[瘢痕患者免疫功能状态研究] 免疫功能低下患者静脉通路维护答案

　　[摘要]目的：通过比较不同程度瘢痕患者和健康对照组的细胞免疫和体液免疫的差异，分析瘢痕患者免疫功能状态，探讨瘢痕可能的免疫学发生机制。方法：101例瘢痕患者分为三组：轻度瘢痕组、中度瘢痕组和重度瘢痕组。选择健康体检者50例做为正常对照组。测定T细胞亚群比例和CD8T淋巴细胞的杀伤活性，同时，检测CD8T淋巴细胞培养上清液中TNF-β水平。分别采用生物学活性法和ELISA测定瘢痕患者和正常对照IFN-γ和IL-4分泌水平。结果：不同组别CD8T细胞亚群比例比较结果和CD4T细胞相似，即在对照组和轻度瘢痕组，中度瘢痕组和重度瘢痕组差异不具有显著性，其余各组间差异具有显著性。血清中IFN-γ在各组间差异均具有显著性; 上述各组血清中IL-4表达水平除在轻度和中度瘢痕组间差异不具有显著性外，其它各组间差异均具有统计学意义。CD8T淋巴细胞杀伤效应在效靶比为5:1时，除轻度瘢痕和中度瘢痕组间差异不具有显著性外，其余各组间差异均具有统计学意义。CD8T细胞培养上清中TNF-β水平在各组间差异均具有显著性。结论：同对照组比较，瘢痕患者适应性免疫出现以细胞免疫功能升高，伴随体液免疫功能降低的趋势，并且随着瘢痕程度的加重，这种变化渐趋明显。提示，瘢痕组织的形成可能与机体细胞免疫功能异常升高和体液免疫功能水平降低有关。
　　[关键词]瘢痕；Th1型细胞因子；Th2型细胞因子；CD8T细胞
　　[中图分类号]R619+.6R320.2 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455（2011）02-0247-05
　　
　　Study on the adoptive immunity of patients with scar
　　YAN Gui-chun,AN Xin,ZHANG Hai-yong,WANG Rui-hai,PEI Yin-hui,YU Bo
　　(Department ofPlastic Surgery,Kailuan Hospital,Tangshan 063000,Hebei,China)
　　
　　Abstract:ObjectiveBy comparing the differencesof cellular and humoral immunity betweencaseandcontrol group,the immunity of patients with scar was assessed,so thepossible immunity mechanism of the formation scar was presumed.Methods101 cases of patients with scar were divided into 3 groups (mild, middle and heavy group）,50 ones who have physical examined were served ascontrol. T lymphocytesubtypes and cyotoxicity of CD8 T lymphocyte were detected,and the concentration of TNF-β secreted by CD8 Tlymphocyte was determined too. Serum was collected fo the detections of INF-r and IL-4,bio-activity method and ELISA were performed for that purposerespectively. ResultsThe differences of the percentage of CD4 T subtype in mild,middle,heavy scar group and control were significant except the comparisons between controland mild scar group,middle scar group and heavy scar group, so didthat in CD8 T subtype. The concentraion of INF-r was significantly different among all the groups. The expressions of IL-4 were different except the comparion ofmild andmiddle scar group. About the cytotoxicity of CD8 T lymphocyte,thedifferences were significant except the comparision of mildand middlescar group under the ratio of effect and target cell was 5:1. Therewere significant differences among all the groups about the level of TNF-β.ConclusionCompared to the control group,the adoptive immunit ofpatients with scar wasseen to be in an abnormal state,namely,the cellular immunityincreased while the humoral immunity decreased,andthistrend becomes more obviously with the more serious of scar tissue. Thisindicated that the formation of scar tissue might be related to theincreasment of cellular immunity and the decreasment of humoralimmunity.
　　Key words: scar;Th1 cytokine;Th2 cytokime;CD8 T lymphocyte
　　
　　瘢痕（scar) 是皮肤创伤修复和愈合过程的产物。目前有关瘢痕组织的适应性免疫学发生机制研究尚缺乏系统性，不能从整体水平阐述瘢痕的免疫学发生机制 [1]。本研究通过研究瘢痕患者适应性免疫功能状态，探讨瘢痕的发生与机体适应性免疫应答功能之间的关系，从而为瘢痕的免疫学防治奠定理论依据。
　　1临床资料
　　自2008年2月～2009年9月于我科就诊的瘢痕患者101例为病例组，根据瘢痕病情严重程度分类的积分标准进行分组：①瘢痕颜色深浅：赤红或鲜红伴毛细血管扩张者计3分；淡红，按压后可消失计2分；不红，甚至有些灰暗计1分；显示为正常皮肤颜色计0分；②瘢痕高度：高度在8mm以上计3分；4～8mm计2分；1～4mm计1分；平坦或略有凹陷计0分；③瘢痕硬度：坚硬如软骨计3分；硬度似橡皮计2分；稍软计1分；柔软如正常皮肤计0分；④瘙痒感：剧烈或持续性瘙痒伴搔抓痕计3分；时常有但不太剧烈，可以忍受计2分；偶尔出现计1分；无瘙痒症状计0分；⑤触疼觉：很强烈的痛觉过敏，轻触时拒按计3分；中等强度的过敏性疼痛，按压时有疼痛感但可以忍受计2分；有时有疼痛感，按压时疼痛不明显计1分；感觉如正常皮肤没有异常疼痛感计0分。按此积分标准，积分为15～11分为重度，10～6分为中度，5-1分为轻度[2]。临床病例分为三组：轻度瘢痕组38例（年龄37.2±13.5岁），中度瘢痕组31例（年龄32.5±16.8岁）和重度瘢痕组32例（年龄41.8±9.5岁）。选择同期健康体检者50例（年龄46.5±12.7岁）做为正常对照组。
　　
　　2方法
　　通过T细胞亚群检测，血清中Th1型细胞因子（IFN-γ）测定， 血清中Th2型细胞因子（IL-4）检测， CD8型细胞因子（TNF-β）检测，CD8细胞杀伤活性测定，应用SPSS11.5软件对资料进行统计学处理，两组均数比较采用t检验，两组以上均数比较应用方差分析，检验水准取双侧α=0.05。
　　
　　3结果
　　3.1 T细胞亚群检测结果：见表1～3。
　　经统计学检验，CD4T淋巴细胞比率在各组间差异具有显著性。在总体趋势上，随着瘢痕严重程度加剧，CD4T淋巴细胞比率逐渐降低。进一步通过组间两两比较的Q检验结果表明，除轻度瘢痕组与对照组、中度瘢痕组与重度瘢痕组差异不具有统计学意义外（p值分别为0.688、0.322），其余两两组间差异具有显著性（P值均小于0.05），说明中度瘢痕和重度瘢痕组CD4T淋巴细胞比率均低于轻度瘢痕组和正常对照组，而中度瘢痕组和重度瘢痕组间、轻度瘢痕组和正常对照组间CD4T淋巴细胞比率相同。而在对各组CD8T淋巴细胞的测定中，表现为相反的情况，即在总体趋势上，随着瘢痕程度的加重，CD8T淋巴细胞比率逐渐升高。经方差分析，各组间差异具有显著性，说明CD8T淋巴细胞在不同组间存在差异；进一步通过Q检验进行两两组间比较显示出同CD4T淋巴细胞同样的情况，即在轻度瘢痕组与对照组、中度瘢痕组与重度瘢痕组差异不具有统计学意义外（P值分别为0.725、0.579），其余两两组间差异具有显著性（P值均小于0.05），说明中度瘢痕和重度瘢痕组CD8T淋巴细胞比率均高于轻度瘢痕组和正常对照组，而中度瘢痕组和重度瘢痕组间、轻度瘢痕组间和正常对照组间CD4T淋巴细胞比率相同。
　　3.2 血清中Th1型细胞因子（IFN-γ）测定：见图1、表4。
　　通过对正常对照组和轻度、中度及重度瘢痕患者血清中IFN-γ进行检测，其表达水平分别为106.99±54.12μg/ml、150.26±65.47μg/ml、199.20±95.67μg/ml、247.42±35.7 82μg/ml。经统计学检验，各组间差异具有显著性，表明IFN-γ在正常人群和不同程度瘢痕患者中表达量不同。进一步应用q检验对两两组间的差异进行分析，各两两组间比较结果均显示具有统计学意义（P均＜0.05）。
　　3.3 血清中Il-4 的测定结果：见图2、表5。
　　研究结果表明，对照组和轻度、中度和重度瘢痕组血清中IL-4表达水平分别为89.19±1.87pg/L，75.22±2.15pg/L，73.84±2.38pg/L，40.56±2.34pg/L,方差分析结果表明，IL-4在各组间表达差异具有显著性，进一步通过q检验结果显示，除轻度和中度瘢痕组间差异不具有显著性外，其它各组间差异均具有统计学意义。提示，IL-4表达水平降低与瘢痕组织的形成有关。
　　3.4 CD8T淋巴细胞分泌TNF测定结果：见图3、表6。
　　实验结果显示：正常对照组和轻度、中度和重度组CD8T淋巴细胞表达TNF-β水平分别为54.14±10.07IU/ml，122.59±11.55IU/ml，306.95±12.79IU/ml， 431.32±12.59IU/ml,经统计学处理，各组间差异具有显著性，CD8T细胞表达TNF-β在正常对照组，轻度，中度和重度组呈逐渐升高的趋势，提示瘢痕组织的发生与CD8T淋巴细胞分泌TNF水平升高有关。
　　3.5 CD8T淋巴细胞杀伤活性测定结果：见图4、表7。
　　统计学处理结果表明效靶比为5:1时，除轻度瘢痕和中度瘢痕组间差异不具有显著性外（P>0.05），其余各组间差异均具有统计学意义（P 　　
　　5结论
　　研究结果表明：瘢痕患者适应性免疫出现以细胞免疫功能升高，伴随体液免疫功能降低的趋势，并且随着瘢痕程度的加重，这种变化渐趋明显。因此，瘢痕组织的形成可能与机体细胞免疫功能异常升高和体液免疫功能水平降低有关。
　　
　　[参考文献]
　　[1]闫贵春,裴银辉.瘢痕发生机制研究进展[J].中国美容医学,2010,19(8):1251-1253.
　　[2]郭建辉,曹毅.瘢痕治疗的研究进展[J].浙江中医药大学学报,2007,31(3):402-404.
　　[3]BorondoF,WisniackiDA,VerginiEG,et al. The scar mechanism revisited[J]. Europ Physi J,2008,65(12):93-101.
　　[4]Jaquet K,Krause KT,Denschel JR,et al. Eduction of myocardial scar size after implantation of mesenchymal stem cells in rats: what is the mechanism[J]? Stem Cells and Development,2005,14(3):299-309.
　　[5]Drobnik J,Karbownik-Lewinska M,Szczepanowska A,et al. Regulatory influence of melatonin on collagen accumulation in the infarcted heart scar[J]. J PineRes,2008,45(3):285-290.
　　[6]Tabel GM,Whittaker P,Vlachonassios K,et al. Collagen fiber morphology determines echogenicity of myocardial scar: implications for image interpretation[J]. Echocardiography,2006,23(2): 103-107.
　　[7]冷向锋,王德昌,霍然,等.烧伤后增生性瘢痕成纤维细胞中TRAIL受体的表达及意义[J].中华整形外科杂志,2005,21(6):444-447.
　　[8]Cynthia Guidos. Thymus and T-lymphocyte development: what is new in the 21 st century[J]? Immunological Reviews,2006,20(9):5-9.
　　[9]Cilio CM,Daws MR,Malashicheva A, et al. Cytotoxic T lymphocyte antigen 4 is induced in the thymus upon in vivo activation and its blockade prevents anti-CD3-mediated depletion of thymocytes[J]. J Exper Med,1998,188(7):1239-1246.
　　[10]Imami N,Aspinall R,Gotch F. Role of the thymus in T lymphocyte reconstitution (comment) [J]. Transplantation,20006,9(11):2238-2239.
　　[11]姜玉章,季晓辉,李玉峰,等.环磷酰胺和环孢素A对SLE患者外周血Th细胞亚群免疫调节的作用[J].细胞与分子免疫学杂志,2008,24(2):172-174.
　　[12]陈海燕,韩捷,华咏,等.类风湿关节炎患者Th细胞亚群的检测及其临床意义[J].中国误诊学杂志,2008,8(6):1272-1274.
　　
　　[收稿日期]2010-11-21 [修回日期]2011-01-16
　　编辑/张惠娟