【即时痰、夜间痰和晨痰分枝杆菌检查分析】 痰培养有分枝杆菌生长

　　[关键词] 结核分支杆菌； 检出结果； 分析 　　[中图分类号] R825.2 [文献标识码] A[文章编号] 1005-0515（2011）-11-352-01
　　
　　结核病控制项目把痰细菌学检查，即厚涂片法摆列首要位置，被形象的比喻为项目工作的“方向盘”。结核病实验室检查是发现传染源的最主要手段，有效的细菌检查是确诊结核病、选择治疗方案、考核疗效、指导整个化疗过程的主要依据[1]。现将2010年1-12月门诊可疑和肺部有异常阴影345份痰检结果分析如下。
　　1 材料和方法 1)留痰容器使用统一的直径4�、高度2�带盖塑料盒。2)受检人员根据项目“规划”查痰3份，即深咳的即时痰1份，夜间痰和晨痰各1份，并按质控要求，不合格重新送痰。一张载玻片上只能涂抹一份痰标本；每张载玻片只能用一次，不得清洗后再次使用；应使用95%乙醇擦拭(或浸泡)脱脂，经干燥、清洁、无油污、无划痕的新载玻片制备涂片，在玻片一端的1/3处注明实验室序号。3)制备涂片；小心打开承载痰标本的容器，防止产生气溶胶或使标本外溢；仔细观察标本，使用折断竹签茬端，挑取痰标本中干酪样脓样或可疑部分约0.05-0.1ML，于玻片正面右侧2/3处，均匀涂抹成10�×20�卵圆形痰膜。涂抹完毕后的痰标本，在结果报告前应暂时保留；为保证检验人员的安全，严禁在涂抹标本的同时，对载玻片进行加热。4)涂片自然干燥后，放置在染色架上，玻片间距保持10�以上；火焰固定(在5秒钟内将玻片置于火焰上烤4次)。5)滴加石碳酸复红染液盖玻片，火焰加热至出现蒸汽后脱离火焰，保持染色5分钟。染色期间始终保持痰膜被染色液覆盖，必要时可持续加染液。加温时不要使染液沸腾。6)流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去染液，沥去标本上剩余的水自痰膜上端外缘滴加脱色剂布满痰膜，脱色1分钟，如有必要，需流水洗去脱色液后，再次脱色至痰膜可视红色为止。流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去染液，沥去标本上剩余的水。7)滴加亚甲蓝染液，染色30秒钟。8)流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去复染液，然后沥去标本上剩余的水，待玻片干燥后镜检。9)染色合格的玻片，由于被亚甲蓝染色而呈亮蓝色。将染色后的玻片放置在报纸上，若透过痰膜不能分辨报纸上的文字，则表明该玻片涂抹过厚。
　　2 判断标准 1)阴性:镜检100个视野以上或连续观察5分钟未发现抗酸杆菌。2)阳性:(1＋)100个视野内有3-9条抗酸杆菌。(2＋)10个视野内有1-9条抗酸杆菌。(3＋)每个视野内有1-9条抗酸杆菌。(4＋)每个视野内有9条以上抗酸杆菌。受检人数345例，共1035份痰标本，3份痰标本阳性或其中2份，1份阳性者130例，涂阳检出率37.68%，其中即时痰116例(87.23%)，夜间痰检出126例(96.92%)，晨痰检出119例(91.54%)。
　　3 结果 3份痰均为阴性215例，占受检人数的61.31%，即时痰、夜痰、晨痰检查结果见表1、2。
　　表1三种痰标本检出痰菌量
　　表2即时痰、夜间痰、晨痰菌量比较
　　4讨论分析 1)夜间痰和清晨浓缩痰检出率较高，夜间痰检出率高于晨痰5.38%，高于即时痰9.69%，晨痰高于即时痰4.31%。三种痰标本菌量比较没有显著的差异变化。2)结核分枝杆菌俗称结核杆菌，是引起结核病的病原菌。可侵犯全身各器官，但以肺结核为多见。结核病至今仍为重要的传染病。估计世界人口中1/3感染结核分枝杆菌。据WHO报到，每年约有800万新病例发生，至少有300万人死于该病。根据2000年全国流行病学抽样调查，全国近5.5亿人口感染了结核病，明显高出全球1/3人口感染水平。我国现有肺结核病人450万，其中传染性肺结核病人150万，每年新发肺结核病人145万，每年因肺结核病死亡13万。在因结核病死亡的病人中，有21.6%的病人由于经济等原因从没有接受过结核病的治疗，83.8%的病人从未进行过登记报告，全国大约80%的结核病人在农村，结核病是我国因病致贫、因病返贫的主要疾病之一。在结核病防治工作中，结核病的细菌学检查占有重要的地位，痰检查结核分枝杆菌工作是发现传染源的主要手段，并有临床鉴别诊断及疗效考核的重要意义。过去临床诊断以X线检查为主，现在世界卫生组织专家委员会提出只有发现结核分枝杆菌的患者，才算1例结核病，无菌患者只是可疑病例，所以找到结核分枝杆菌方为诊断结核病的主要依据。要找到结核分枝杆菌，第一要素是痰标本的质量，是提高阳性率的关键。不合格痰的阳性率为1.25%，培养为2.5%。阳性率极低，极易造成排菌患者的漏诊。因此，取得真正合格的痰液，才能真正做到痰检标准化。在显微镜下每个视野中看到一条结核分枝杆菌，则每毫升痰中含有50万条。培养标本只要有100条即可培养出。3)肺结核病人痰内结核菌的检出率与采取标本的好坏有直接关系。因为痰液是由肺部结核性的坏死组织，气管内分泌物及口腔粘液等组成。只有病症坏死组织才有大量结核菌，因此，病人必须按医嘱采取合格标本，才能提高痰菌检出率。4)制作痰片标准、操作按照规程，镜检细致、结果准确。5)痰结核菌检查不仅是确诊肺结核的重要手段，也是制定化疗方案、考核疗效的主要依据，也是防治工作的重点对象。因此，对肺结核可疑者须反复验痰找结核菌，一般新发病人的结核菌阳性率可达50�左右。6)提高痰检质量水平，最有效的办法就是进一步完善痰检质控系统，强化痰涂片、染色、镜检的标准与规范操作，进一步延伸质控覆盖面，保持痰检人员的相对稳定，建立逐级定期的培训考核制度，使其从思想上重视，理论上掌握、操作上规范，痰检工作将会保持在较高的水平。7)痰标本的采集及标本性状，直接影响检查结果。标本的采集，要求临床医生医护人员指导肺结核可疑症状者，从肺部深处咳出的分泌物，标本量一般在3-5ML,采集标本时，应在远离人群的开放空间进行，或在通风良好的室内进行。合格的痰标本一般为干酪痰，褐色血痰或含少量新鲜血液的血痰、粘液痰。痰标本不合格时，应进一步指导并要求患者重新送检。正确的标本采集，是实验室细菌学检查诊断传染性肺结核的关键，也是确诊结核病、选择治疗方案、考核疗效的主要依据。8)痰涂片检查结核分枝杆菌，是当前发现和控制传染源的主要手段，是相应国家开展结核病控制项目时，非常符合成本效益原则的细菌学实验技术。反映某一国家或地区结核病疫情的严重程度的指标中，涂阳患病率、涂阳发病率是考核的重要指标。高质量的痰涂片镜检有其自身特有的优势。如：作为诊断手段，对传染性肺结核的诊断比X线的准确性高；技术相对简单，容易标准化和完成操作；建立AFB检查时需要设备投入少；检查成本低，易于接受；从收到标本到报告结果的时间短，能够满足临床诊断的需要；对涂阳患者的治疗效果，能够作出及时和准确的评价。
　　总之，痰涂片结核分枝杆菌检查，无论是从检查对象、标本的收集、患者的留痰宣传教育、采集痰标本地点等，必须通过医护人员与患者相互配合，提供宣传材料，耐心指导教育，保证痰标本的合格，只有这样，实验人员才能提供准确可信的检验结果，为诊断传染性肺结核、评价化疗效果、为流行病学疫情评价提供可靠的依据。
　　参考文献
　　[1] 卫生部疾病预防控制局、卫生部医政司、中国疾病预防控制中心.中国结核病防治规划实施工作指南2008版[M].中国协和医科大学出版社,2009,7.