洛阳市某三甲医院6,538,例女性HPV,感染及亚型分布特征分析

王莹 王晓川 宋淑亚 吉萍 马丽 王秀丽★

宫颈癌是危害全球女性健康的常见恶性肿瘤之一，在罹患癌症死亡中排名第四［1］。在所有患者中，大约85%的确诊女性和87%死于宫颈癌的女性生活在发展中国家［2-3］。人乳头瘤病毒（Human Papillomavirus，HPV）存在于大多数宫颈癌患者的组织中，持续性高危型HPV 感染被认为是宫颈癌的主要病因［4-5］。HPV 是小型无囊膜的双链DNA 病毒，属于α 乳头瘤病毒科［6］。根据与宫颈癌的相关性，分为高危型HPV（包括HPV16、18、52 等）和低危型HPV（包括HPV6、11、40 等）［7］。在中国的不同地区，由于研究对象、经济条件、生活习惯等的不同，各地区HPV感染率及流行的HPV 主要的基因型分布不同［8-11］。

本研究拟调查在洛阳市某三甲医院行HPV 检测女性中流行的主要HPV 基因型，为该病疫苗接种计划的制定及检测等提供基础数据。

1.1 研究人群和样本

从2019 年1 月至2021 年12 月，在河南省洛阳市某三甲医院，对来门诊参加体检或各科室送检的宫颈拭子样本进行检测，采集样本若不能及时检测，2～8℃保存不超过2 个星期，-20℃保存不超过三个月。纳入标准：①在72 小时内没有使用阴道药物或清洗剂；
②在过去24 小时内无性交；
③未处在经期；
④未使用醋酸或碘液涂抹。根据限制条件，共有6 538 名女性符合标准，中位年龄为（41.14±11.42）岁。本研究经医院伦理委员会批准，所有患者均被告知且签署知情同意书。

1.2 HPV 基因分型

采用商品化HPV 分型检测试剂盒（潮州凯普生物化学有限公司生产的37 种人乳头瘤病毒分型检测试剂盒（PCR+导流杂交法），30 人份/盒），按试剂盒说明书对样品进行HPV 基因分型检测。将收集的样本用商品化试剂盒提取核酸作为模板，然后按试剂盒说明书进行PCR 扩增。将PCR 产物与含有37 个基因型特异性寡核苷酸的基因芯片杂交进行基因分型，并使用HybriMax（中国潮州）分析。该芯片可识别37 种基因型，包括19 种LR-HPV（即6、11、34、40、42、43、44、54、55、57、61、67、69、70、71、72、81、83 和84）和18 种HR-HPV（16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73和82）。

1.3 统计学方法

用SPSS 19.0 统计软件进行数据分析；
计数资料以n（%）表示，行χ2检验，；
以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2.1 HPV 感染型别分布

在入选6 538 名人员中，12.3%的女性HPV检测为阳性，其中9.6%检测为高危型HPV，显著高于4.0%的低危型HPV 感染率，差异有统计学意义（P＜0.01）。不同型别HPV，不同型别高危型HPV 及低危型HPV 的感染率，差异有统计学意义（P均＜0.01）。感染率最高的5 种高危型HPV 基因 型 包 括HPV52、HPV16、HPV58、HPV51 和HPV39。感染率最高的5 种低危型HPV 基因型包括HPV61、HPV54、HPV81（CP8304）、HPV6 和HPV11。见表1。

表1 37 型人乳头状瘤病毒（HPV）在不同年龄段的感染率［n（%）］Table 1 Prevalence of 37 HPV genotypes in different age groups［n（%）］

2.2 单一或多型别感染的分布

单一和多型别HPV 感染情况见表2。单一型HPV 感染率显著高于多重HPV 感染率，差异有统计学意义（P＜0.01）。单一型HPV 感染中，高危型HPV 感染率显著高于低危型HPV 感染率，差异有统计学意义（P＜0.01）。多重HPV 感染中，同时感染高危型和低危型HPV 感染率显著高于多重感染高危型HPV 和多重感染低危型HPV，差异有统计学意义（P＜0.01）。多重感染HPV 中，双重感染HPV 显著高于三重和四重及以上HPV 感染，差异有统计学意义（P＜0.01）。

表2 单一或多型别人乳头状瘤病毒（HPV）感染率［n（%）］Table 2 The prevalence of 37 HPV genotypes of single/multiple infection in all the specimens［n（%）］

2.3 不同年龄组HPV 感染率

不同年龄组的女性HPV 感染率的差异有统计学意义（P＜0.01）。在807 名感染HPV 的女性中，HPV 感染呈双高峰，首峰出现在≤20 岁组（29.7%，11/37），次峰出现在61～65 岁组（25.4%，43/169）。低危型、高危型、单一型和多重型HPV 感染组表现出相同的趋势。见图1。

图1 不同年龄组女性的HPV 感染率分布Figure 1 Prevalence of the HPV infection types in different age groups

宫颈癌是严重危害全球女性健康排名第四的恶性肿瘤，每年新增53 万例，我国女性该病发病率也较高［1，3］。高危型HPV 感染，如HPV16、HPV18、HPV52 等，已被确定为宫颈癌的主要危险因素，在大多数感染病例可检出［12］。本研究对2019～2021年来河南省洛阳市门诊就诊的6 538 例女性37 型HPV 感染情况进行分析，HPV 的总体感染率为12.3%，接近于郑州2016 年报道的HPV 阳性率12.09%，其中2019 年HPV 感染率为20.05%，与其它研究者报道相似［13-14］。在我国不同地区，HPV 感染率差异较大，如山西（32%）、新疆（9.34%）、云南（7.6%）等［9，11，15］。许多因素，包括性别、年龄、种族和经济发展情况等，可导致不同地区HPV 感染率差异显著［16］。

在本研究中，HPV16 和HPV52 是洛阳地区感染率最高的HR-HPV 基因型。在中国的一些地区，例如北京，女性中最常见的HR-HPV 基因型为HPV16，在上海，HPV52 是最主要的基因型（3.58%）［17-18］。自2016 年以来，二价（HPV16 和HPV18）、四价（HPV6、11、16 和18）和九价（HPV6、11、16、18、31、33、45、52 和58）宫颈癌疫苗已获得中国国家食品药品监督管理局的批准。本研究为河南省宫颈癌筛查和HPV 疫苗接种的实施提供了有价值的数据。从本研究调查数据可知，HPV39和HPV51 在洛阳市感染率较高，含有此两种基因型的HPV 疫苗将更有效地预防该地区HPV 感染。HPV 感染率与年龄有一定的相关性。在所有感染类型中均观察到两个年龄段的女性感染率较高，分别是≤20 岁和61～65 岁，这和其他人的研究相似［19-21］。女性HPV 感染率在≤20 岁较高一方面与此年龄段检测人员数量较少有关，另一方面，此年龄段性活跃较高而缺乏对HPV 抵抗力也是主要原因［22］。HPV 感染率第二个高峰出现在61～65 岁组（38.0%，151/397），包括10.6%（42/397）LR-HPV 感染和33.5%（133/397）HR-HPV 感染。女性在该年龄段由于体内激素波动引起的生理和免疫失调，使该年龄段成为HPV 高发时期［23］。本研究将有助于制定宫颈癌的预防策略，将年龄＞60 岁的女性纳入更多检查，包括细胞学检查，甚至阴道镜检查，可能会有效预防宫颈癌。

综上所述，本研究对中国中部地区女性人群中HPV 的分布和基因型提供了基本信息，有助于该地区制定宫颈癌的预防策略，促进检测诊断和疫苗的发展。