韭菜中农药残留检测去除硫化物的方法比较

鹤壁市农产品检验检测中心 刘小丽 张艳丽 王丽娟 王风英 刘尚伟

韭菜属于基质复杂的蔬菜，在检测其农药残留的过程中，传统的样品前处理方法不能有效净化基质成分，导致目标残留化合物的检测分析容易产生严重的基质干扰现象。在样品被搅碎制备时，韭菜中的活性酶会释放硫化物，这些硫化物与农药性质相似，且不易除去，影响定性与定量分析的准确性。有效去除挥发性的硫化物是测定韭菜样品中农药残留的关键。基于此，本文开展试验对韭菜农药残留检测前处理技术进行优化，将五种去除韭菜中硫化物的方法进行比较，以求测定结果更加准确。

（一）试验仪器、试剂

试验仪器有Agilent 7890B 气相色谱仪（FPD 检测器、自动进样器、分流/不分流进样口）、高速分散均质机、氮吹仪、快速混匀器、电子天平、均浆机。试验试剂有乙腈（色谱纯）、丙酮（色谱纯）、氯化钠（分析纯）。

（二）标准溶液的配制

标准溶液由农业农村部环境保护科研监测所提供，质量浓度均为100.0μg·mL-1。标准溶液用丙酮稀释为10.0μg·mL-1。

（三）实验方法

根据《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》（NY/T 761—2008）进行检测。

（一）气相条件

韭菜去硫化物试验，色谱柱VF-5 MS（30 m×0.25 mm×0.25 um），温度80℃保持1 min，以每分钟20℃的速度上升到130℃，再以每分钟5℃的速度上升到200℃，再以每分钟15℃速度上升到250℃，保持11 min。进样体积1μL，不分流进样，检测器的温度300℃，进样口温度250℃，氮气流速30 mL·min-1，柱流速2 mL·min-1，空气流速17 mL·min-1，氢气流速14 mL·min-1。

（二）对硫化物的处理方法

1.微波处理法。韭菜切成2 cm 小段，中高火微波加热40 s。既可以避免产生影响农药残留测定的硫化物，又可满足回收率要求。样品粉碎，准确称取25.0 g试样，加入50 mL 乙腈，在匀浆机中高速匀浆2 min 后用滤纸过滤。滤液收集到装有5～7 g 氯化钠的100 mL 具塞量筒中，盖上盖子，剧烈震荡1 min，在室温下静置30 min，使乙腈相和水相分层。用大肚管从100 mL 具塞量筒中分别移取10 mL 乙腈溶液于2 个小烧杯中，将烧杯放在80℃水浴锅上加热，氮吹近干。加标样用丙酮定容至5 mL，混匀、过滤膜后移入2 mL 进样瓶内，上机测定。

2.加热处理法。准确称取25.0 g 试样，加入50 mL乙腈，在匀浆机中高速匀浆2 min 后用滤纸过滤。滤液收集到装有5～7 g 氯化钠的100 mL 具塞量筒中，盖上盖子，剧烈震荡1 min，在室温下静置30 min，使乙腈相和水相分层。用大肚管从100 mL 具塞量筒中分别移取10 mL 乙腈溶液于2 个小烧杯中，将烧杯放在80℃水浴锅上加热，氮吹近干。乙腈吹干后将烧杯在80℃水浴上继续加热3 min，边加热边用氮气吹，以去除韭菜中影响有机磷农药残留测定的干扰物质。加标样用丙酮定容至5 mL，混匀、过滤膜后移入2 mL 进样瓶内，上机测定。加热时间分别取30 s、1 min、2 min、3 min、4 min、5 min 进行试验，测定结果发现随着加热时间的增加，韭菜本底杂峰逐渐降低，加热时间在3～4 min 时，农药峰高无显著变化，故本试验加热时间应为3 min。

3.磷酸处理法。称取200 g 韭菜，加入100 mL 的10%的磷酸溶液，搅碎、混匀。准确称取25.0 g 试样，加入50 mL 乙腈，在匀浆机中高速匀浆2 min 后用滤纸过滤。滤液收集到装有5～7 g 氯化钠的100 mL 具塞量筒中，盖上盖子，剧烈震荡1 min，在室温下静置30 min，使乙腈相和水相分层。用大肚管从100 mL 具塞量筒中分别移取10 mL 乙腈溶液于2 个小烧杯中，将烧杯放在80℃水浴锅上加热，氮吹近干。加标样用丙酮定容至5 mL，混匀、过滤膜后移入2 mL 进样瓶内，上机测定。

4.低温处理法。冷冻试样，提取剂乙腈称取25.0 g放入冰箱，取出样品解冻至2℃时，加入50 mL 乙腈，在匀浆机中高速匀浆2 min 后用滤纸过滤。滤液收集到装有5～7 g 氯化钠的100 mL 具塞量筒中，盖上盖子，剧烈震荡1 min，在室温下静置30 min，使乙腈相和水相分层。用大肚管从100 mL 具塞量筒中分别移取10 mL 乙腈溶液于2 个小烧杯中，将烧杯放在80℃水浴锅上加热，氮吹近干。加标样用丙酮定容至5 mL，混匀、过滤膜后移入2 mL 进样瓶内，上机测定。

5.乙酸微波处理法。韭菜切成长2 cm 小段，称取200 g，加入100 mL 的10%的磷酸溶液，中高火微波加热40 s，搅碎、混匀。

韭菜试样称取25.0 g，加入50 mL 乙腈，在匀浆机中高速匀浆2 min 后用滤纸过滤。滤液收集到装有5～7 g氯化钠的100 mL 具塞量筒中，盖上盖子，剧烈震荡1 min，在室温下静置30 min，使乙腈相和水相分层。用大肚管从100 mL 具塞量筒中分别移取10 mL 乙腈溶液于2 个小烧杯中，将烧杯放在80℃水浴锅上加热，氮吹近干。

加标样用丙酮定容至5 mL，混匀、过滤膜后移入2 mL 进样瓶内，上机测定。

表1 五种方法处理韭菜样品回收率、相对标准偏差及检出限比较

观察表1，可得如下结果：

（一）微波处理法

采用微波处理法去除韭菜中硫化物，基质本底杂峰有所改善，平均回收率在59.51%～94.32%。

（二）加热处理法

采用加热处理法去除韭菜中硫化物，基质本底杂峰改善明显，但由于氮吹时间延长、氮吹干，回收率低，平均回收率在59.14%～85.61%。

（三）磷酸处理法

采用磷酸处理法，处理样品粉碎前加入磷酸，避免了有机硫化物的产生，有效去除韭菜中硫化物干扰，基质本底杂峰改善，平均回收率在66.91%～95.66%。

（四）低温处理法

采用低温处理法去除韭菜中硫化物，基质本底杂峰有所改善，平均回收率在59.53%～85.69%。

（五）乙酸微波处理法

用乙酸微波处理法，样品粉碎前加入磷酸，并采用微波处理法去除韭菜中硫化物，避免了有机硫化物的产生，有效去除韭菜中硫化物干扰，基质本底杂峰改善明显，平均回收率在76.34%～102.37%。

从以上分析结果可以看出：利用10%乙酸和40 s中高火微波处理，可有效消除韭菜基质对有机磷农药残留检测干扰，消除部分韭菜本底峰干扰，从而有效地提高了韭菜中有机磷农药残留检测结果的准确性。本方法既可以避免产生影响农药残留测定的硫化物，又可以满足回收率的要求。采用10%乙酸与中高强度的微波处理相结合的方法，可以使韭菜中活性酶快速失活，可有效去除干扰物质。本方法测定的有机磷农药品种只有九种，但利用本方法处理韭菜样品后，韭菜本底杂峰减少明显，有效消除韭菜基质对有机磷农药残留检测干扰，提高韭菜中有机磷农药残留检测结果的准确性，故此方法亦适用于其他蔬菜中有机磷农药的残留检测。