大鼠骨髓间充质干细胞 ＶＥＧＦ基因体外转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究
来源：选调生 发布时间：2019-03-30 点击：
[摘要]目的：探讨脂质体介导血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCS)应用于基因治疗的可行性、安全性。方法：体外分离、培养、鉴定MSCs，PcDNA3．1(-)／VEGF165质粒转染MSCs，转染后用免疫荧光和ELISA检测MSCs表达VEGF蛋白的情况，MTT检测Mscs对VEGF质粒转染的敏感性。 结果：骨髓中分离得到MSCs，流式细胞检测显示MSCs不表达CD34和CD45，但表达CD90。透射电镜观察可见细胞浆中含大量粗面内质网和分泌颗粒。VEGF基因转染MSCs后第5天抗VEGF免疫荧光染色约90％的MSCs呈阳性，ELISA检测结果显示PcDNA3．1(-)／VEGFl65质粒转染组细胞培养上清液中VEGF含量明显高于对照组，并于转染后第5天达到峰值。MTT检测结果显示VEGF质粒转染对Mscs增殖无影响。 结论：MSC可作为VEGF基因转染的靶细胞用于基因治疗。
[关键词]大鼠骨髓间充质干细胞；血管内皮细胞生长因子；基因治疗
[中图分类号]Q813．1 [文献标识码]A [文章编号]1008―6455(2006)09―998―03