包膜对猪扩张后动脉筋膜皮瓣血供影响的研究:肾筋膜是肾包膜吗

　　[摘要]目的：探讨包膜切除与包膜保留，对猪扩张后超长动脉筋膜皮瓣血流动力学、氧代谢及皮瓣活力的影响，为临床处理皮瓣包膜提供参考。方法：9～12个月龄成年小型香猪8只，每只猪对称各设计1个以胸背动脉穿支血管为蒂、面积为5cm×20cm的扩张后动脉筋膜皮瓣。实验组扩张后动脉筋膜皮瓣包膜切除，对照组皮瓣包膜保留。比较二组皮瓣的血氧饱和度、MDA含量和成活长度的变化。结果：实验组扩张后动脉筋膜皮瓣的血氧饱和度低于对照组；MDA含量高于对照组；成活长度小于对照组。结论：包膜增加了扩张后动脉筋膜皮瓣的血供，应该予以保留。
　　[关键词]包膜；动脉筋膜皮瓣；血供
　　[中图分类号]R622 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455（2011）02-0222-04
　　
　　Study on effect of the capsular tissue on the blood supply of expanded artery-pedicled fasciocutaneous flaps in the pig
　　ZHANG Zhi-hong1, WANG Jia-qi2, LI Wen-zhi1
　　(1.Department of Plastic Surgery and Laser Medcine, Beijing Anzhen Hospital, Capital University of Medical Sciences, Beijing 100029, China; 2. The Third Plastic Department of Plastic Surgery Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences,Beijing 100041,China)
　　
　　Abstract:ObjectiveTo discuss the effect of capsulectomy on the hemodynamics, oxygen metabolism and viability of the expanded artery-pedicled fasciocutaneous flaps in the pig. It provides references of clinical management for the capsular tissue.Methods20 cephalicly based expanded fasciocutaneous flaps with axial-pattern blood flow, 5cm×20cm, were designed on each back skin, using piglets aged 9～12 months as an experimental model. Group C was expanded flap with capsulectomy. Group D was expanded flap with intact capsular tissue. The expanded skin flaps with capsulectomy at the time of flap elevation were in experimental group, and flaps with intact underlying capsular tissue were in control group. Compare the changes oftissue oxygen saturation, malondialdehydecontent and the length of flap viability in two groups.ResultsTissue oxygen saturation values in control group were lower than that in experimental group, the MDA content in control group was higher than that in experimental group, and the length of flap viability in control group was shorter than that in experimental group.ConclusionsThe capsular tissue adds blood supply to the expanded artery-pedicled fasciocutaneous flaps,and it should be retained.
　　Key words: capsular tissue; expanded artery-pedicled fasciocutaneous flaps; blood supply
　　
　　包膜是植入物和机体自身组织之间形成的内层界面，是机体对异物侵入的一种自然保护性反应。组织扩张器的周围常形成较厚的包膜，是限制扩张皮瓣延展推进的主要因素[1]，切除包膜可以使皮瓣覆盖更多的创面，但这对于扩张皮瓣血供的影响还不甚清楚。扩张后动脉筋膜皮瓣修复较大的皮肤软组织缺损常可获得满意效果[2]，但其包膜面积也相对较大，组织的即时回缩会更明显，如何处理包膜既有利于皮瓣的推进覆盖，又不影响皮瓣的血供，目前尚无依据，多凭借术者各自的临床经验。我们的实验旨在探讨包膜的处理对猪扩张后动脉筋膜皮瓣血流动力学、氧代谢和活力的影响。
　　
　　1材料和方法
　　1.1 动物、仪器和试剂
　　1.1.1动物：9～12个月龄成年普通级小型香猪10只，单栏饲养，健康状况良好，平均体重(16±0.8)kg(中国农业大学提供)。
　　1.1.2 仪器和试剂：ODISseyTM血氧测量仪（美国ViOptix,Inc.公司，Fremont, CA）； ES-100V3双向多普勒血流仪（日本Hayashi Denki公司）；紫外可见光分光光度计（UltrospecTM 3300pro，英国Amershampharmacia 生物技术公司）；T21台式高速离心机 （美国SORVALL公司，4 000r/min）；电热恒温水浴箱 （北京西城区医疗器械厂）；丙二醛（MDA）试剂盒 （南京建成生物研究所）；300ml长方形扩张器(底面积 6cm×12.5cm)20个（浙江余姚久盛硅橡胶制品厂）；天平砝码一套（江苏常熟金羊砝码仪器有限公司）。
　　1.2 方法
　　1.2.1皮瓣制备及分组：10只小型香猪均于术前禁食12h，常规皮肤剃毛、消毒及铺巾。将氯胺酮和速眠新2种药物混合（配比度2:1，0.2mg/kg），进行肌肉注射全身麻醉。一期手术用ES-100V3双向多普勒血流探测仪找出胸背动脉，以其穿支血管为轴心，在双侧深筋膜下各置入300 ml长方形扩张器1枚，扩张注射生理盐水2个月。然后二期手术取出扩张器，距离猪胸背部中线4cm，每侧对称设计形成1个以胸背动脉肌皮穿支血管为蒂、面积为5cm×20cm的扩张后动脉筋膜皮瓣。
　　实验组：扩张后动脉筋膜皮瓣包膜切除（n=10）；对照组：扩张后动脉筋膜皮瓣包膜不切除（n=10）。
　　1.2.2 二组皮瓣血氧饱和度变化监测：以美蓝在20cm长的扩张后动脉筋膜皮瓣表面划线，分成4等份，每条线相距5cm，线的中点为血氧饱和度（StO2）测试点。从皮瓣蒂部到远端分别命名为点0、点1、点2、点3、点4。观察辨认实验组皮瓣上的包膜，将之仔细地切除（图1），止血。皮瓣远端用锐利的金属小钩钩住。小钩由长线经滑轮与托盘连接, 托盘内置砝码，垂于手术台一端。砝码重量经滑轮转化为对皮瓣远端施加的张力，变换砝码的重量可控制皮瓣拉伸的长度[3]。将ODISseyTM血氧测量仪的贴片式探头分别置于皮瓣需测量的五个点位上。将回缩的皮瓣拉伸至原长20cm，相同张力下测量五点的血氧饱和度值（图2）。仪器每10s测量一次StO2数据，每点取4个数据。对照组皮瓣上的包膜完整保留不切除，测量方法及记录参数同实验组。血氧饱和度的监测，可反映二组皮瓣的血流动力学变化情况。
　　1.2.3 组织丙二醛（MDA）含量测定： 二组均距扩张后动脉筋膜皮瓣蒂部0cm、5cm、10cm、15cm、20cm的皮瓣边缘各取1g皮瓣包膜面组织，用以测定丙二醛（MDA）含量。然后皮瓣在原创面缝合。
　　1.2.3.1 MDA试剂盒测试原理及组成：过氧化脂质降解产物中的丙二醛（MDA）可与硫代巴比妥酸（TBA）缩合，形成红色产物，紫外可见光分光光度计可检出在532nm处有最大吸收峰。MDA含量可反映皮瓣组织的氧代谢情况，即缺血缺氧程度，MDA含量越高组织缺氧越严重。
　　试剂一：液体10ml×1瓶，室温保存。试剂二：液体6ml×1瓶，用时加170ml 双蒸水混匀。（注意不要碰到皮肤上）。试剂三：粉剂×1支，用时将粉剂加入到来90℃～100℃的热双蒸水30 ml中，（在溶解过程中可适当加热），充分溶解后用双蒸水补足至30 ml再加冰醋酸30 ml，混匀配好的试剂避光冷藏。标准品：10nmol/ml四乙氧基丙烷5ml×1瓶。
　　1.2.3.2测定操作步骤：95℃水浴（开盖煮沸）40min，然后3 500～4 000r/min离心10min。蒸馏水调零，532nm处比色。
　　1.2.3.3 10%组织匀浆液制备：称取1g皮瓣湿组织，用冰冷的生理盐水冲洗，除去血液放入5～10ml的小烧杯中，加入9ml生理盐水，先取少量的冰生理盐水，用小剪尽快剪碎组织块。将剪碎的组织块倒入玻璃匀浆器中，匀浆6～8min左右。匀浆液以3 000～4 000r/min离心，约10～15min，取适量的上清液进行测定。
　　1.2.3.4 组织中MDA含量计算公式：
　　组织中MDA含量（nmol/mgprot）*=×标准品浓度（10nmol/ml）*÷蛋白含量（mgprot/ml）
　　*nmol/mgprot为纳摩尔/毫克蛋白
　　1.2.4 皮瓣成活长度：术后逐日观察二组皮瓣大体情况，术后第7天皮瓣成活与坏死区域已明确，用游标卡尺测量皮瓣成活长度并记录。
　　1.2.5 组织学检查：将实验组切除的包膜组织用4%中性多聚甲醛固定,常规石蜡包埋。切制成4μm 厚的组织片，行HE（×10）染色组织学观察。
　　1.2.6 统计方法：采用SPSS统计软件进行统计分析，计量资料用实际采样值，均数的比较采用t检验。实验数据以x±s差表示。
　　
　　2结果
　　2.1皮瓣StO2变化：血氧测量仪测量结果对照组StO2要高于实验组（图3），二组间差异有显著性（P 　　
　　[参考文献]
　　[1]Schneider MS,Borkow JE,Cruz IT,et al. The tensiometric properties of expanded guinea pig skin[J].Plast Reconstr Surg,1988,81(3):398-405.
　　[2]Wang JQ,Zhao ZJ,Yu L,et al. The extra-long artery-pedicled back fascia skin flap for treatment of cervical contractive scar[J].J Plast Reconstr Aesthet Surg,2006,59(4):331-336.
　　[3]张志宏,欧阳钟石,王海波,等. 猪扩张后动脉筋膜皮瓣的张力与血流变化的关系[J].中华整形外科杂志,2010,26(4):286-289.
　　[4]Werkmeister JA,Tebb TA,White JF,et al. Collagenous tissue formation in association with medical implants[J].J Current Opinion in Solid State and Materials Science,2001,5:185-191.
　　[5]Tsai FC. A new method: perforator-based tissue expansion for a preexpanded free cutaneousperforator flap[J].Burns,2003,29(8): 845-848.
　　[6]Matt BH. Enhancement of expansion of guinea pig skin by local delivery of an anticontractile agent using a new bilument expander[J].J Ann Plast Surg,1990,24(3): 335-341.
　　[7]李丽莎,仇树林. 扩张包膜的研究现状[J]. 中国美容医学,2009,18(4):582-584.
　　[8]Morris SF.Effect of capsulectomy on the hemodynamics and viability of random-pattern skin flaps raised on expanded skin in the pig[J].Plast Reconstr Surg, 1989, 84(2): 323-325.
　　[9]赵作钧. 扩张皮瓣血运影响因素的实验研究与临床应用[D]. 中国协和医科大学博士论文, 2005:38.
　　[10]Sasaki GH, Krizek TJ. Functional blood flow and skin viability in random skin flaps constructed in expanded skin: delay phenomenon in action[M]. Plastic surgery research council,Durham,North Cardina,1983:19.
　　[11]Cariou JL,Hilligot P,Arrouvel C,et al. Experimental concept of periprosthetic membrane neo-flap with axial vascularpedicle[J].Ann Chir Plast Esthet,1991,36(6): 471-479.
　　
　　[收稿日期]2010-10-15 [修回日期]2010-12-28
　　编辑/张惠娟