QuEChERS结合气相色谱-三重四极杆质谱法检测豇豆中5种有机磷农药残留

◎ 陈嘉仪

（广州华鑫检测技术有限公司，广东 广州 510663）

豇豆是蔷薇目豆科豇豆属植物，是我国比较常见的一种豆荚类蔬菜，因其含有碳水化合物、蛋白质、多种维生素和微量元素，且味道可口、做法丰富多样，深受人们的喜爱。但是作为一种花果同期农作物，豇豆在花期极易遭受病虫害，为了防治病虫害、提高产量，此过程中会使用农药来控制病虫害，而施用的农药又容易对同在收获期的果实造成较大的农药残留超标风险。在使用的农药中，有机磷农药因病虫害防治效果好，一度被应用于豇豆的种植过程中，但由于有机磷农药的高毒性，大部分有机磷农药被禁止在豇豆中使用。甲基异柳磷、水胺硫磷、甲胺磷、三唑磷和氯唑磷等5 种有机磷农药就被明确禁止在豇豆中使用，而在实际工作中，这5 种有机磷农药残留在豇豆中时有检出。目前，QuEChERS 结合气相色谱-三重四极杆质谱检测豇豆中有机磷农药残留的研究不多，GB 23200.113—2018[1]中规定了植物源性食品中208 种农药及其代谢物残留量的气相色谱-质谱联用方法，陈祝军等[2-5]研究了QuEChERS 方法在蔬菜农残检测前处理中的应用，王丽芳等[6-7]研究了蔬菜中有机磷检测的相关方法。本研究采用QuEChERS 结合气相色谱-三重四极杆质谱建立了检测豇豆中甲基异柳磷、水胺硫磷、甲胺磷、三唑磷和氯唑磷的方法。

1.1 仪器与试剂

三重四极杆气质联用仪（Thermo Fisher TSQ 9000，EI 源）；
多管涡旋振荡器（EYELA CM-1000）；
氮气吹干仪（Organomation N-EVAP-12）；
离心机（赫西HR/T20MM）。

甲基异柳磷、水胺硫磷、甲胺磷、三唑磷和氯唑磷农药标准品（纯度均≥97%，德国Dr.Ehrenstorfer）；
丙酮、乙酸乙酯、乙腈（HPLC 级，MREDA）；
硫酸镁、氯化钠（分析纯，广州化学试剂厂）；
柠檬酸钠、柠檬酸二钠（98%，Sigma）；
PSA（40～63 μm，CNW）。

1.2 样品前处理

取300 g 以上豇豆样品，置于匀浆机中匀浆，匀浆后的样品装在样品密封袋或者样品密封瓶中-18 ℃保存。称取经过匀浆制备的样品10 g（精确到0.01 g），置于50 mL 离心管中，加入20 mL 乙腈、6 g 硫酸镁、2 g 氯化钠、2 g 柠檬酸钠和1 g 柠檬酸氢二钠，放入1 颗陶瓷均质子，盖紧离心管盖之后置于涡旋振荡器中剧烈振荡2 min，10 000 r·min-1离心3 min 后，取8 mL上清液于15 mL 离心管中，加入1 g 硫酸镁和200 mg PSA，涡旋振荡1 min，5 000 r·min-1离心3 min，准确取上清液5 mL到15 mL小离心管中，45 ℃氮吹至近干，加入20 μL 的10 μg·mL-1环氧七氯内标溶液，再加入2.00 mL 乙酸乙酯-丙酮（V∶V=1∶1），涡旋振荡1 min，将复溶液过0.45 μm 滤膜后，上机。

1.3 气相色谱质谱条件

1.3.1 色谱条件

色谱柱：DB-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；
载气：高纯氦气（99.999%）；
载气流速：1.2 mL·min-1；
进样量：不分流进样1 μL；
进样口温度：280 ℃；
程序升温：40 ℃保持1.2 min，以24 ℃·min-1升温至180 ℃保持1.5 min，以5 ℃·min-1升温至280 ℃保持4.5 min。

1.3.2 质谱条件

离子源：电子轰击离子源（EI）；
Q2 碰撞气：高纯Ar；
质谱传输线温度：280 ℃；
离子源温度：300 ℃；
电离能量：70 eV；
扫描模式：SRM-time 模式。保留时间和离子对数据见表1。

表1 豇豆中5 种有机磷农药和内标环氧七氯的保留时间及离子对表

2.1 标准曲线线性范围

以空白样品基质提取液配制甲基异柳磷、水胺硫磷、甲胺磷、三唑磷和氯唑磷混合标准溶液系列，标液中各组分浓度均为0 μg·mL-1、0.05 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1、0.20 μg·mL-1、0.50 μg·mL-1和1.00 μg·mL-1。5 种有机磷农药标曲相关系数均在0.99 以上。5 种有机磷及内标环氧七氯的典型谱图见图1。

图1 内标环氧七氯和5 种有机磷农药典型谱图

2.2 定量限

采用本研究所建立的方法，根据空白豇豆样品的平均基线噪声值，按照10 倍信噪比计算5 种有机磷类农药定量限，结果见表2。

2.3 回收率与精密度

在豇豆空白基质中，分别以浓度为0.01 mg·kg-1、0.03 mg·kg-1、0.10 mg·kg-1的5 种有机磷类农药加标，每个水平做6 个平行样品，按前述检测方法进行测定，测得豇豆样品中5 种有机磷农药的加标回收率以及精密度数据见表2。

表2 豇豆中5 种有机磷农药的定量限、回收率和精密度表

本研究建立了豇豆中5 种有机磷类农药的检测方法，试验结果表明该方法具有快速、准确、高效等特点，适用于豇豆中5 种有机磷类农药残留的测定。