血常规直方图 血小板的计数及其直方图异常的影响因素浅析

　　[摘要] 对仪器法测定血小板(PLT)的影响因素进行分析，排除假性增高和假性降低情况，及时准确地为临床提供可靠的诊治依据。通过方法使用血液细胞分析仪（COULTER DIFF2）及显微镜手工法法同时对120血小板计数与直方图异常的标本进行对比分析。全自动血细胞分析仪不能完全代替手工计数，对直方图异常的标本应分析原因，手工计数进行纠正或重新取血复查，以保证为临床的诊断和治疗提供可靠的信息资料。
　　[关键词] 血液细胞分析仪； 血小板； 直方图
　　[中图分类号] R331.1+43[文献标识码] A[文章编号] 1005-0515（2011）-04-301-01
　　
　　随着科学技术的飞速发展，血细胞分析仪广泛使用，使临床检验工作提高到了一个新的水平，不仅能检测更多的实验参数，而且大大提高了检测结果的准确性。我们通过分析细胞直方图变化，可以分析结果的准确性，加强质量管理，为临床提供可靠的数据。血小板（PLT）检测是研究止血与凝血障碍的重要指标之一，也是其他血小板参数可靠性的基础，其检测结果的可靠性至关重要。血小板由于体积小，特别是容易发生粘附、聚集和变性破坏，故常难以准确计数。血液细胞分析仪的普及，大大提高了工作效率，但对血小板检测，其结果往往不很稳定。血细胞分析仪检测血小板的影响因素很多，现探讨如下。
　　1 材料与方法
　　1.1 仪器：血液细胞分析仪（COULTER DIFF2）。
　　1.2 试剂：全部配套试剂和质控液。
　　1.3 检测方法：对日常标本进行分析，并对其中126余例血小板数量与直方图不符标本同时进行显微镜手工法复检。
　　2 结果
　　2.1 正常与异常直方图PLT镜检结果：在统计学上，差异无显著性。而异常直方图的标本，两种方法检测血小板的结果，差异有显著性。
　　2.2 不同MCV值血细胞分析仪与镜检法PLT结果比较，差异无显著性。在MCV＜70fl时，血细胞分析仪法与显微镜法相比差异有显著性。
　　3 讨论
　　采血过程中因操作缓慢、穿刺不顺、组织液混入，混匀不及时等均可促成血小板（PLT）聚集，导致计数结果偏低。在PLT直方图上提示有大颗粒存在，PLT聚集是影响PLT计数主要原因。对此种情况进行了显微镜镜检，并与正常图形进行对比发现，此种异常图形的出现，绝大部分是由PLT聚集所引起，结果极不可靠，须重新采血。
　　由于血小板（PLT）和红细胞（RBC）是在同一个检测系统中通过颗粒大小来加以鉴别的，不能识别小红细胞与红细胞碎片等，大量小红细胞的存在可引起PLT上限区域的改变。在平均红细胞容积（MCV）大于65fl时，仪器一般无PLT上限区域干扰报警，血细胞分析仪法与显微镜法相比，差异无显著性。在MCV小于65fl时，仪器往往提示上限区域有干扰，红细胞直方图上显示有小红细胞存在，如表2所示。研究发现，MCV值越小，小红细胞数量越多，被记录的PLT数就越多，血小板计数值就越高，须采用手工法计数血小板。
　　血细胞的检测结果，尤其是血小板（PLT）的结果，直接反映试剂的质量。原则上强调使用与仪器检测原理相匹配的试剂［1］。溶血剂是血细胞分析仪试剂中的主要试剂，能将红细胞溶解，并能使白细胞的体积发生规律性变化。理论上讲PLT计数时的脉冲大小只与稀释液的性能和仪器的设置有关，与溶血剂的性能无关。但实际工作发现，若溶血不完全，由于红细胞碎片冲洗不彻底将引起PLT假性增高。此外，稀释液的渗透压、离子强度等亦可影响检测结果。特别注意的事，试剂应避免污染，否则，杂质微粒会使本底增高，导致最后计数结果偏高。
　　抗凝剂的种类对检测结果影响较大，国际化学标准化委员会（ICSH）推荐用EDTA二钾抗凝。另外，血液和抗凝剂比例也会影响检测质量。血液比例过高时，由于抗凝剂相对不足，血浆中出现微血块的可能性增加。微凝块可能堵塞仪器影响检测结果。如果血少，抗凝剂的浓度增高，血小板会肿胀、崩解、产生正常PLT大小的碎片，从而无法得出正确的结果［2］。
　　在正常情况下，血细胞分析仪对血细胞体积的识别有明显的体积界限：PLT2～30fl。血细胞分析仪计数血小板原理设计计数阈值，当血小板体积超过计数阈值上限时。这些体积偏大的血小板被误认为小红细胞而不被纳入血小板计数范围，使血小板计数结果偏低。从表1来看，大PLT引起仪器计数结果偏低。故临床上如遇到肾脏移植、某些血液系统疾病和不明原因血小板减少患者应进行人工计数校正；一般来说，PLT体积异常小的情况极少见，故不作讨论。
　　另外还有药物对血小板计数的影响，药物种类繁多，代谢机理复杂，其成分干扰血细胞分析仪计数结果，长期应用地高辛、青素、双氢克脲塞、硫酸镁等药物均可引起血小板减少。临床工作中我们也遇到过药物干扰引起血小板计数假性升高病例。当临床遇到不明原因血小板异常者，应显微镜手工法进行校正。
　　参考文献
　　[1] 朱芸.不同血液分析仪试剂使用的比较[J].河北医药，2000，22(11)：854-855.
　　[2] 刘健.抗凝剂对血小板及其参数检测结果的影响分析[J].国际医药卫生导报，2004；10(8)：64-65.