图像,随后每30 min采集图像,连续观察2 h，胃排空延迟患者可适当向后延迟,每30 min采集图像,至胃内放射性指数值下降一半以下，观察期间所有受试对象禁食禁水，ROI技术处理图像,计算胃半排空时间。

1.3统计学方法 应用SPSS 26.0统计软件处理数据。计量资料比较采用单因素方差分析和SNK-q检验；
计数资料比较采用χ2检验；
绘制ROC曲线，分析CCK、Cx43、GLP-1对2型糖尿病胃排空的预测价值；
相关性采用Pearson相关性分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2.13组血清CCK、Cx43、GLP-1水平比较 消化不良组和胃轻瘫组CCK、Cx43水平低于对照组，GLP-1水平高于对照组，胃轻瘫组CCK、Cx43水平低于消化不良组，GLP-1水平高于消化不良组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 3组血清CCK、Cx43、GLP-1水平比较Table 2 Comparison of serum CCK, Cx43 and GLP-1 levels among three groups

2.23组胃半排空时间比较 消化不良组和胃轻瘫组胃半排空时间长于对照组，胃轻瘫组胃半排空时间长于消化不良组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 3组胃半排空时间比较Table 3 Comparison of gastric half-emptying time among three groups

2.3CCK、Cx43、GLP-1对2型糖尿病胃排空的预测价值 CCK、Cx43、GLP-1联合检测对2型糖尿病胃轻瘫中的预测价值明显优于单一诊断。见表4，图1。

图1 CCK、Cx43、GLP-1预测2型糖尿病胃排空的ROC曲线图

表4 CCK、Cx43、GLP-1对2型糖尿病胃排空的预测价值Table 4 Predictive value of CCK, Cx43 and GLP-1 in gastric emptying in type 2 diabetes mellitus

2.4CCK、Cx43、GLP-1的相关性分析 CCK、Cx43呈正相关(r=0.482；
P<0.001)；
CCK、GLP-1呈负相关(r=-0.356；
P<0.001)；
Cx43、GLP-1呈负相关(r=-0.619；
P<0.001)。见图2。

图2 CCK、Cx43、GLP-1的相关性分析

糖尿病是一种内分泌代谢类疾病，其中2型糖尿病发病例数较多，胃轻瘫是该病常见的并发症，主要表现为腹痛、口干、呕吐等，老年人由于胃肠功能下降，是糖尿病的高发人群[9-10]。糖尿病发病机制主要与胰岛素抵抗、胰岛素分泌不足相关[11]。长期高血糖、微量元素缺乏等导致胰岛细胞损伤，产生胰岛素抵抗；
影响胰岛素分泌的主要因素有自身免疫、长期胰岛素抵抗等[12]。

本研究结果显示，2型糖尿病胃轻瘫患者血清CCK水平较低。CCK是一种肽类激素，由氨基酸组成，可调节协调胃肠活动，具有刺激胆囊收缩、兴奋胰酶分泌的作用[13]。据有关调查发现，2型糖尿病胃轻瘫患者的CCK水平降低，且随着病情加重CCK水平随之下降，且胃半排空与CCK水平呈负相关[14]。有学者研究显示，糖尿病胃轻瘫患者的CCK水平降低，可能是CCK水平降低可抑制胃肠激素的分泌，从而抑制胃排空[15]。本研究结果显示，胃轻瘫组胃半排空时间延长，可能是CCK水平降低抑制了胃排空。

本研究结果显示，2型糖尿病胃轻瘫患者血清中Cx43水平较低。Cx43是重要的间隙连接蛋白，可通过细胞间隙进行信息和能量的交换，在信息调控与传导等生理过程有重要作用[16-17]。有研究显示，糖尿病胃轻瘫大鼠酪氨酸激酶受体、Cx43表达明显下降，经红芪多糖干预后，酪氨酸激酶受体、Cx43表达上升，胃排空时间减少，可能与红芪多糖可减轻胰岛素抵抗、促进胃肠功能修复相关[18]。Cx43在2型糖尿病胃轻瘫患者血清中异常表达，可能与胰岛素分泌、胰岛素抵抗相关。

本研究结果显示，2型糖尿病胃轻瘫患者血清中GLP-1水平较高。GLP-1由回肠内分泌细胞分泌的一种脑肠肽，可作为2型糖尿病药物的作用靶点[19-20]。有专家调查发现，2型糖尿病胃轻瘫的发生发展常伴随着GLP-1水平异常，且胃半排空与GLP-1水平呈正相关，因此调节机体GLP-1水平至关重要[21]。本研究结果显示，胃轻瘫组胃半排空时间延长，可能是GLP-1在胰岛素抵抗中有重要作用，可抑制胰高血糖素及胃酸分泌、抑制食欲、延迟胃排空。

本研究结果显示，CCK、Cx43、GLP-1在2型糖尿病胃轻瘫患者中表达异常，CCK、Cx43呈正相关；
CCK、GLP-1呈负相关；
Cx43、GLP-1呈负相关，三者联合检测诊断2型糖尿病胃轻瘫价值较高，可弥补单一诊断的不足。但由于本研究选取病例数较少，有一定的局限性，在下一步研究中可加大样本量，以证实CCK、Cx43、GLP-1在2型糖尿病胃轻瘫中的联合诊断价值。

综上所述，2型糖尿病胃轻瘫患者CCK、Cx43水平降低，GLP-1水平升高，胃半排空时间延长，三者共同参与胃轻瘫的发生，有望成为诊断2型糖尿病胃轻瘫的血清检测指标。