猪伪狂犬病与猪圆环病毒2型混感的诊疗

薛晓阳，费奕强

（广东省珠海市动物疫病预防控制中心，广东 珠海 519005）

猪伪狂犬病病毒是诱发猪伪狂犬病的病原，断奶仔猪发病率较高，会出现呼吸性障碍、伴有流涕、腹泻症状，甚至会出现神经症状，致死率为30%左右。某猪场发现饲养仔猪出现吸困难、拒绝进食、体温异常升高，且有显著的神经症状，哺乳仔猪的病死率高达95%，保育猪死亡率达到25%左右。这些症状与猪伪狂犬病极其相似，但不同之处在于发病较急，且具有极高的发病率与致死率，免疫后猪也有患病现象，怀疑这是一起由猪伪狂犬病与猪圆环病毒2型病混合引起的流行病，现将诊断及治疗情况报告如下：

某生猪养殖基地的基础母猪数量高达上千头，在2020年11月～2021年1月份期间，该基地的保育猪群体温异常升高，平均高达40℃以上，并且多数猪拒绝进食，同时伴有流口水、呼吸受阻与全身震颤等症状。发病后期许多病猪出现了明显的神经症状，不仅癫痫明显，且伴有侧卧划水症状。哺乳期仔猪患病后大部分会死亡，仅有不足5%的病猪得以生存。保育猪虽死亡率相对较低，但也达到了30%左右，病猪转入生长育肥舍后，有4.5%的猪于30d内死亡。

2.1 剖检变化对病死猪解剖检查发现，病猪肝脏有明显的弥散性坏死点，呈白色，脾脏有部分梗死点，颜色微红，并且病猪扁桃体严重溃疡，肺脏背侧存在针尖样出血点，但数量不多，多数病猪脑部有明显的水肿现象。

2.2 病理组织学变化摘取病猪的病变组织脏器，用中性福尔马林做固定处理后将其制成石蜡切片，用苏木精伊红染色液对石蜡切片染色，再用显微镜观察发现，病猪扁桃体炎性细胞缺失明显，脑部也有明显的非化脓性脑炎病变。病猪肝细胞变性明显，着色均匀性下降，并且窦状隙比正常猪宽，有明显充血，炎性细胞呈浸润状。此外，病猪的肺脏间质也明显变宽。

从病猪中提取肺脏、大脑皮质层、腹股沟淋巴结等病料混合配制匀浆，之后分别进行DNA提取与检测。

3.1 DNA提取与检测DNA提取时，应用的是柱式动物DNAOUT提取试剂盒，严格按照说明书要求实施提取操作。提取出DNA后实施检测，主要检测猪伪狂犬病病毒，除此之外，还应分别进行猪圆环病毒检测与猪链球菌检测。

3.2 RNA提取与检测RNA提取时应用的是柱式动物RNAOUT提取试剂盒，提取RNA后先做反转录，再用其检测聚合酶链反应，检测内容主要是猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪瘟病毒。而后利用25μL反应体系进行聚合酶链反应扩增，此反应体系主要由25μL浓缩10倍的PCR缓冲液、各为2μL的氯化镁与脱氧核糖核苷三磷酸、各为0.2μL的上下游引物与聚合酶、1μ的模板DNA以及16.9μL的双蒸水混合而成。扩增时应根据片段大小调节退火温度及延生时间，并利用1%的琼脂糖凝胶电泳作为扩增结果的观察工具。

3.3 检测结果分析综合DNA及RNA检测结果，发现猪蓝耳病病毒呈阴性，并且病料也未感染猪瘟病毒与猪链球菌，但电泳检查结果可见猪伪狂犬病病毒抗体，在电泳条带188处有明显的猪圆环病毒2型条带，这说明，此次疫情是由猪伪狂犬病与猪圆环病毒2型病混合感染引起的。

4.1 弱小病猪淘汰与隔离消毒发现病猪后，应将所有患病猪分栏隔离饲养，并淘汰部分体质偏弱的病猪，及时对圈舍用烧碱溶液消毒处理。还应将圈舍内病猪的排泄物及垃圾全部清除，之后再做全面的消毒处理，以切断病毒传染途径。同时，应对整个养殖场进行常规消毒，一周消毒2次，可选用酚类消毒剂，猪出栏或转群之后，应对猪舍墙面、地面以及过道等区域进行全面消毒，并要做好饲料槽、饮水槽的消毒处理，消毒药剂应改用2%的火碱溶液。

4.2 疫苗免疫治疗疫苗接种时，先将疫苗在磷酸盐缓冲液中稀释后再接种，利用生理盐水稀释也可，猪群需要接种2次疫苗，第一次免疫接种后28d后再次注射一次伪狂犬病疫苗。保育猪及新生仔猪应注射基因缺失弱毒疫苗，每头猪注射1头份疫苗，30d后再做一次加强免疫。哺乳期的仔猪，21日龄断奶时、无论是否转群，均要接种脱毒疫苗，28d后再做一次加强免疫。后备母猪应提前3个月接种猪伪狂犬病疫苗，妊娠母猪应于生产前30d完成灭活伪狂犬病疫苗注射，注射剂量均为5mL。上述猪群接种疫苗时均采取肌肉注射方法。

4.3 合理调整猪伪狂犬病常规免疫程序为增强免疫效果，需要对常规猪伪狂犬病的免疫程序进行调整，公猪及母猪的普检免疫应设置为每年4次，每3个月进行一次普免。育肥猪2日龄时应采取滴鼻免疫法，两个鼻孔均要做滴鼻。猪在56日龄、100日龄两个阶段均应按照每头1份猪伪狂犬病疫苗的剂量，采用肌肉注射法接种。

4.4 做好继发感染的预防工作为防止继发感染，可在病猪的饲料中加入预防性药物。可加入10%的替米考星、黄芪多糖、磺胺间甲氧嘧啶钠以及电解多维，这四种药物的添加剂量均为1kg/t。也可将继发感染预防药加入到饮水中，主要添加药物可选用板蓝根超微粉剂，也可将阿莫西林拌入病猪的日常饮水中用于预防继发感染。仔猪断奶之前与之后需要在饲料加入适量的抗生素药物，以起到继发感染有效预防的效果。

4.5 药物治疗隔离期间的病猪确定为猪伪狂犬病和猪圆环病毒2型病混合感染后，应结合具体的发病症状、病情严重程度选用适合的治疗药物，除了可采用西药治疗外，也可选用适合的中药药剂控制与治疗病情。

4.5.1 治疗药物选择（1）西药 西药治疗属于常用的治疗方法，可在病猪饲料中加入适量的抗生素药物，如多西环素、高能速补等药物。利用多西环素治疗病猪时，主要是将药物拌入病猪饲料之中，每100kg饲料中所添加药量应为100g。若应用的是高能速补药物，则每100kg饲料中添加药物的剂量应为20g，这两种药物均要连续给药7d。

（2）中药 中药治疗可取石膏、板蓝根、金银花各15g，加入各为10g的穿心莲与连翘、各为5g的甘草、当归及火麻仁，混合后磨成粉末状，将之拌入到饲料当中，按照20g/头的剂量喂食给病猪，同样需要连续给药7d再停药。

（3）辅助药物 混合感染治疗期间，为提高药物疗效，也可将多种维生素加入到病猪饲料中，可在生理水中加入适量的VC，注射于病猪的腹腔之内，对病猪脱水具有良好的预防效果。同时也可注射地塞米松、安纳加等其他药物加快病猪病情的恢复速度。

4.5.2 不同猪群的治疗方法对患有混合感染病症的不同猪群，应喂服适当的药物。母猪饲料应按180g/t添加强力霉素，再分别添加穿心莲粉500g、氟苯尼考300g，以治疗混合感染。仔猪治疗时，也可采取饲料拌药法，但所用药物应为干扰素600g/t、阿莫西林180g/t，且每吨饲料中还需分别加入强力霉素140g、板蓝根粉400g，连续给药12d左右即可停药。若病仔猪的症状较为明显，可采用高免血清治疗方法，应对母猪血清进行采集，而入注射到发病仔猪体内，如此可取得良好的治疗效果。

生猪的多种病原混合感染、继发性感染的发病情况居多，由于疫病较为复杂，难以快速诊断出具体病症，因而生猪疫病控制存在一定难度。流行疫病有效控制的重点是做好原发性与继发性两种病原的精准区分，通过主要及次要病原的判定为有效治疗提供依据。

5.1 区分主要及次要致病病原根据临床症状、剖检变化，推测出了引起本次流行疫病的有5种病原，即猪瘟病毒、链球菌、猪呼吸与繁殖综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒，经病原检测后，确定此次流行是由猪伪狂犬病病毒与猪圆环病毒2型混合感染引起的。然而病原诊断后仍无法确定这两种致病病原的主次，需要通过进一步的病理学分析及组织学观察找出主要致病病原。经组织学观察发现，部分病例有非化脓性脑炎、扁桃体或肝脏坏死现象，且有间质性肺炎病变等症状，与猪伪狂犬病的病理变化相一致。然而猪圆环病毒感染的病理特征是淋巴组织缺失、肺脏间质内淋巴细胞损失，并有巨噬细胞浸润现象，病理检测得出的症状与这些特征并不一致，因此可判定猪圆环病毒应为次要致病病原，主要病原是猪伪狂犬病，因而具体治疗时，应将猪伪狂犬病的预防与治疗作为重点。

5.2 对常规免疫程序的修正

5.2.1 常规免疫后发生猪伪狂犬病的原因本次流行疫病是在注射了猪伪狂犬疫苗的前提下发生的，经剖检及显微镜检病变，结合组织学检测结果发现，此病的病理接近新型伪狂犬病。通过实验室检测发现，猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒两项检测结果均呈阳性。此猪场在常规免疫中还注射了勃林格圆环病毒疫苗，即便聚合酶链式反应检测中发现了猪圆环病毒2型病原，仍然判定猪伪狂犬病病毒是引起此次疫情的关键。这是因为，猪伪狂犬流行毒株存在抗原变异现象，传统疫苗保护效果被削弱，或是抗原变异的同时出现了毒力增强现象，虽然养殖场之前采取了常规免疫措施，但仍然具有一定的猪伪狂犬病发生率。

5.2.2 常规程序修正的效果判定研究发现，现有疫苗对流行毒株感染的保护作用不好，然而通过疫苗接种程序修改，将普免次数增至每年4次，或是将注射剂量增至3份/头，可强化免疫保护效果，能够有效降低猪伪狂犬病的发病率。相关专家对不同免疫策略在猪伪狂犬病防控方面的效果差异展开了研究，验证了增强传统疫苗注射剂量、提高免疫次数对新流行猪伪狂犬病病毒具有一定的防控效果。本案例确定了主要致病病原是猪伪狂犬病病毒，并应用修正后的新免疫程序进行了免疫接种，取得了良好的免疫治疗效果，疫情在短期内得到了控制，同时也说明目前所用疫苗对新型猪伪狂犬病病毒的侵袭仍有一定的保护效果。

5.3 继发感染的预防本案例确定主要致病病原是猪伪狂犬病病毒，而猪圆环病毒2型属于次要病原，由于此养猪场在常规免疫中完成了勃林格圆环病毒疫苗的注射，因而并未修改圆环病毒的免疫方案，然而猪圆环病毒2型病也与猪伪狂犬病一样属于免疫抑制病，存在继发其他感染的可能。为此，需要在治疗过程中同步做好继发感染的预防，主要是预防链球菌、巴氏杆菌以及副猪嗜血杆菌等猪易感的细菌性疾病，通过有效预防药物应用，取得了相对理想的继发感染预防效果。

猪伪狂犬病疫苗免疫接种是有效防控以猪伪狂犬病病毒为主要致病病原的混合感染的重要举措，但疫苗免疫难以将病毒完全清除，猪感染此病毒后病毒会伴随终身。因此，养猪场应做好猪伪狂犬病的日常监测。免疫抗体应每3个月检测一次，猪场猪伪狂犬病检测应每6个月开展一次。同时，应结合群体大小确定采血检查比例，若养猪场基础母猪数量高于300头，采血检查猪不可少于10%，若为300头以下，最低采血检查例数为30例。针对猪伪狂犬病血清抗体检测为阴性但抗体水平不足的猪，应及时补充接种疫苗，阳性或隐性带毒猪应立即淘汰，以有效防控猪伪狂犬病及其他病症混合感染。