现场固相萃取方法快速测定鱼塘水8,种农药

金培海 徐健君 张 亮

（1.云浮市公安局刑侦支队刑科所，广东 云浮527300；
2.珠海市公安局刑警支队，广东 珠海519000；
3.广东省公安厅刑事技术中心，广东 广州510050）

广东省具有良好的地理条件，水产养殖业发达，但鱼塘农药投毒案件时有发生，给养殖户造成巨大的经济损失。由于一般鱼塘面积较大，水体中农药的浓度很低，这就给毒物的提取和检验带来很多困难。本课题采用国产现场固相萃取装置，选择广东省投毒案件常见的8种农药，建立了在鱼塘投毒案件现场农药快速提取方法，实验室采用高效液相三重四极质谱联用仪（LC-MS/MS）进行检测。经实验验证，甲胺磷、甲拌磷、乐果、残杀威、呋喃丹、五氯酚、甲氰菊酯、氯氰菊酯的检出限、线性等指标均满足水体投毒案件的检验要求，本方法可以应用于鱼塘水农药投毒案件的快速检测工作。

1.1 仪器与试剂

爱博能ABN-EXT-01 型水体农药投毒案件现场快速提取装置，固相萃取柱采用Agilent Bond Elut Plexa 和 Agilent Bond Elut PPL 按 上 下顺序串联，用乙醇进行充分活化，以7.0mL/min流速上样，单次提取时间约15min。

Agilent Technologies 1290-6470 三重四极杆液质联用系统，SIGMA®3-18K 高速离心机，氮吹仪BF-2000。

8 种农药标准品（天津阿尔塔），浓度均为1000mg/mL 甲醇或丙酮溶液：甲胺磷、甲拌磷、乐果、残杀威、呋喃丹、五氯酚、甲氰菊酯、氯氰菊酯。实验用乙腈、甲酸、乙酸铵均为质谱纯，乙酸乙酯为分析纯。

1.2 仪器条件

色谱条件：色谱柱EclipsePlus C18（1.8µm，3.0mm×150mm）色谱柱，柱温40℃，进样量1µL，流动相：0.1%甲酸+5mmol/L乙酸铵水溶液（A）-甲醇（B）-梯度洗脱（见表1），流速0.4mL/min。

表1 梯度洗脱条件

质谱条件：采用电喷雾离子源（ESI），Dy⁃namic MRM（正、负）模式分析，9种农药的优化采集参数（见表2）。

表2 8种农药的MRM条件

1.3 样品制备

在空白鱼塘水中添加8 种农药标准品，配制成甲胺磷、乐果、呋喃丹、残杀威浓度为0.1ng/mL，甲拌磷、氯氰菊酯、甲氰菊酯、五氯酚浓度为1ng/mL的待测水样。

1.4 现场水样采集

应用现场快速提取装置采集标准添加的水样。取样结束后，将固相萃取柱取下，两端密封送验。

1.5 实验样品处理

现场提取的固相萃取柱，先脱水干燥，用5mL 乙酸乙酯通过固相萃取柱洗脱，洗脱液在45℃室温下用氮气将洗脱液吹至近干，再用甲醇定容至1000mL备检。

2.1 待测农药及质谱监测离子的选择

根据全省投毒案件毒物统计情况，选择四大类（有机磷、氨基甲酸酯、菊酯、有机氯）常见的8种农药建立LC-MS/MS检测方法。

2.2 线性方程和检出限

在空白鱼塘水中加入8 种农药的系列浓度标准溶液，按1.4和1.5的方法进行样品前处理。在选定的色谱和质谱条件下测定，以目标农药的浓度为横坐标，以定量离子对的峰面积为纵坐标建立标准曲线，得到8 种农药的线性方程、相关系数和检出限，结果（见表3）。所有农药的相关系数都在0.99 以上，线性关系良好，检出限在 0.0001～0.01ng/mL （S/N=3） 范围内。本方法五氯酚、乐果、甲胺磷、呋喃丹的检出限远远低于GB11607—1989《渔业水质标准》规定（该标准规定渔业水质要求：五氯酚钠≤10ng/mL，乐果≤100ng/mL，甲胺磷≤1000ng/mL，呋喃丹£10ng/mL）［1］。

2.3 案列应用

2020 年 7 月 24 日，罗 定市罗 平镇陈 XX 鱼塘养殖的虾大量死亡，办案民警使用爱博能ABN-EXT-01 型装置在现场两处不同的地点提取鱼塘水，两份固相萃取柱密封保存1 天后送检，均检出农药甲氰菊酯成分。

表3 8种农药的线性范围、回归方程和检出限