胰炎消方对重症急性胰腺炎患者miR21-3p、IL-18及肾功能相关指标的影响*

张 琦 田朝霞 佟明铭 李 坤 陶 红

（河北省秦皇岛市中医医院，河北 秦皇岛 066000）

急性胰腺炎（SAP）是一种高分解代谢性消化系统危重疾病，多数患者发病急，病情进展快，可发生胰腺组织广泛出血、坏死，并伴有多器官功能损伤［1］。肾功能损伤是SAP常见并发症之一，研究发现约10%～42%的SAP患者会发生急性肾功能损伤，增加患者的病死率［2］。SAP并发肾功能损伤的发生与炎症介质、毒素释放、低血容量等多种因素有关，积极控制或减轻SAP病情，预防肾功能损伤有利于降低病死率，改善预后［3-4］。现代医学对于SAP的治疗主要以静脉补液、胃肠减压、抑制胰酶分泌、纠正水/电解质失衡等，但部分患者病情难以控制，总体疗效并不十分理想［5］。中医学认为SAP属“腹痛”“胰瘅”“脾瘅”等范畴［6］，与脾胃、肝胆等脏腑有关，脏腑阴阳失调，功能紊乱引发湿热内蕴、瘀热互结是其主要病机，中医治疗应以清腑泻热、活血化瘀为根本大法［7-8］。胰炎消方是本院治疗胰腺炎的经验方，具有清热利湿、活血化瘀的功效，契合SAP的中医病机。本研究观察胰炎消方对SAP患者微小核核酸-21-3p（miR-21-3p）、白细胞介素-18（IL-18）及肾功能相关指标的影响，以期进一步提高SAP的治疗效果。现报告如下。

1.1 病例选择 所选病例西医诊断标准参照文献［9］制定；
中医诊断标准参照文献［10］制定。纳入标准：符合上述诊断标准；
中医辨证为瘀热，分别由2位高年资主治中医师单独进行中医辨证，意见不一致时经协商取得一致意见；
年龄＞25岁，＜65岁；
首次发病，发病后24 h内入院接受治疗；
患者及家属均知情同意，并自愿参与。排除标准：合并需手术治疗的严重并发症者；
既往曾有急性或慢性胰腺炎病史者；
心肝肾功能障碍、免疫功能异常、恶性肿瘤、血液病、精神系统疾病者；
长期应用糖皮质激素者；
病情危重，存在生命危险者；
过敏体质者；
哺乳、妊娠的女性患者。

1.2 临床资料 选取2021年1月至2022年3月期间在本院接受治疗的SAP患者90例。按照随机数字表法分为治疗组和对照组，每组各45例。两组患者临床资料差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 两组基线资料比较

1.3 治疗方法 对照组予以西医常规［11］治疗，患者绝对卧床，持续胃肠减压，营养支持，维持水/电解质酸碱平衡，并予以静脉补液，抑制胰酶分泌、抗生素等治疗，乌司他丁（广东天普生化医药股份有限公司生产，国药准字H19990133）10万U溶入5%葡萄糖注射液静脉滴注，每日3次，之后随症状缓解而逐渐减量；
埃索美拉唑钠注射液（阿斯利康制药有限公司，国药准字J20120035）溶入0.9%氯化钠注射液250 mL静脉滴注，每次40 mg，每日2次。治疗组在对照组西医治疗上予以中药胰炎方消治疗，药物组成：黄芪30 g，鸡矢藤30 g，柴胡15 g，枳实 15 g，栀子 10 g，木香 10 g，黄芩10 g，蒲公英30 g，半边莲30 g，金钱草45 g，大黄15 g，赤芍15 g，丹参15 g，延胡索15 g，桃仁10 g，厚朴10 g。上述药材均购自本院中药房，并由煎药室统一煎煮，真空包装，每剂煎取药液300 mL，分3次口服或胃管注入，两组疗程均为7 d。

1.4 观察指标 比较两组腹痛、腹胀、发热等主要症状的缓解时间和肠鸣音恢复时间；
比较两组治疗前后全身炎症反应综合征（SIRS）评分、改良Marshall评分、血淀粉酶、尿淀粉酶含量及血清肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、胱抑素C（CysC）、miR-21-3p、IL-18含量、24 h尿量。SIRS评分、改良Marshall评分分别参照SIRS评分表、改良Marshall评分评价表制定。实验室检查：入院后及疗程结束后记录两组24 h尿量，采集两组清晨空腹静脉血和中段尿，对血液标本高速离心后分离血清，化学发光法测定SCr、BUN、CysC、血淀粉酶含量，对尿液标本进行尿淀粉酶含量测定，仪器应用德国迈瑞BS-280型全自动生化分析仪。酶联免疫吸附试验测定血清IL-18水平，试剂盒由美国eBioscience公司提供。实时荧光定量PCR法测定血清miR-21-3p含量，仪器应用ABI7500型荧光定量PCR仪，TRIzol法提取血清总RNA，经鉴定浓度和纯度均合格，以RNA为模板，应用逆转录试剂盒将其反转录为cDNA，以cDNA为模板进行PCR扩增，引物序列由invitrogen（上海）公司合成。扩增条件参照试剂盒说明书，95℃下进行10 min预变性，之后95℃下变性15 s，60℃情况下退火60 s，共进行45个循环，以 U6 作为内参基因，2-ΔΔCt法计算所测定miR-21-3p的相对值。

1.5 统计学处理 应用SPSS22.0统计软件。计量资料以（）表示，比较经t检验；
计数资料以百分率（%）表示，比较经χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2.1 两组治疗前后SIRS评分、改良Marshall评分比较 见表2。治疗后两组SIRS评分、改良Marshall评分均较治疗前显著降低（P＜0.01）；
两组比较，治疗组SIRS评分、改良Marshall评分均低于对照组（P＜0.01）。

表2 两组治疗前后SIRS评分、改良Marshall评分比较（分，±s）

表2 两组治疗前后SIRS评分、改良Marshall评分比较（分，±s）

注：与本组治疗前比较，*P＜0.01；
与对照组治疗后比较，△P＜0.01。下同。

组别治疗组（n=45）对照组（n=45）时间治疗前治疗后治疗前治疗后SIRS 2.17±0.81 0.43±0.16*△2.14±0.78 0.92±0.32*改良Marshall 5.13±1.71 0.65±0.21*△5.09±1.73 1.49±0.48*

2.2 两组治疗前后肾功能相关指标及血、尿淀粉酶比较 见表3。治疗后两组SCr、BUN、CysC、血淀粉酶、尿淀粉酶均显著降低（P＜0.01），24 h尿量增加（P＜0.01）；
两组比较，治疗组各项指标改善均优于对照组（P＜0.01）。

表3 两组治疗前后SCr、BUN、CysC及血淀粉酶、尿淀粉酶比较（±s）

表3 两组治疗前后SCr、BUN、CysC及血淀粉酶、尿淀粉酶比较（±s）

组别治疗组（n=45）对照组（n=45）时间治疗前治疗后治疗前治疗后SCr（μmol/L）171.50±30.66 86.39±16.10*△168.83±32.17 126.54±23.09*BUN（mmol/L）7.73±2.04 5.45±1.18*△7.65±1.98 6.64±1.24*CysC（μmol/L）1.37±0.31 0.94±0.21*△1.34±0.28 1.08±0.23*24 h尿量（L）1.03±0.27 1.56±0.35*△1.05±0.26 1.28±0.30*血淀粉酶（U/L）484.64±123.18 53.31±10.59*△480.87±114.75 90.76±14.62*尿淀粉酶（U/L）696.46±163.58 70.54±9.91*△690.83±157.81 125.92±17.33*

2.3 两组治疗前后血清miR-21-3p、IL-18含量比较 见表4。与治疗前比较，治疗后两组血清miR-21-3p、IL-18含量均降低（P＜0.01）；
两组比较，治疗组改善程度优于对照组（P＜0.01）。

表4 两组治疗前后血清miR-21-3p、IL-18含量比较（±s）

表4 两组治疗前后血清miR-21-3p、IL-18含量比较（±s）

组别治疗组（n=45）对照组（n=45）时间治疗前治疗后治疗前治疗后miR-21-3p 2.17±0.36 0.95±0.23*△2.14±0.39 1.27±0.25*IL-18（pg/mL）185.24±21.36 69.48±14.73*△181.62±25.49 97.08±16.81*

2.4 两组症状缓解时间比较 见表5。结果治疗组腹痛、腹胀、发热缓解时间及肠鸣音恢复时间均少于对照组（P＜0.01）。

表5 两组主要症状缓解时间和肠鸣音恢复时间比较（d，±s）

表5 两组主要症状缓解时间和肠鸣音恢复时间比较（d，±s）

注：与对照组比较，△P＜0.01。

组别治疗组对照组n 45 45腹痛缓解时间4.23±1.33△5.79±1.51腹胀缓解时间5.08±1.59△6.36±1.97发热缓解时间3.80±1.21△4.58±1.47肠鸣音恢复时间5.55±1.78△6.78±2.07

中医理论认为SAP的病位在脾，与肝、胆、胃等诸多脏腑密切相关，患者素体肥胖，饮食不节，嗜酒过度，复感六淫外邪，伤及脾胃，致脾失健运，水湿内停，郁而化热，湿热蕴结中焦，久而生瘀，加之患者情志不畅，肝疏泄失职，气机不畅，脏腑功能紊乱，湿热瘀毒阻滞中焦，致腑气不通而发为“腹痛”“胰瘅”［12］，故清热利湿解毒，活血化瘀应为本病主要治法。胰炎消组方由黄芪、鸡矢藤、金钱草等16味中药组成。其中蒲公英、半边莲、黄芩、栀子是清热解毒常用药，配伍金钱草旨在清热利湿；
鸡矢藤可祛风除湿；
大黄、厚朴、枳实可燥湿下气，破气消积，凉血祛瘀解毒；
柴胡疏肝理气；
木香可行气止痛，健脾消食；
黄芪可健脾益气，托毒排脓。桃仁、赤芍和丹参可活血祛瘀，凉血清热；
延胡索可行气活血。全方配伍，共奏清热利湿解毒、活血化瘀之功，对“腹痛”“胰瘅”标本兼治。本研究发现治疗后治疗组SIRS评分、改良Marshall评分均低于对照组，腹痛、腹胀、发热缓解时间及肠鸣音恢复时间均少于对照组，血、尿淀粉酶含量均低于对照组，表明在西医治疗基础上，应用中药胰炎消方有利于缓解症状，改善机体全身炎症反应，保护器官功能，降低血尿淀粉酶含量，治疗SAP效果显著。

SAP是一种快速发展的特殊类型的急性胰腺炎症性疾病，常发生多器官功能损伤［13］。肾功能损伤是本病常见并发症之一，并发肾功能损伤的SAP患者死亡风险也会显著增加［14］。肾脏血运丰富，SAP发生时释放的大量炎症因子随血液循环到达肾脏，是产生肾功能损伤的重要因素；
另外，低有效循环血量所致肾脏灌注不足、微循环障碍及缺血缺氧等也是导致肾功能损伤的重要因素［15］。BUN是蛋白质代谢的终末产物，SCr是肌肉组织的代谢产物；
两种蛋白主要在肾脏排泄，肾功能下降时会导致SCr、BUN排泄减少，并蓄积于体内，血液含量会明显升高；
CysC是一种非糖基化的小分子蛋白，主要分布于细胞外液，对内源性半胱氨酸蛋白酶的活性有较好的抑制作用，并在细胞内外蛋白质的水解调控方面发挥重要作用。人体内各组织CysC含量相对稳定，不受性别、年龄、肌肉质量等其他因素的影响，血清CysC由肾小球滤过率决定，是评价肾小球滤过率的特异性指标［16］。miRNA是广泛存在于真核生物中的内源性非编码RNA，可通过调控编码区RNA影响SAP，部分miRNA可作为疗效评价和预后评估的生物标志物［17］。miR-21-3p是一类发现时间较早的miRNA，主要由受损时肾组织合成，参与调控肾小管上皮细胞的凋亡。当发生肾组织损伤时，机体会反应性刺激受损的肾组织合成大量miR-21-3p，以促进肾小管上皮细胞增殖，减轻肾组织缺陷在关注损伤，从而对受损的肾组织发挥保护作用［18］。IL-18是近年来新发现的一种致炎因子，主要由淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞等细胞分泌，也是IL-1家族新成员，在组织器官的缺血性损伤和急性炎症中具有促炎作用；
SAP患者肾组织受到损伤时，近端肾小管呈现急性炎症和缺血性损伤，IL-18会大量分泌，其血液含量会大幅升高。研究表明，IL-18是肾组织中性粒细胞浸润和缺血再灌注损伤的重要中介物之一，可作为肾功能损伤早期预测的生物标志物［19-20］。本研究发现治疗后治疗组肾功能指标SCr、BUN、CysC均低于对照组，血清miR-21-3p、IL-18水平也显著低于对照组，表明胰炎消方应用于SAP的治疗，有利于保护肾脏功能，防止肾功能损伤。

综上所述，在西医治疗基础上应用中药胰炎消方，有利于快速缓解症状，改善全身炎症反应，降低血尿淀粉酶含量，下调血清miR21-3p、IL-18水平，保护肾脏功能，防止肾功能损伤，治疗SAP效果显著。但胰炎消方辅助治疗SAP的疗效及具体作用靶点尚需要进一步验证和探讨。