2019—2020年口服脊髓灰质炎减毒活疫苗批签发汇总及质量分析

刘悦越，英志芳，赵荣荣，范行良，王剑锋，李长贵

中国食品药品检定研究院，北京 102629

脊髓灰质炎（简称脊灰）是由脊灰病毒感染引起的急性传染病，严重者可瘫痪甚至死亡，全球免疫接种疫苗是消灭脊灰的唯一解决方案［1］。几十年来，口服脊灰减毒活疫苗（oral polio vaccine，OPV）一直是免疫接种的支柱，是根除野生型脊灰病毒工作的重要组成部分。OPV能够在胃肠道中复制，诱导肠道黏膜免疫，并在个体随后接触活病毒时减少病毒脱落，有效建立免疫屏障，且具有产能高、价格便宜、使用方便等优点［2］。我国自上世纪60年代开始使用OPV，其在消灭脊灰的进程中发挥了重要作用。我国已于2000年7月证实自1994年10月起无本土野病毒引起的脊灰病例［3］。世界卫生组织（World Health Organization，WHO）基于全球消灭Ⅱ型脊灰野毒株，且Ⅱ型OPV可能回复突变引起传染性循环疫苗衍生脊灰病毒（circulating vaccine-derived poliovirus，cVDPV）的问题，建议全球停止使用三价OPV（trivalent OPV，tOPV），转换为含Ⅰ型和Ⅲ型减毒株的二价OPV（bivalent OPV，bOPV）及灭活脊灰疫苗（inactivated poliomyelitis vaccine，IPV）联合使用［4］。我国已于2016年5月完成转换工作。

目前获得批准上市的bOPV为口服液体疫苗和糖丸两种剂型，市场上使用的主要为口服液体疫苗。依据《中国药典》三部（2015版）及企业注册标准，中国食品药品检定研究院（简称中检院）对企业质检记录摘要进行审核，并对每批疫苗进行部分关键项目的检定。本文对2016—2020年用于国内计划免疫的bOPV的批签发及质量情况进行分析，现将结果报道如下。

2016—2020年中检院共签发538批，4.46亿剂bOPV用于我国计划免疫接种，见表1。

表1 2016—2020年bOPV的批签发量

在批签发过程中，所有批次bOPV均进行资料审核及无菌检查，另随机抽取一定比例的样品进行鉴别试验、总病毒滴度、Ⅰ型和Ⅲ型病毒滴度等项目检测。2016—2020签发的538批bOPV检定结果均符合规定。

2.1 鉴别试验bOPV的鉴别试验质量标准为病毒型别应准确无误，即疫苗经Ⅰ型和Ⅲ型混合脊灰病毒特异性免疫血清中和后，接种至敏感细胞培养，细胞应无病变出现。2016—2020年签发的538批bOPV检定结果均符合规定。

2.2 病毒滴度 病毒滴度是显示疫苗中活病毒含量的有效性指标。质量标准规定每剂疫苗总病毒滴度应不低于6.12 lgCCID50，其中Ⅰ型应不低于6.0 lgCCID50，Ⅲ型应不低于5.5 lgCCID50。2016—2020年538批bOPV企业自检结果与中检院检测结果的一致性较好，除2020年Ⅲ型病毒滴度均值相差4.15%外，其他型均值差异均＜2%。同一型别不同年度的病毒滴度较为稳定，其中总病毒滴度中检院检测结果均值为6.68～6.77 lgCCID50／剂，Ⅰ型和Ⅲ型病毒滴度中检院检测结果均值分别为6.54～6.64和5.96～6.26 lgCCID50／剂。见图1。

图1 bOPV各年度总病毒滴度以及Ⅰ型和Ⅲ型病毒滴度均值

以2018和2020年的疫苗成品病毒滴度为例进行趋势分析，结果表明，不同批次间疫苗均一性较好。病毒总滴度中检院检测结果为6.42～6.92 lgCCID50／剂，均在±3倍标准差（standard de-viation，SD）范围内，除3批低于均值-2SD0.01外，其他均在±2SD范围。Ⅰ型和Ⅲ型病毒滴度中检院检测结果分别为6.30～6.80和5.80～6.42 lgCCID50／剂，均在±2SD范围内。

2.3 抗生素残留 采用酶联免疫吸附法检测疫苗成品中庆大霉素残留量，结果显示，2016—2020年538批bOPV均≤12 ng／剂，低于质量标准50 ng／剂。其中10～12 ng／剂占2.4%，1～9 ng／剂占59.9%，＜1 ng／剂占37.7%。

图2 2018—2020年bOPV病毒滴度趋势分析

续图2 2018—2020年bOPV病毒滴度趋势分析

自1988年世界卫生大会通过根除脊灰的决议以来，除阿富汗和巴基斯坦外，所有国家均中断了野生脊灰病毒的传播［5］，尤其是Ⅱ型野病毒，自1999年以来未发现其引起的脊灰病例。OPV是推进脊灰消除进程的关键工具，但可能引起cVDPV，监测数据表明，超过90%的cVDPV病例由cVDPV2引起［6］。为消除cVDPV2带来的风险，WHO建议将仅包含Ⅰ型和Ⅲ型脊灰减毒株的bOPV全球同步替代所有tOPV。全球155个使用tOPV的国家／地区均已完成从tOPV至bOPV的转换［7］。

我国生产的bOPV基本延续tOPV的生产工艺，临床研究表明，bOPV具有良好的安全性和免疫原性［8］。2016—2018年bOPV每年的签发量均在1亿剂次以上，保障了我国转换后的计划免疫用苗。2019年随着国产IPV供应日趋充足，且我国逐渐将“1剂IPV+3剂bOPV”的免疫策略替代为“2剂IPV+2剂bOPV”，因此，对bOPV的需求有所下降，从而批签发量自2019年相应减少。

根据《中国药典》三部（2015版）及企业注册标准要求，病毒滴度检测采用微量细胞病变法。由于脊灰病毒在敏感细胞系培养可出现细胞病变，引起致细胞病变效应，以不同稀释度病毒接种细胞，出现50%细胞病变的最高病毒稀释度即为病毒滴度［9］。本文分析结果表明，企业自检结果与中检院检测结果均符合规定，各年度波动较小，保证了疫苗的有效性和生产稳定性。

疫苗生产过程中，由于菌毒种引入和生产工艺要求，可能会带入一定的抗生素，且后续工艺很难将其全部清除。为防止抗生素在易敏人群中引起过敏反应，《中国药典》三部（2015版）对疫苗中抗生物残留有严格规定，脊灰疫苗的标准为不高于50 ng／剂。批签发检测结果显示，bOPV抗生素含量明显低于该标准限值，符合要求。

综上所述，将2016—2018年bOPV的批签发情况结合企业和中检院的数据分析，表明通过实施批签发，可较好地控制疫苗产品质量，保障上市疫苗的安全性和有效性。