尿液干化学分析 尿液干化学自动分析在临床中的应用

来源:程序员 发布时间:2019-04-15 点击:

  [关键词]尿液干化学自动分析;临床应用   [中图分类号]R446.1[文献标识码]A [文章编号] 1005-0515(2010)-7-089-01   
  随着科学技术的飞速发展,尿液分析方法发生了划时代的变化,从传统的手工检测转变为自动化分析。自动化尿液分析在几分钟之内就能提供十几项检测指标,有利于临床的快速诊断,但由于尿液干化学分析的影响因素较多,容易造成假阳性或假阴性,也存在一定的不足。自动化仪器分析尿的有形成分也只能起到初步筛查作用,显微镜检查仍是进一步鉴别尿中有形成分不可缺少的检查方法。现将我科几年来使用KH-100尿液分析仪中的体会介绍给大家,以期引起同行们的重视。
  1 尿液分析仪的工作原理
  尿液分析仪使用单色光扫描试纸条的反应区,将光信号转换成电信号,根据单色光在不同颜色时的反射率不同,经机内单片机处理确定反射率梯度,计算尿液中各项生化成分的含量,再把测试结果以有临床意义的单位显示并打印出来。
  2 尿液干化学分析及影响因素
  2.1 血红蛋白或红细胞
  采用血红蛋白类过氧化物酶法;血红蛋白类过氧化物酶催化试剂块中的过氧化氢烯钴和色素原,后着脱氢氧化而呈色。颜色深浅与血红蛋白或红细胞含量成正比。试带不仅与血红蛋白还与肌红蛋白反应,膜块上出现的绿色斑点,提示有未溶解的红细胞。尿液收集容器中若有次氯酸盐和细菌过氧化物酶污染及尿中某些具有过氧化物酶作用的不耐热酶存在均会使尿红细胞试纸检测出假阳性。正常成人女性白带污染也可致假阳性。对于尿标本出现尿潜血(+)阳性,有学者认为正常人尿液中可有很少量的红细胞,出现尿潜血(+),我们通过大量临床试验观察认为若其它指标正常,仅尿潜血(+)并无临床意义。
  2.2 胆红素
  采用偶氮反应法,试带中含有稳定的重氮试剂,尿中胆红素与重氮化合物偶联生成偶氮胆红素,颜色范围从棕色到紫色。胆红素的测定相对比较稳定,但高浓度的维生素C可致反应减弱甚至呈假阴性,大剂量氯丙嗪、盐酸苯偶氮吡啶可致假阳性。
  2.3 尿胆原
  采用醛反应法或重氮反应法,尿胆原与对-二甲氨基苯甲醛发生醛化反应生成樱红色。正常情况下,尿液中尿胆原呈弱阳性反应。胆红素过高可造成尿胆原假阳性,尿液颜色过深也会影响结果。
  2.4 酮体
  采用亚硝基铁氰化钠法。在碱性条件下,亚硝基铁氰化钠与尿中的乙酰乙酸、丙酮起反应,颜色从浅黄到紫红色。该法对乙酰乙酸的敏感性较好,对丙酮的敏感性较差,而对β-羟丁酸基本无反应,糖尿病酸中毒早期尿中的酮体主要是β-羟丁酸,症状缓解后尿中乙酰乙酸含量开始增高,这在分析结果时需引起注意。
  2.5 蛋白质
  采用PH指示剂蛋白质误差法,在PH3.2的条件下,溴酚蓝产生的阴离子,与带阳性离子的蛋白质结合发生颜色变化。该方法对白蛋白较为敏感,对球蛋白反应很弱,当尿液PH>8时可引起尿蛋白假阳性反应,大剂量青霉素可致颜色减弱。
  2.6 亚硝酸盐
  采用硝酸盐还原法,尿中亚硝酸盐与试带中的对氨基苯胂酸反应生成重氮化合物,后者再与1、2、3 、4-四氢苯并喹啉-3酚偶联产生粉红色。泌尿系革兰氏阴性杆菌感染时,细菌将尿中硝酸盐还原成亚硝酸盐,但亚硝酸盐阴性不能排除菌尿。(1)菌尿在膀胱中潴留时间不足4小时,不能产生足够量的亚硝酸盐;(2)球菌、霉菌、支原体等不产生将硝酸盐还原成亚硝酸盐的酶。
  2.7 尿糖
  采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法,模块中葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、色素原等。葡萄糖氧化酶促葡萄糖与氧作用,生成葡萄糖酸内酯及过氧化氢,后者与色素原在过氧化物酶的作用下,使色素原呈现不同的颜色。而其他还原性糖则不发生反应。
  2.8 PH值
  采用酸碱指示剂法,模块中含有甲基红和溴麝香草酚蓝,两种酸碱指示剂配合可反应尿液PH4.5-9.0的变异范围,颜色有橙红经黄绿到蓝色变化。检测时应注意(1)尿液应新鲜,时间过久细菌分解尿素,产生氨使PH值升高。(2)试带不应在尿中放置时间过长,有使PH下降趋势,出现假阴性结果。
  2.9 比重
  采用多聚电解质离子解离法,模块内的多聚电解质对尿液中的离子浓度非常敏感,当尿液中的离子浓度升高时,多聚电解质Pka降低致使PH下降,PH指示剂随之发生变化,从蓝绿色到黄绿色,进而换算成尿液的比重值,PH>7时,尿比重应加上0.005以校正。
  2.10 白细胞
  采用白细胞酯酶法,三羧酸吲哚酸脂与粒细胞脂酶反应生成吲哚酚,吲哚酚与重氮盐反应生成紫色复合物。尿试纸对中性粒细胞敏感,对淋巴细胞和单核细胞不敏感。尿蛋白浓度过高(>5g/L)或尿糖浓度过高均可减弱试纸的反应,头孢菌素、呋喃坦叮可引起白细胞测定结果偏低。福尔马林则可造成假阳性。
  2.11维生素C
  正常情况下,每人平均食入30-80mg/d,尿中排出20-30mg/d,尿中维生素C易受饮食影响,大量摄取维生素C患者尿液对葡萄糖、红细胞、胆红素产生干扰。
  综上所述,由于干化学分析法受多种因素的影响,临床工作中不可避免的出现假阴性或假阳性结果,因此有时需要用确证试验或其他参考方法来验证。尿蛋白的参比方法为磺基水杨酸法 ,比重的参比方法为折射仪法,尿葡萄糖的确证试验为葡萄糖氧化酶定量法,尿胆红素确证试验为 Harrison 法,而尿白细胞、红细胞的确证试验为尿沉渣显微镜镜检法。此外,国内大,中型医院同一实验室拥有不同的品牌、不同型号的尿分析仪已不罕见,因此,应对不同品牌试带的灵敏度和对同一浓度测试项目所产生的不同级差引起足够的重视。
  3 尿干化学分析仪检查与显微镜检查
  3.1 尿干化学分析仪主要的优点与不足
  (1)主要优点,标本用量少,检测速度快,检测项目多,准确性,重复性好;适用大批量普查。
  (2)主要不足;不能替代显微镜对病理性尿标本的检查,特别是管型、结晶、上皮细胞、淋巴细胞、单核细胞等其他有形物质;尿蛋白试带以检测白蛋白为主,对球蛋白不敏感,故不适用于肾病患者;易受多种药物或其他外源性物质或人为因素等因素的干扰,出现假阴性或假阳性。
  3.2 尿干化学分析检查与显微镜检查结果的比较
  尿液干化学分析仪与传统显微镜检查是两种原理不同的检验技术。在临床上可能出现化学法分析结果与镜检结果不相符的情形。如: (1)白细胞:①分析仪法(+),镜检法(-):可能的解释为尿液在膀胱储存的时间过长或其他原因致使白细胞破坏。②分析仪法(-),镜检法(+):多发生在尿液中以淋巴细胞或单核细胞为主时,应以显微镜检测结果为准。(2)红细胞:①分析仪法(+),镜检法(-):可由于尿液中红细胞常被破坏而释放出血红蛋白,或某些患者尿液中含有对热不稳定酶、肌红蛋白或菌尿,引起红细胞干化学法测定结果的假阳性。②分析仪法(-),镜检法(+):可发生在尿液中含有大量维生素C或试带失效时。为此,我们建议对尿液进行干化学分析检查时,应同时进行显微镜检查。

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